弓形虫PCR检测试剂盒的组装和初步应用

研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能扩增出弓形虫特异性基因MIC3片段,与猪球虫、贾第虫、猪旋毛虫和隐孢子虫无交叉反应;该检测方法最低能够检测到10个弓形虫速殖子的DNA,不同批次的试剂盒对同一样品检测和同一批次对不同样品检测,有较高的重复性和稳定性,且常温下可保存1年以上,临床应用效果显著。该检测试剂盒对弓形虫病早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。

小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒组装和初步应用

本试验旨在研制小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据小鹅瘟和鹅病毒性肠炎基因序列,设计合成一对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性和保存期进行研究,之后进行临床扩大试验。该二联PCR诊断试剂盒能扩增出预期的小鹅瘟375bp核酸片段和鹅病毒性肠炎223bp核酸片段,与鸭瘟病毒、鹅副黏病毒无交叉反应;最低能检测到小鹅瘟病毒104 ELD50/mL,雏鹅新型病毒性肠炎病毒2.5×10-1ELD50;不同批次的试剂盒对同一样品检测结果一致;常温下至少可保存5个月;临床应用效果显著。该二联PCR检测试剂盒能够对小鹅瘟和雏鹅病毒性肠炎早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。

堆型艾美耳球虫cSZ1基因的克隆与分析

[目的]分析堆型艾美尔球虫cSZ1基因序列,为研制球虫疫苗提供候选抗原。[方法]根据堆型艾美尔球虫基因序列,设计合成引物,RT-PCR扩增堆型艾美尔球虫长春株cSZ1基因并测序。[结果]与GenBank中发表的堆型艾美尔球虫cSZ1基因序列相比,堆型艾美尔球虫长春株cSZ1基因发生了5个核苷酸变异,两者的核苷酸序列同源性为99.47%,两者编码区的核苷酸序列同源性为99.61%。堆型艾美尔球虫长春株cSZ1基因ORF内有2个变异位点。其中,A185G变异导致了所编码氨基酸由缬氨酸变为异亮氨酸。[结论]cSZ1基因编码蛋白可以作为球虫疫苗的候选抗原。

弓形虫疫苗的研究概况及前景

弓形虫是重要的机会性致病原虫,广泛寄生于人体及动物的组织细胞内,引起严重的人兽共患病。呈世界性分布,人体感染率较高的有美国、古巴、法国、英国、新加坡、东非和巴西等。我国各省（区、市）均有人体弓形虫感染报告。20世纪末,我国人群弓形虫感染率为8%～15%,人体致病分为先天性弓形虫病和获得性弓形虫病,先天性弓形虫病可导致孕妇流产、早产、畸胎和死产,在受染成活的婴儿中有85%在20岁以前会出现视网膜、

脑梗死患者颈部CTA结果分析与评价

目的:通过分析脑梗死患者颈部CT血管造影(CTA)的结果,评价其诊断价值。方法:选取2011-2012年在本院进行治疗的脑梗死患者65例,对患者进行CTA检查,分析患者的CTA检查结果,探究其对于脑梗死患者的诊断价值。结果:在65例患者中,发现颈动脉狭窄59例,正常未发现颈动脉狭窄6例,检出率为90.77%;共检测血管130支,共有89支狭窄的血管,其中轻度狭窄的血管为52支,所占比例最大(58.43%);而在相应的血管中,颈内动脉有78支狭窄,所占比例最大(87.64%)。结论:对于脑梗死患者来说,进行颈部CTA检查,对于颈部血管的形态显示的比较清楚;另外也能观察周围的毗邻关系,颈动脉狭窄的检出率比较高,对于脑梗死患者病因的诊断具有一定的临床应用价值。

乳腺癌钼靶X线的诊断体会

目的回顾乳腺癌钼靶X线征象,总结经验,提高诊断准确率。方法总结分析我院2011年中经手术病理证实72例乳腺癌的X线表现。结果 72例乳腺癌中,直接征象:16例表现为小于临床测量的肿块,37例肿块伴毛刺;11例表现为恶性钙化;8例表现局限性致密浸润;72例乳腺癌伴有或不伴有漏斗征、酒窝征、厚皮征、恶性晕圈征、恶性大导管征、异常血管征、塔尖征、彗星尾征、腋淋巴结肿大等间接征象。结论准确识别乳腺癌钼靶X线征象,对乳腺癌的正确诊断具有重要作用。

猪弓形虫PCR检测方法研究及初步应用

以微线粒体MIC3基因作为弓形虫特异的遗传标记,建立了猪弓形虫特异PCR检测方法。经过试验摸索出猪弓形虫PCR检测的最佳反应条件,对敏感性和特异性进行研究,该方法能特异性地扩增出弓形虫基因组中相应片段,与微小隐孢子虫,贾第虫、旋毛虫和球虫等相关寄生虫基因组DNA无交叉反应;最低能检测到10个弓形虫速殖子的DNA。该方法的各项指标达到了弓形虫的检测要求。

急性胰腺炎的CT诊断分型对临床预后影响分析

目的运用CT对急性胰腺炎患者进行诊断分型并进行相应治疗,观察其临床预后之间的差异。方法对我院收治的240例重症胰腺炎患者进行CT检查确诊分型,再随机分成对照组和试验组。对照组5种类型均进行急性胰腺炎的常规治疗方案;试验组的A-E不同类型型,分别采用对应的治疗方案。比较两组患者的并发症情况、手术情况、死亡情况、住院天数,进行分析。结果试验组和对照组的并发症发生率、手术进行率、治愈率、病死率、住院时间的比较均具有统计学差异(P<0.05)。结论急性胰腺炎运用CT诊断分型,对判断预后以及采取恰当治疗效果佳,值得被运用在临床。

一起绵羊焦虫病的诊治

绵羊焦虫病是家畜的一种血液寄生虫病,主要寄生在红细胞中,绵羊的焦虫病死亡率很高。该病发生具有明显的区域性和季节性,一般经蜱爬行或叮咬进行传播。羊只发病时间为每年的3～5月,4月份为发病高峰期,6月以后很少有羊发病。该病的发生给养羊业造成极大的经济损失。1发病情况2011年4月白城地区某绵羊养殖户带病羊和病死羊来我院就诊,叙述其羊群精神沉郁,消瘦,

一起绵羊焦虫病的诊治

（一）发病情况2011年4月白城地区某羊养殖户带病羊和病死羊前来就诊，称其羊群精神沉郁，消瘦，食欲减退，反刍迟缓，体温升高，使用安乃近等进行治疗，体温有所回落，停药后，又高烧。不见好转，部分羊血尿及便秘，有重病羊已经死亡。

一例猪伪狂犬病的诊治

1发病情况 吉林某家新办猪场，场址选择在山边，不设围墙，鼠患相当猖獗．．猪场有母猪200头，公猪10头，采用本交繁殖，种猪引进未采取任何检疫措施，饲养水平一般，所有猪都接种过猪瘟疫苗、猪肺疫与猪丹毒二联莳、猪链球菌等．

弓形虫疫苗研究进展

弓形虫是细胞内寄生的一种原虫,弓形虫病是由弓形虫引起的一种重要人兽共患寄生虫病,弓形虫疫苗作为防控弓形虫病的重要措施是目前研究的热点。弓形虫进入机体后以细胞免疫为主,使得疫苗可以发挥最大功用。疫苗的免疫效果与候选抗原和佐剂的使用密切相关,不同类型的抗原和佐剂用于疫苗中能够产生不同的免疫效果。目前,弓形虫疫苗的候选抗原主要以虫体特异组分蛋白和新型表位基因为主,佐剂也从传统的弗氏佐剂拓展到了霍乱毒素、透明质酸酶和CpG-ODN等。综合考虑各方面因素进行疫苗研制,将成为生产具有理想保护性弓形虫疫苗的研究方向。

柔嫩艾美耳球虫rhomboid抗原基因在卡介苗中的克隆与表达

以含柔嫩艾美耳球虫rhomboid基因的重组质粒为模板,应用PCR方法扩增该基因完整开放阅读框,克隆至pMD18-T载体中。分别用限制性内切酶PstⅠ/ClaⅠ和PvuⅡ/ClaⅠ进行双酶切,将rhomboid目的基因克隆到大肠杆菌-分支杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pRho-261和pRho-361。将重组质粒电穿孔转化卡介苗,经热诱导后对其表达产物进行SDS-PAGE和western blot分析。结果表明成功构建了两个重组质粒,其表达产物与柔嫩艾美耳球虫阳性血清具有免疫反应性,为重组卡介苗在鸡球虫病防治方面的研究奠定了基础。

柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因的克隆与序列分析

根据已发表的柔嫩艾美耳球虫(Houghton株)基因序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR扩增柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,将扩增的片段连入pMD18T载体,筛选阳性克隆进行测序和序列分析。结果表明,成功克隆了柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因,测得ORF全长813bp;与GenBank中收录的Houghton株柔嫩艾美耳球虫的SAG2基因序列相比,有4个碱基发生变异,两者的核苷酸序列同源性为99.50%;柔嫩艾美耳球虫长春株SAG2基因的推导氨基酸序列同源性为99.63%,其中,A185G变异导致了编码氨基酸由谷氨酸变为甘氨酸(E62G),A247T变异导致了编码氨基酸由蛋氨酸变为亮氨酸(M83L),而其他核苷酸的突变为无义突变;SAG2抗原的N端和C端疏水性较强,并且N端前23个氨基酸为跨膜信号肽区,而中间有许多亲水性区域,且显示很强的抗原性。柔嫩艾美耳球虫长春株与Houghton株的SAG2基因编码蛋白相似性很高,具有很强的抗原性,可以作为球虫疫苗的候选抗原来进一步研究。

肾盂癌的多层螺旋CT诊断及其评价

目的探讨肾盂癌的多层螺旋CT表现和诊断价值。资料与方法对21例肾盂癌患者进行多层螺旋CT检查,包括平扫、常规三期增强以及多层螺旋CT尿路成像。结果所有患者CT平扫图像均显示为肾盂内的软组织肿块,增强后肿块未见明显强化。尿路成像显示为肾盂内的不规则形充盈缺损。结论多层螺旋CT检查已成为诊断肾盂癌的一种有价值的方法。

柔嫩艾美耳球虫SAG2基因的克隆及其在卡介苗中表达

为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体。双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-分支杆菌整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV361-SAG2,经电穿孔转染到卡介苗中,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建了重组质粒pMD18-T-SAG2和pMV361-SAG2,SAG2在卡介苗中高效表达,表达产物能够被柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别,表明具有良好的免疫原性,为下一步重组卡介苗对鸡球虫病的免疫保护研究奠定了基础。

猪传染性胃肠炎诊断技术的研究进展

猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起猪病毒性腹泻的一种重要病原微生物。近年来,其检测技术取得了迅速发展。文章就该病诊断技术的研究进展作一综述,并对其检测新策略进行了展望。

小鹅瘟马源高免血清的制备及应用

采用JLDA株小鹅瘟抗原,高免马匹后经采血精制可获得滴度为1∶64～1∶128的抗小鹅瘟高免血浆。通过胃蛋白酶消化-硫酸铵盐析的工艺,得到小鹅瘟马源高免血清。按0.5 mL/羽剂量共预防雏鹅52.48万羽,按1 mL/羽～3 mL/羽剂量共治疗感染雏鹅5.66万羽,证实该抗血清效价高,对雏鹅的预防保护率为95.58%,对感染雏鹅的治愈率为92.87%,表明对小鹅瘟防治安全高效。马采血量大,成本低,同时有效地避免了同源动物间其他疫病的感染和强毒的散播,较之用鹅作为血清来源动物经济和社会效益显著。

256排螺旋CT脑血管造影对破裂脑动脉瘤的诊断价值

目的:研究256排螺旋CT脑血管造影(CTA)在破裂脑动脉瘤诊断中的应用价值。方法:对40例因蛛网膜下腔出血(SAH)临床疑为脑动脉瘤破裂的患者行256排脑CTA检查,评价动脉瘤的位置、大小及形态。结果:40例自发性SAH患者病例中发现动脉瘤38例,256排脑CTA图像清晰显示动脉瘤的位置、大小及形态,38例患者均依据256排脑CTA检查结果成功进行治疗。结论:256排脑CTA对破裂脑动脉瘤的诊断具有较高的应用价值。

陈旧寄生虫标本整理试验

经六步法全方位整理陈旧寄生虫瓶装标本17种规格,1138件。全貌焕然一新,技术价值陡增,为标本室建立近50年来标本全息最好时期。新资料、新数据、新照片存入电脑管理。其中试验筛选的玻璃胶新材料封闭标本瓶已近5年,仍保持牢固严密、不透气、不漏液、不裂缝良好状态。解决了几十年来存在的标本瓶封闭不严、保存液长年挥发,造成标本干瘪变形的损坏和挥发的甲醛对人身健康危害的难题,为长期沉寂的标本封闭技术的一次创新。