腹腔镜辅助胃癌根治术的临床疗效及对血清炎症因子水平和氧化应激指标的影响

目的探讨腹腔镜辅助胃癌根治术的临床疗效及对血清炎症因子水平和氧化应激指标的影响。方法选取2019年8月至2021年7月在延安大学附属医院行胃癌根治术的患者95例,根据手术方法的不同分为腹腔镜组(采用腹腔镜胃癌根治术治疗,48例)和开腹组(采用开腹胃癌根治术治疗,47例),比较两组患者的手术相关指标、术后3个月的临床疗效、手术前后的血清炎症因子[血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)]水平和氧化应激指标[总抗氧化能力(total antioxidant capacity,TAC)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)]以及并发症发生情况。结果腹腔镜组患者的手术时间、估计出血量、切口长度、住院时间及排气时间均明显低于开腹组,差异有显著性(P<0.01),两组淋巴结清扫数目差异无显著性(P>0.05)。术后3个月腹腔镜组的客观缓解率(64.58%)明显高于开腹组(36.17%),差异有显著性(P<0.01)。术前两组血清HO-1、TNF-α、IL-6、CRP水平比较差异无显著性(P>0.05);术后1d和3d,两组血清HO-1、TNF-α、IL-6、CRP水平明显高于术前,且开腹组血清HO-1、CRP水平明显高于腹腔镜组,差异均有显著性(P<0.05);术后1d,开腹组血清TNF-α、IL-6水平明显高于腹腔镜组(P<0.05),术后3d,两组血清TNF-α、IL-6水平比较差异无显著性(P>0.05)。术前两组TAC、SOD、CAT、ROS水平比较差异无显著性(P>0.05);术后1d和3d,腹腔镜组TAC、SOD、CAT水平明显高于开腹组,ROS水平明显低于开腹组,差异均有显著性(P<0.05)。腹腔镜组术后并发症发生率明显低于开腹组,差异有显著性(P<0.05)。结论与传统开腹手术相比,腹腔镜胃癌根治术具有较好的临床效果,并能有效减轻炎症反应、降低氧化应激水平,有利于促进患者康复。

辣椒SRAP-PCR反应体系的建立与优化

SRAP标记(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)是由Li和Quiros发展了一种新的分子标记技术。SRAP标记具有简便、稳定、中等产率、在基因组中分布均匀的特点,已经应用于在水稻、棉花、油菜、马铃薯、苹果、柑橘类果树、樱桃、梅子、大蒜、莴苣及芹菜等植物和水稻稻瘟病的研究中,对开展遗传图谱构建、基因定位与克隆、比较基因组学、cDNA指纹图谱、生物多样性研究、预测杂种优势等研究是一个十分实用的工具。本研究对辣椒SRAP反应体系的程序、模板、Mg2+等参数进行优化研究,结果表明:辣椒的PCR程序为94℃预变性5min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5循环,94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35循环,最后72℃延伸10min;25滋l反应体系中,模板量为15ng,Mg2+为2.0mmol/L。本研究建立的辣椒SRAP体系重复性好、稳定性强。

相关序列扩增多态性(SRAP)一种新的分子标记技术

SRAP是一种新的DNA分子标记,具有简便、稳定、中等产率和容易得到选择条带序列的特点。SRAP是一种基于PCR技术的新的分子标记技术,其利用独特的引物设计对ORFs进行扩增,上游引物长17bp,对外显子进行特异扩增,下游引物长18bp,对内含子区域、启动子区域进行特异扩增,因个体不同以及物种的内含子、启动子与间隔长度不等而产生多态性。扩增产物用变性的聚丙烯酰胺凝胶分离,然后用放射自显影检测。本文在阐述SRAP的原理和流程后,详细论述了SRAP标记目前在植物遗传图谱构建、遗传多样性、基因定位、比较基因组学、杂种优势预测等方面的研究进展及应用前景。

苏云金芽孢杆菌Cry1Ca7蛋白定点突变对甜菜夜蛾杀虫活性的影响

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白Cry1Ca7对重要的农业害虫甜菜夜蛾具有较高毒力。【目的】本文的研究目的是通过定点突变的方法获得毒力发生改变的毒蛋白,为下一步研究工作提供有价值的实验材料。【方法】利用重叠引物PCR技术对cry1Ca7基因进行定点突变,获得了10种突变基因,通过生物活性测定的方法确定了各突变基因表达产物对甜菜夜蛾的杀虫活性。【结果】活性降低的突变毒蛋白有G138S,T221D,T221R,N251S,439GGT440,N306R,W376F,R522E和R570G,其中,位于DomainⅡ内的突变的活性依次是439GGT440<N306R<W376F;位于DomainⅢ内的突变R522E<R570G,二者的活性较Cry1Ca7也有明显降低;只有位于结构域Ⅰ中的R148G,产生了活性提高的突变毒蛋白,其毒性较Cry1Ca7提高了6倍,而同样位于DomainⅠ内的突变T221D<T221R<G138S<N251S,尤其是T221D活性完全丧失。研究结果表明,在结构域Ⅰ中的突变更容易产生活性提高的突变蛋白,而结构域Ⅱ和Ⅲ较难获得毒力提高的突变蛋白。【结论】本项研究所获得的这些活性发生不同变化的蛋白为揭示Cry蛋白的杀虫机理提供了基础材料,而活性提高的诱变基因及其表达产物将可作为新的杀虫资源,用于抗虫遗传工程菌和转基因植物的构建。

60Coγ射线对石斛兰辐照效应的影响

采用不同辐照剂量(10、20、30、40 Gy)的60Coγ射线处理088、166、168三个石斛兰品种幼苗(四叶期苗),通过观测辐照对成活率、株高、假鳞茎长、叶片长、宽的影响。结果显示:半致死剂量在30～60 Gy之间,品种间存在差异;不同辐照剂量对叶片宽度影响不明显,而对株高、假鳞茎长、叶片长均有抑制作用,其中30、40 Gy的辐照剂量作用明显,但品种间有一定的差异。

辣椒31个优良自交系的亲本类群分析

以包含我国重要尖椒品种的亲本材料在内的31份优良自交系为材料,利用SRAP标记和基因型值分析技术开展了辣椒自交系间遗传差异的分析与类群划分研究。结果表明:在30个引物组合中,27个引物组合可以在自交系间扩增出多态性条带,共扩增出310个多态性条带,平均每个引物组合产生11.5个多态性条带,显示出SRAP技术具有较强的分析效率;基于SRAP标记和Yule相似系数对这些自交系进行的聚类分析中,可以基本区分辣椒的2个变种(C.annuum var.grossum和C.annuum var.longum),而且可以反映出自交系间的亲缘及系谱关系;在相似系数为0.67处,可将这31个自交系分为4个类群;基于基因型值和标准Euclidean距离对这些自交系进行的聚类分析可成功地将辣椒的两个变种完全区分;在遗传距离约4.5处,可将这31个自交系分为4个类群;自交系间基于SRAP标记与基因型值的遗传距离存在一定的相关性。

石斛兰亲缘关系的SSR分析

利用SSR标记分析石斛兰品种遗传多样性及亲缘关系,为合理利用石斛兰种质资源、培育观赏价值高的石斛兰新品种提供依据。从22对SSR引物中筛选获得11对多态性引物,对28个市场流行石斛兰品种的基因组DNA进行扩增。共获得158条多态性位点,平均每个引物产生14个多态性条位点。材料间遗传相似系数变化范围为0.04～0.85,根据SSR标记的结果,采用UPGMA法进行聚类分析,在相似系数0.295处将28份石斛兰种质分为5类。结果表明,石斛兰品种具有丰富的遗传多样性,遗传基础较宽;SSR标记技术很好地从分子水平上揭示石斛兰品种的遗传背景、亲缘关系。

酒糟栽培食用菌研究现状

该文从适宜在酒糟中栽培的食用菌品种、酒糟栽培食用菌效果、酒糟预处理技术及栽培料配方等方面对不同酒糟栽培食用菌的现状进行了综述,并对酒糟生产食用菌发展方向进行了展望。酒糟栽培食用菌的研究重心应从传统的可行性研究、配方筛选,转向研究酒糟适宜食用菌生长的作用机理、菌株筛选、食用菌的营养品质、食品安全、酒糟菌糠的再利用,以及工厂化生产的栽培工艺研究等。酒糟栽培食用菌为酿酒业发展循环经济提供了一个前景广阔的发展方向,提升了酒企新形势下的竞争力,同时也为食用菌产业的发展增添了新的动力。

海南石斛属植物亲缘关系的SRAP分析

利用SRAP技术对海南9种石斛种质资源的遗传多样性及亲缘关系进行分析。从30对SRAP引物中筛选获得18对多态性引物,对石斛属9个种的基因组DNA进行扩增。共获得285条多态性条带,平均每个引物产生15.8个多态性条带。材料间遗传相似系数变化范围为0.179～0.636,说明本实验所测试的材料具有较广的遗传变异。根据SRAP标记的结果,采用UPGMA法进行聚类分析,将石斛属的9个种分为4类。结果表明:密花石斛和华石斛之间的亲缘关系最近,美花石斛和海南石斛之间亲缘关系最远;同时也说明海南省内分布的石斛具有丰富的遗传多样性,SRAP标记技术很好地从分子水平上揭示了石斛种质资源的遗传背景、亲缘关系。

石斛种质资源遗传多样性的RAPD分析

利用RAPD技术对10种石斛种质资源的遗传多样性及亲缘关系进行了分析。从100条10bp的RAPD引物中筛选获得17条多态性引物,对石斛属的10个种的基因组DNA进行扩增。共获得200条多态性带,平均每个引物产生11.8个多态性条带。材料间遗传相似系数变化范围为0.356～0.676。根据RAPD标记的结果,采用UPGMA法进行聚类分析,将石斛属的10个种区分开来,划分为4类。结果表明:RAPD标记技术较好地从分子水平上揭示石斛种质资源的遗传背景、亲缘关系。

分子标记预测作物杂种优势的研究进展

杂种优势育种是蔬菜作物的一种重要育种技术。国内外利用RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR等分子标记技术开展了作物杂种优势预测的方法研究,取得了富有启示性的研究结果。本文分析和述评了国内外作物杂种优势分子预测的遗传距离法、杂种优势类群法、QTL法认为基于QTL的杂种优势类群和遗传距离相结合的方法将是作物杂种优势预测研究今后的研究重点和热点,并最有可能在育种实践中得以应用。

园艺植物遗传图谱的研究进展

遗传图谱的构建是基因组研究中的重要环节,是基因定位与克隆、分子标记辅助育种的基础。对遗传图谱的构建步骤、分子标记的种类、作图群体的种类及目前国内外园艺植物遗传图谱的研究进展进行简要概述,探讨了目前该领域研究中存在的主要问题及今后的研究方向。

应用SRAP分子标记评价辣椒自交系的遗传关系

将新型分子标记SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)应用于辣椒自交系的遗传关系的研究,采用30个引物组合对31个辣椒自交系进行扩增,其中有27个引物组合可以获得多态性扩增,显示了较高的多态性。27个引物组合共扩增出310个多态性条带,平均每个引物组合产生11.5个多态性条带。31个自交系间的相似系数为0.133～0.997。聚类分析将31个自交系分为:在相似系数D为0.55处,将辣椒的2个变种分开;在相似系数D为0.67处,将辣椒分为4类。结果显示,SRAP是辣椒自交系研究中一种较好标记,其分类结果有助于利用这些自交系进行杂交亲本的选配。

RSAP分子标记技术在园艺植物研究中的应用

限制性位点扩增多态性(RSAP)是一种基于PCR的新型植物分子标记技术,具有操作简便、结果稳定、效率较高的特点。该技术以植物基因组上广泛分布的限制性位点位为靶标,通过独特的引物设计和PCR扩增程序,无需限制性酶切环节,只要一个简单的PCR,即可产生基于植物限制性位点的多态性标记。阐述了RSAP的原理与流程,对该技术的优势和应用情况做了总结,并对其前景进行了展望。

基于分子分类的石斛兰杂交结实性探讨

为了探讨石斛兰的杂交结实性,以42个主栽品种和12个原生种为研究对象,利用SRAP分子标记对其亲缘关系进行分析,并根据分析结果进行杂交配组。结果表明,在配组的杂交组合中,按组组合结实率和单个组合结实率排列:品种组内杂交组合>品种组间杂交组合>原生种之间杂交组合>品种与原生种间杂交组合,正反交结实率存在较大差异。说明在石斛兰的杂交中,亲缘关系较近的结实率高,较远的结实率低。本研究可为石斛兰育种杂交亲本选配提供理论依据。

^(60)Co-γ辐射石斛兰组培苗的SRAP分析

为研究石斛兰辐射诱变后的植株性状遗传变异程度,本研究利用SRAP分子标记对不同剂量^(60)Co-γ射线处理后的石斛兰D.soni‘a166’品种组培苗进行分析,探讨其辐射诱变效应,确定最佳的辐射剂量。结果表明:利用从100对引物中筛选出的12对引物对不同剂量处理的石斛兰基因组DNA进行扩增,共扩增出了216条带,其中多态性带41条,多态率为19.0%。对不同处理及对照扩增的谱带进行聚类分析发现,各个剂量的辐照处理群体都发生了不同程度的变异,20 Gy处理整体变异程度最大,5 Gy变异最小。因此,认为石斛兰D.soni‘a166’品种组培苗的最佳辐射诱变剂量为20 Gy。

nm23-H1蛋白在急性髓细胞白血病患者中的表达及其疗效

目的探讨nm23-H1蛋白在急性髓细胞白血病(AML)患者中的表达及其疗效。方法 86例急性髓性白血病患者设为观察组,79例健康人群作为对照组。结果 86例AML患者免疫分型阳性表达率由高到低依次为CD33(94.17%)、MPO(86.05%)、CD13(77.91%);CD13+组患者血清nm23-H1蛋白表达情况显著高于CD13-组(t=3.641,P<0.001)。CD33+组患者血清nm23-H1蛋白表达情况显著高于CD33-组(t=2.699,P=0.008)。MPO+组患者血清nm23-H1蛋白表达情况显著高于MPO-组(t=3.402,P=0.001)。初治组患者、CR组、复发组血清nm23-H1蛋白表达显著高于对照组(P<0.05)。结论 AML免疫抗原CD13、CD33、MPO表达阳性患者血中nm23-H1蛋白呈现表达上调。

单药地西他滨治疗老年急性髓系白血病的疗效观察

急性髓系白血病（AML）是血液系统中髓系造血干/祖细胞恶性克隆性疾病,以贫血、发热、感染、细胞髓外浸润等为临床表现,病情危重,预后较差。临床多采用造血干细胞移植技术治疗AML,此疗法虽然能提高生存率,但由于多数AML患者的年龄已过60岁且合并较多慢性基础性疾病,造血干细胞移植可能不被老年患者所耐受。

石斛属植物遗传多样性的RSAP分析(英文)

[目的]用RSAP标记技术分析中国境内分布的33种野生石斛的遗传多样性及亲缘关系。[方法]建立石斛RSAP-PCR反应体系,从45对RSAP引物中筛选出33对多态性引物,对33种野生石斛的基因组DNA进行PCR扩增。[结果]这33对引物共扩增出2 047条带,其中多态性条带为2 044条,多态性比例99.8%,平均每对引物产生61.9条多态性条带。材料间遗传相似系数变化范围为0.081-0.442,说明本实验所测试的材料具有较广的遗传基础。根据RSAP标记的结果,采用UPGMA法进行聚类分析,将33种野生石斛分为6类。结果表明剑叶石斛和滇桂石斛之间亲缘关系最近,而华石斛与喇叭唇石斛、细叶石斛之间亲缘关系最远。[结论]石斛具有丰富的遗传多样性,该研究可为石斛属的分类、育种及杂交亲本的选择提供分子水平依据。

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白定点突变与新型生物农药的研发

综述了苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白的定点突变研究与细菌杀虫剂和转基因植物开发的关系。定点突变作为研究蛋白质结构与功能的重要手段之一,可以改变毒蛋白的特性,产生的突变蛋白比未突变的蛋白毒力更高,杀虫谱更广,为细菌杀虫剂和转基因植物的开发提供充足的后备资源;定点突变可以使细菌的晶体蛋白基因在植物中更好地表达;定点突变可以产生嵌合基因,转入植物体或微生物后,能有效地预防和延缓害虫的抗药性产生。