麻荆宣肺颗粒对人冠状病毒229E感染小鼠肺炎模型的治疗作用

目的 研究麻荆宣肺颗粒对人冠状病毒299E感染小鼠肺炎模型的治疗作用,为其临床应用提供参考。方法 建立人冠状病毒229E感染小鼠模型,感染当天连续给予麻荆宣肺颗粒共4 d。实验第5天动物称重后,眼眶取血,解剖取肺组织并称重,计算肺指数及肺抑制率,实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测肺组织中病毒载量,流式细胞术检测免疫细胞百分比,酶联免疫法(ELISA)检测肺组织和血清中炎性因子表达量,免疫组化法检测肺组织血管紧张素转化酶2(ACE2)及线粒体组装受体1(MAS1)表达量,组织病理学检测肺组织病变。结果 麻荆宣肺颗粒能显著降低人冠状病毒229E感染小鼠的肺指数(P<0.01),高、中、低剂量的抑制率分别为66.80%、53.20%、45.20%;并显著降低模型动物肺组织中病毒载量(P<0.01);显著升高模型动物外周血淋巴细胞百分比(P<0.05,P<0.01);显著降低模型动物肺组织和血清中炎症因子的含量(P<0.01);显著提高模型动物肺组织ACE2及MAS1的表达(P<0.05,P<0.01);且对支气管及肺泡组织的炎性病变有一定的改善作用。结论 麻荆宣肺颗粒可通过抑制冠状病毒复制、抑制炎症因子释放、调节免疫平衡等途径对人冠状病毒229E肺炎小鼠发挥治疗作用。

基于液质联用技术与网络药理学的生姜质量标志物研究

目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术和网络药理学对生姜的质量标志物(Q-Marker)进行预测分析。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术在正、负离子模式下对生姜中化学成分进行定性分析;运用网络药理学分析生姜传统功效的现代药理作用机制从而初步探索生姜的Q-Marker,并利用分子对接技术验证活性成分与靶点蛋白的结合活性。结果:通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术共分析得到生姜中48种化学成分,筛选后得到活性成分33个,以这33个活性成分为Q-Marker候选成分做网络药理学分析,获得靶点基因508个,作用于157条信号通路,如磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、大鼠肉瘤蛋白(Ras)信号通路等。该实验初步探究了8-姜酮(8-gingerone)、6-姜烯酚(6-shogaol)、8-姜酚(8-gingerol)、四氢姜黄素(Tetrahydrocurcumin)、1-脱氢-8-姜二酮(1-dehydro-8-gingerdione)和(E)-4-(3,7-dimethylocta-2,6-dien-1-yl)-2-methoxy phenol等6个化合物发挥药效的作用机制并预测为生姜的Q-Marker。结论:本研究初步预测了生姜传统功效的Q-Marker。

基于证候表征生物学的中药复方功效物质基础研究思路与方法

中医临床治疗疾病多以辨证论治,其用药方式多以复方为主,中药复方又多以功效来表述。因此,中药复方的功效既包括了对疾病的治疗,也涵盖了对证候的作用。目前对中药复方功效的研究多围绕治疗疾病的药理作用及发挥作用的药效成分开展研究,而对证候的作用及发挥作用的物质基础研究不足,从而严重影响了中药复方功效的深入研究和科学阐释。其原因主要是由于证候表征的生物学基础缺乏研究,影响了中药复方功效的物质基础研究。基于此,本文首次提出基于“证候表征生物学”的中药复方功效物质基础的研究思路和方法:以中医临床为依据、以病证结合为基础、以功效为导向,在尽可能全面明确中药复方功效的证候表征生物学基础后,整合网络药理学、中药化学、中药药代动力学、生物信息学等多种现代科学技术和方法,解析、确证发挥功效的化学成分及作用机理。该研究思路突出了中医临床应用复方治疗疾病的病证结合、方证相应的用药特点,期望为中医证候及中药复方功效物质基础的研究提供参考。

基于血管新生途径探讨银杏蜜环口服溶液对光化学诱导血栓形成致小鼠脑梗死模型皮质损伤的影响

目的 观察银杏蜜环口服溶液(Yinxing Mihuan oral solution,YM)对光化学诱导血栓形成致小鼠脑梗死(photothrombotic stroke,PTs)模型大脑皮质缺血性损伤的影响,同时探讨其在缺血后血管新生方面的作用机制。方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组,模型组,金纳多组(12.5 mg/kg),YM低、高剂量组(412 mg/kg,824 mg/kg),每组10只。采用光化学诱导血栓形成法建立小鼠脑梗死模型,术后连续灌胃给药14 d。观察各组动物体质量、神经功能缺损评分变化;激光散斑成像观察各组动物脑血流灌注量;免疫组化法检测皮质缺血灶周围区脑组织CD31、血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测小鼠缺血灶周围区脑组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α及血管生长素(angiogenin,ANG)m RNA表达。结果 PTs模型成功建立。与模型组比较,YM高剂量组小鼠神经功能缺损评分明显下降(P<0.05),脑血流变化率明显减少(灌注量明显升高,P<0.05),VEGF、HIF-1α及ANG m RNA表达明显上调(P<0.05);低剂量组CD31蛋白表达、高剂量组v WF蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论 YM可改善PTs模型小鼠神经功能缺损,其作用机制可能与促进缺血后的微血管新生,从而增加皮质缺血区域脑血流灌注相关。

中药及其复方治疗病毒性肺炎研究进展

病毒性肺炎是由呼吸道病毒感染鼻腔、咽喉后向下发展引起的肺部炎症。2019年暴发的新型冠状病毒感染(COVID-19)严重威胁人类的生命健康,中医药在治疗COVID-19感染者中发挥着重要作用,且预后良好。对于病毒性肺炎,西医多采用对症治疗如抗病毒、抗细菌及真菌治疗,而中医药治疗病毒性肺炎并不仅仅针对病毒本身,而是通过对机体的整体调节,如增强机体免疫应答等来达到治疗作用。通过检索国内外文献中关于中药及其复方对病毒性肺炎的治疗作用及机制,发现栀子、板蓝根和金银花等单味中药治疗病毒性肺炎效果良好,中药复方如清肺口服液、犀角地黄汤合银翘散、蒿芩清胆汤、麻杏石甘汤、清燥救肺汤等在临床上应用广泛且效果显著,中药复方共包含152味中药,以入肺经的药物频次最多,其中甘草、黄芩、苦杏仁、金银花和麻黄使用最多;作用机制主要与抗炎、抗病毒和免疫调节有关,本研究为今后中药及其复方治疗病毒性肺炎的作用机制研究及其临床应用提供参考。

医学研究中动物实验样本量的确定方法

在开始人体临床药物试验之前,研究人员需要在动物实验中进行广泛的临床前研究,以初步明确药物的作用、毒性和药代动力学特征。在实验研究中,除了与研究设计有关的一般考虑因素外,动物样本量计算也是核心要素。目前研究人员在动物样本量的选择方面具有很大的随意性,不仅导致实验结果的可复制性和代表性降低,而且造成了大量资金的浪费。因此,本文将医学实验研究分为探索性研究和验证性研究,并且探讨了基于文献与经验的样本量确定法、精度分析确定法、两样本均数确定法、资源方程式确定法和KISS确定法,旨在为实验中样本量的选择提供计算方案,进而降低对动物伤害与提高实验的准确性。随着医学统计学与医学实验结合的发展和传播,动物实验样本量确定方面的研究将愈加完善,将为研究过程的严谨性及研究结论的可靠性提供坚定的理论基础和实验依据。

中药地黄的现代研究进展及其质量标志物(Q-marker)预测分析

地黄为我国传统大宗药材,首载于《神农本草经》,列为上品,是滋补类代表中药,其化学成分主要包括环烯醚萜、苯乙醇、糖、核苷、紫罗兰酮等类化合物。现代药理学研究表明地黄对神经、心脑血管、血液、内分泌等系统具有显著的疗效。在对地黄化学成分及其炮制变化、药理作用及质量控制研究近况进行总结的基础上,从质量传递与溯源性、成分与药效关联性、复方配伍环境、化学成分有效性及可测性等方面对地黄质量标志物进行预测分析,为地黄质量标准研究提供科学依据。

羟基红花黄色素A对缺氧缺糖/复氧复糖损伤的大鼠H9C2心肌细胞氧化应激和细胞凋亡的影响

目的探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对大鼠H9C2心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖损伤(oxygen-glucose deprivation/reperfusion injury,OGD/R)后氧化应激及细胞凋亡的影响,并探索其可能的作用通路。方法大鼠H9C2心肌细胞稳定传代培养至第三代后,随机分为空白组,缺氧/复氧模型组,给药组分为HSYA低、高剂量组(HSYA40、HSYA80,40、80μmol/L),每组设10个复孔。各组细胞在经药物干预6 h后,采用CCK-8法检测细胞活性;生化仪检测培养基中天门冬氨酸转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;测定细胞中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量;采用流式细胞仪检测细胞凋亡状况并计算凋亡率;通过蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)并计算Bcl-2/Bax表达,同时检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达并进行半定量分析。结果与正常组相比,缺氧缺糖/复氧复糖组细胞活性明显低于正常组,培养基中AST、CK、LDH活性明显升高,SOD,CAT活性明显降低,MDA含量升高,细胞凋亡率显著升高,细胞中Bcl2和Bax mRNA表达明显升高,Bcl2/Bax表达显著降低,Caspase-3蛋白表达水平显著升高。与OGD/R组相比,羟基红花色素A给药组细胞活性明显升高;培养基中AST、CK和LDH活性明显降低,SOD、CAT活性明显升高,MDA含量降低;细胞凋亡率显著降低;细胞中抑凋亡相关基因Bcl-2表达上调,而凋亡相关基因Bax表达明显下调,Bcl2/Bax表达显著升高,Caspase-3蛋白表达水平显著降低。结论羟基红花色素A能够通过抑制H9C2心肌细胞的氧化应激损伤和凋亡从而对缺氧缺糖/复氧复糖损伤的H9C2心肌细胞起到一定保护作用;其作用机制可能与其改善抗氧化酶活性,上调抑制凋亡基因Bcl-2表达、下调促凋亡基因Bax表达,提高Bcl-2/Bax表达,以及抑制促凋亡蛋白Caspase-3表达有关。

基于GC-MS和网络药理学预测生姜炮制前后挥发性成分中的质量标志物

目的:基于气相色谱-质谱法(GC-MS)和网络药理学分析预测生姜炮制前后挥发性成分的质量标志物(Q-marker)。方法:基于GC-MS鉴定生姜和干姜的挥发油中化学成分,应用SIMCA软件进行主成分分析与正交偏最小二乘法-判别分析,并在此基础上探究3个不同产地的生姜炮制前后挥发性成分的差异,通过网络药理学分析差异成分作用靶点及通路,探讨生姜、干姜产生功效差异的作用机制。基于Q-marker筛选原则和网络药理学研究结果预测生姜、干姜挥发油的Q-marker。结果:通过GC-MS从生姜挥发油中鉴定出44个化合物,从干姜挥发油中鉴定出43个化合物,以差异成分作为Q-marker候选成分进行网络药理学分析,发现生姜挥发油中化学成分作用于核心靶点过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARG)、雌激素受体1(ESR1)、缺氧诱导因子-1α(HIF1A)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)等,通过过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)信号通路、酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)信号通路和钙信号通路等发挥作用;干姜挥发油中化学成分作用于核心靶点单胺氧化酶B(MAOB)、MAOA、ESR1等,通过环磷酸腺苷(cAMP)信号通路和Hedgehog信号通路等发挥作用。预测柠檬醛(citral)、α-松油醇(α-terpineol)、杉木醇(tau-muurolol)、依兰烯醇(ylangenol)为生姜挥发油Q-marker,香叶醛(geranial)、玫瑰呋喃(rosefuran)、白菖醇(shyobunol)为干姜挥发油Q-marker。结论:通过多元统计分析及网络药理学技术初步明确生姜炮制前后的挥发性成分及分子机制的差异,预测的Q-marker为生姜和干姜的挥发油质量标准建立及质量评价提供参考。

清开灵对白细胞-血管内皮细胞粘附的影响

目的:研究清开灵对白细胞与血管内皮细胞粘附的作用。方法:以TNF处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为实验模型,用不同浓度的清开灵作用HUVEC 2、12h后,用虎红染色法检测人外用血中性粒细胞(PMN)、淋巴细胞与HUVEC粘附的情况;并用Cell-ELISA检测HUVEC表面粘附分子E-selectin的表达。结果:TNF作用HUVEC 2、12h后,能明显增强PMN、淋巴细胞与HUVEC的粘附,不同浓度的清开灵能降低PMN、淋巴细胞与HUVEC的粘附;TNF作用HUVEC 2h后,能促进HUVEC表面E-selectin的表达,清开灵能抑制E-selectin的表达,TNF作用HUVEC 12h后,不能促进HUVEC表面E-selectin的表达,不同浓度的清开灵对E-selectin的表达没有作用。结论:清开灵能降低白细胞与HUVEC的粘附,抑制E-selectin的表达是其抗白细胞粘附的分子机制之一。

前列舒通胶囊对雌二醇诱导的慢性非细菌性前列腺炎大鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的研究前列舒通胶囊对雌二醇诱导的慢性非细菌性前列腺炎大鼠T细胞亚群的影响,探讨前列舒通胶囊治疗慢性非细菌性前列腺炎的作用机理。方法采用注射雌激素与双氢睾酮的方法复制慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型,将动物分为正常对照组、模型对照组、前列舒通胶囊大(0.6g/kg)、中(0.3g/kg)、小剂量(0.15g/kg)组与左氧氟沙星组(36mg/kg),连续给药4周,采用流式细胞仪检测大鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的变化,采用ELISA的方法检测外周血IFN-γ与IL-4的含量,分别代表Th1与Th2细胞。结果模型对照组的CD3+、CD8+T淋巴细胞、Th1/Th2明显降低(P<0.01),CD4+/CD8+、Th2细胞明显升高(P<0.01);前列舒通胶囊能明显升高CD3+、CD8+T淋巴细胞、Th1/Th2(P<0.05),降低CD4+/CD8+、Th2细胞(P<0.05)。结论前列舒通胶囊能显著调节慢性非细菌性前列腺炎大鼠T淋巴细胞亚群的紊乱。

平膜片式压力传感器有限元分析

本文用有限元方法分析平膜片式压力传感器弹性元件表面径向应变及切向应变与薄膜应变片阻值变化的联系后 ,根据电桥原理得到与其输出电压之间的关系 ,最终并分析了传感器之非线性精度 .

前列舒通胶囊对大鼠膀胱收缩功能的影响

目的研究前列舒通胶囊对大鼠膀胱收缩功能的影响及机制。方法将正常大鼠分为正常对照组、前列舒通胶囊大(0.6 g/kg)、中(0.3 g/kg)、小剂量(0.15 g/kg)组与盐酸特拉唑嗪(0.2 mg/kg)组,给药1次,应用生理记录系统检测大鼠排尿时膀胱的压力与容量。将大鼠离体膀胱肌条置于灌流肌槽中,累积增加前列舒通胶囊和阻断剂阿托品(M受体阻断剂)与特拉唑嗪(α1受体阻断剂),应用生理记录系统检测离体膀胱逼尿肌条收缩的张力与振幅。结果前列舒通胶囊能明显增加大鼠排尿时膀胱最大容量(P<0.01,P<0.05),对膀胱压没有明显作用(P>0.05)。体外能剂量依赖性增加大鼠离体膀胱逼尿肌条的张力与振幅,在阿托品(M受体阻断剂)与特拉唑嗪(α1受体阻断剂)存在时,也能剂量依赖性增加大鼠离体膀胱逼尿肌条的张力与振幅。结论前列舒通胶囊体内具有抑制膀胱排尿的作用,体外能激活膀胱肌M受体与α1受体,增加膀胱肌的收缩作用。

清解宁对小鼠免疫功能的影响

目的 :研究清解宁对小鼠免疫功能的影响。方法 :用绵羊红细胞 (SRBC)免疫小鼠 ,分别用小鼠脚掌厚度测量法观察迟发性超敏反应 (DTH)、溶血分光光度法观察体外抗体形成细胞数 (PFC)、微量血凝法观察溶血素、MTT法观察脾T、B淋巴细胞的增殖功能 ,腹腔MΦ吞噬中性红比色法观察腹腔MΦ吞噬中性红的能力。结果 :清解宁能明显抑制SRBC免疫小鼠的DTH、PFC、溶血素、脾T、B淋巴细胞的增殖以及腹腔MΦ吞噬中性红的能力。结论 :清解宁对SRBC免疫小鼠的免疫功能具有明显的抑制作用。

肉桂对滋肾丸抗实验性大鼠前列腺增生作用的影响

目的:研究肉桂对滋肾丸抗实验性大鼠前列腺增生作用的影响,探讨肉桂的引经作用。方法:采用丙酸睾酮所致大鼠前列腺增生模型,比较滋肾丸与知柏(滋肾丸去肉桂)对动物前列腺湿重、前列腺指数、血清和前列腺、睾丸组织中睾酮、雌二醇等性激素含量,以及前列腺组织病理学的影响。结果:肉桂能明显增加腺体面积,降低腺体腔面积,降低血清、前列腺组织睾酮、双氢睾酮的含量,升高血清和前列腺组织雌二醇/睾酮比值;但对前列腺湿重、前列腺指数没有影响。结论:肉桂能增强滋肾丸的抗前列腺增生作用,对性激素的作用是其增效的分子机制,初步表明肉桂具有引经的作用。

中药注射剂上市后作用机制研究的思路与方法

中药注射剂的安全性、有效性和质量可控性的再评价,不仅是国家政策的需要,也是中药注射剂本身发展的需要。中药注射剂作用机制的研究是中药注射剂有效性再评价的主要内容,目前大多数中药注射剂的作用机制研究比较少,多停留在药效学评价阶段。为此,本文针对中药注射剂作用机制研究中存在的问题,结合中药注射剂的特点,提出了以网络药理学、系统生物学为核心的中药注射剂作用机制研究思路与方法,以期为中药注射剂的再评价与发展提供参考。

一种高精度六面体广义协调元

在八节点六面体等参单元的基础上在其各个面的法向方向上增加一个自由度 ,同时为了提高精度 ,改善其性能 ,消除几何敏感性 ,又引入七个非协调的内部位移函数和一个泡状函数作为附加位移。数值计算表明该单元的性能良好。

低阶高精度单元的发展

综述了四节点等参单元存在的问题，以及提高其精度的途径，并对这些方法略做评述，且探讨了发展高精度单元的方法。

肉桂对滋肾丸盐酸小檗碱在正常大鼠前列腺分布动力学的影响

目的研究肉桂对滋肾丸中盐酸小檗碱在正常大鼠前列腺分布动力学的影响。方法将sD大鼠分为滋肾丸组（31．5s／kg）与知柏组（30．0g/kg）2组，每组25只，灌胃水煎液一次，药后1、3、4、6、14h，腹主动脉取血，摘取前列腺。采用C-18固相萃取柱处理样品，用HPLC法测定血浆和前列腺组织中盐酸小檗碱的含量。色谱条件：流动相乙腈-0．01mol磷酸二氢钾（内含0．2％SDS）（43：57）；流速0．8mL／min；检测波长345nna。结臬盐酸小檗碱在血浆中的线性范围为0．6—20ng/mL，最低检测限为0．3ng／ml，日内及日间RSD分别为5．77％与14．24％，平均回收率为98．87％；盐酸小檗碱在前列腺组织中的线性范围为1．25，100ng／mL，最低检测限为0．625n-ml，日内与日间RSD分别为8．7％与10．68％，平均回收率为97．21％。滋肾丸和知柏中盐酸小檗碱在前列腺中的分布系数分别为3,45与2．47；与知柏组比，盐酸小檗碱在前列腺中的相对摄取率为1．08，峰浓度比为2．10；滋肾丸组血浆盐酸小檗碱的c-明显降低（P（0．05），前列腺盐酸小檗碱的c。明显升高（P〈0．05）。结论盐酸小檗碱在前列腺的渗透性较强，肉桂增强盐酸小檗碱在前列腺的渗透性可能是其引经作用的机制之一。