体外细胞模型和高效液相质谱联用分析预测黄芪中的活性成分

利用体外细胞模型模拟体内细胞对中药有效成分的特异性吸收,结合高效液相色谱/质谱分析筛选中药黄芪中的生物活性成分。将中药黄芪提取液与Caco-2细胞及红细胞分别混合培养,破碎与药材结合后的细胞,使之释放出结合的药材中的成分。运用高效液相色谱/飞行时间质谱(HPLC-ESI/TOFMS)分析中药黄芪提取液与活性细胞有结合的成分,并对其进行结构鉴定。结果显示:黄芪中有10个化合物与Caco-2细胞结合,14个化合物与红细胞结合。本方法可用于预测口服药物在体内的吸收以及与特定靶细胞的结合情况,特异性地筛选中药复杂体系中的药效物质基础。

内皮细胞提取和高效液相色谱－电喷雾飞行时间质谱联用预测玄参中的活性成分

目的:应用内皮细胞提取和高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱联用(HPLC-ESI/TOF MS)预测玄参的活性成分。方法:应用内皮细胞作为靶细胞,中药提取液中的活性成分可选择性地与其结合,洗去未结合的成分,用HPLC-ESI/TOF MS对细胞解离液中的成分进行分析。结果:从玄参提取液中检测出6个可与内皮细胞结合的成分,其中3个鉴定为安格洛苷C(angoroside C)、肉桂酸(cinnamic acid)和哈巴俄苷(harpagoside)。结论:细胞解离液中检测到的成分为玄参中与内皮细胞有结合作用的成分,本方法可用于预测中药中与内皮细胞相结合的活性成分。

番荔枝属植物树皮中二萜类成分的HPLC-ELSD分析

目的建立一种HPLC—ELSD分析方法，测定不同产地、不同种番荔枝属植物树皮中4种贝壳杉烷型二萜的含量。方法采用Agilent ZORBAX 80A Extend—C18柱，0．3％冰醋酸溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱[0～40min，60％～0％（A）；40％-100％（B）]，流速0．6mL·min^-1，蒸发光散射检测器（ELSD）。结果4种贝壳杉烷型二萜与相邻杂质能较好分离，理论塔板数按16α—hydro-19-acetoxy—ent—kauran-17-oic acid（Ⅲ）计算不低于49000。贝壳杉烷型二萜成分以海南产圆滑番荔枝中含量最高。结论该方法精密度高、分离效果好，分析准确，适合于该属植物中二萜类成分的含量测定；不同产地、不同种植物中各成分均存在一定的差别。

Cr掺杂对尖晶石型CoFe_(2-x)Cr_xO_4的结构及光催化性能的影响

采用溶胶-凝胶法制备了尖晶石型铁氧体CoFe2-xCrxO4的系列样品,通过XRD、SEM对纳米颗粒的结构、形貌进行了表征。结果表明,所合成的样品均为尖晶石型,只是最高衍射峰的位置发生偏移,使得样品的结构从正交晶系向单斜晶系转变;未掺杂样品CoFe2O4的形貌呈立方颗粒状,粒径均匀,边长约为1μm,掺杂后的样品CoFeCrO4颗粒为圆球状,尺寸为100～200nm,且有明显团聚现象。通过测定样品对甲基橙的降解情况研究了其光催化活性,结果表明,经过B位Cr3+掺杂的CoFe2-xCrxO4样品,光催化活性明显提高。

尖晶石型铁氧体CoFe_(2-x)Ni_xO_4(x=0.1～0.5)结构及光催化性能的研究

采用溶胶-凝胶法制备了铁氧体CoFe2-xNixO（4x=0.1~0.5）系列样品。利用XRD,SEM对纳米颗粒的结构、形貌进行了表征。结果表明,所合成的样品为尖晶石型,呈圆球状,粒径均匀,直径约为50nm。通过甲基橙的降解情况对其脱色率进行了研究。结果表明,经过B位Ni2＋掺杂的CoFe2-xNixO（4x=0.1~0.5）系列样品,其脱色率明显提高。

不同采样法对洁净室表面微生物检测效果的比较研究

目的:通过不同采样方法对模拟洁净室不同表面材料微生物检测结果的研究,寻求最佳的洁净室表面微生物采样法。方法:比较3种采样法对4种载体片材料上5种标准菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌3种细菌,白色念珠菌和黑曲霉2种真菌)回收率的影响,评估载体材料和采样方法对洁净室表面微生物检测效果的影响。结果:采用表面擦拭-涂布采样法对模拟洁净室环境采样,在聚四氟乙烯载体材料上菌种的平均回收率最高;采用接触皿采样法,玻璃载体材料的平均回收率最高;采用表面擦拭-水浸泡采样法时,聚四氟乙烯的平均回收率最高。结论:洁净室表面微生物采样方法应根据不同的室内表面材料选择,对于玻璃等相对光滑的载体表面应采用接触皿采样法,而对于聚四氟乙烯等粗糙的载体表面应采用表面擦拭-水浸泡法。

注射用二羟丙茶碱有关物质的HPLC-QTOFMS分析

建立了高效液相色谱-四极/飞行时间质谱法测定注射用二羟丙茶碱中的有关物质。采用Eclipse plus C18色谱柱,以0.1%甲酸-甲醇(72︰28)为流动相。采用正离子模式采集数据。注射液中共检出4个有关物质,推断分别为茶碱、茶碱与二羟丙茶碱的聚合体、二羟丙茶碱的二聚体及其同分异构体。

HPLC-QTOFMS法测定马来酸依那普利及中间体中的对甲苯磺酸乙酯

目的:建立HPLC-QTOF MS测定马来酸依那普利及中间体N-[1-(S)-乙氧甲酰基-3-苯丙基]-L-丙氨酸中对甲苯磺酸乙酯的方法。方法:采用Eclipse plus C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm),以20 mmol·L-1甲酸铵水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～2 min,10%→50%B;2～4 min,50%→60%B;4～7 min,60%→90%B;7～8 min,90%B),流速1.0 mL·min-1,柱温50℃;采用正离子模式采集数据。结果:对甲苯磺酸乙酯浓度在0.20～5.01μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9955);日内和日间精密度良好,RSD小于6.7%;定量限和检测限分别为0.4 ng、0.2 ng;马来酸依那普利及中间体回收率(n=9)分别为102.6%和90.8%。结论:本法简便、灵敏,可用于对甲苯磺酸乙酯的定量研究。

氨基己酸注射液中有关物质检查方法的研究

目的:对氨基己酸注射液中的有关物质进行研究。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.8μm),流动相为0.02 mol·L^(-1)甲酸铵缓冲液(含0.1%的甲酸)(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速0.4 m L·min^(-1),柱温30℃;在电喷雾离子源正离子模式下,对杂质进行定性研究,确定主要杂质的结构。采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.55%己烷磺酸钠溶液(25∶75,含1%磷酸二氢钾,用磷酸调节pH至2.2),流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长210 nm,对杂质进行定量测定。结果:建立了氨基己酸注射液中有关物质的检测方法,氨基己酸注射液中的主要杂质为己内酰胺与氨基己酸二聚体,含量分别为标示量的0.002%~0.02%和0.009%~0.05%。结论:本法可用于氨基己酸注射液中有关物质的检测。

肾上腺素原料药及盐酸肾上腺素注射液杂质的HPLC-QTOF MS分析

目的:建立HPLC-QTOF MS法测定肾上腺素原料药及盐酸肾上腺素注射液杂质。方法:采用Eclipse plus C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm),以5 mmol.L-1甲酸铵水溶液-0.1%甲酸水溶液(A)/乙腈(B)为流动相,流速为0.3 mL.min-1,梯度洗脱,梯度条件如下:0→4 min,2%B;4→10 min,2%～50%B;10→12 min,50%～90%B;12→15 min,90%B;柱温为30℃。采用正离子模式采集数据。结果:原料药和注射液中共检出3个杂质,分别为肾上腺酮、肾上腺素磺化物和4-[2-(丁基-2-基氨基)-1-羟乙基]苯酚。结论:本法简便、灵敏,准确,可用于肾上腺素原料药及制剂的杂质定性分析。

雷贝拉唑钠原料药中一未知有关物质的结构解析

采用离子阱-飞行时间串级质谱仪(LCMS-IT-TOF)定性分析雷贝拉唑钠原料药,检测到一未知杂质,比较雷贝拉唑和该杂质可能的裂解途径,推测其结构为2-[[[4-(3-甲氧基丙氧基)-3-甲基吡啶-2-基]甲基]亚磺酰基]-1H-氯代苯并咪唑。

卡铂注射液未知杂质结构及其与辅料的相关性研究

采用二维快速液相色谱-串联飞行时间质谱(UPLC-QTOF)对卡铂注射液中的未知杂质结构及其与辅料的相关性开展研究。一维采用苯基-己基硅烷键合硅胶色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),硫酸四丁基铵缓冲液(pH 7.5)-乙腈为流动相进行梯度洗脱,二维采用快速液相色谱-串联飞行时间质谱(UPLC-QTOF),HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾离子源(electrospray ionization,ESI+)模式下,采用MS^E采集模式,对待测未知杂质进行定性研究和分子量准确测定,初步确定杂质的结构。通过加速稳定性实验以及ICP-MS/MS、ICP-AES考察杂质与主药和处方中辅料的相关性。结果显示,某企业处方中加入了辅料依地酸二钠,反而与主药卡铂相互作用,生成含铂有关物质,从而导致卡铂降解产生更多的1,1-环丁烷二羧酸。因此,本研究表明依地酸二钠的添加加剧了卡铂注射液有关物质的增加,辅料添加的合理性值得进一步关注。

HPLC法测定盐酸吉西他滨原料及其注射用制剂的有关物质

目的采用梯度洗脱的HPLC法测定盐酸吉西他滨原料及其注射用制剂的有关物质,并利用LC-MS对碱破坏后得到的未知杂质进行进一步研究。方法使用C8色谱柱,以不同比例的0.14 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 2.5±0.1)和甲醇分别为流动相A和B,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,二极管阵列检测器,检测波长275 nm。结果吉西他滨主峰和各杂质峰均达到基线分离;胞嘧啶和吉西他滨分别在质量浓度0.467 6～4.676 mg·L-1和0.416 4～4.164 mg·L-1内呈良好线性,r分别为1.0000和0.999 8;盐酸吉西他滨的最低检测限为0.124 9ng。LC-MS结果显示碱破坏后得到的两个未知杂质为吉西他滨的同分异构体。结论本方法灵敏、准确,专属性强,为分析各个厂家的药品质量提供了一个科学合理的评价体系。

LC-MS/MS法同时测定知母提取物中7种成分的含量

建立了LC-MS/MS法同时测定知母提取物中7种活性成分(新芒果苷、芒果苷、异芒果苷、知母皂苷BⅡ、宝藿苷Ⅰ、知母皂苷AⅢ、菝葜皂苷元)含量的分析方法。采用SB-C18色谱柱,流动相A为0.1%甲酸溶液(含10 mmol/L甲酸铵),流动相B为乙腈,线性梯度洗脱;采用电喷雾离子(ESI)源、正离子扫描模式、多反应监测条件下进行定量分析。结果表明,所测7种成分的分离度良好,在相应浓度范围内线性良好,7种成分的定量限和检测限分别在0.02~0.63 ng/ml和0.01~0.29 ng/ml范围内。精密度、重复性、稳定性的RSD(n=5)均小于4%;平均加样回收率在90.9%~108.9%,RSD(n=9)均小于4.5%。该方法可靠、准确、快速、重复性好,可用于知母中7种成分的含量测定,并为知母药材的质量控制提供依据。