皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)肌肉酶解产物制备及其免疫活性研究

为开发鲍鱼生物制品,对鲍鱼肌肉酶解产物的制备以及免疫活性进行研究。以皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)肌肉为原料,采用动物蛋白酶和风味蛋白酶进行酶解,同时以蛋白回收率和水解度为指标优化酶解工艺条件,获得鲍鱼酶解多肽(abalone enzymatic hydrolysis of peptides,AHP),进一步采用斑马鱼动物实验模型,对AHP免疫活性进行初步评价分析。结果表明,酶解4 h时,AHP的蛋白回收率和水解度最佳,分别为(55.88±0.03)%和(20.32±0.01)%。体内免疫活性实验结果显示:各样品均能够提高斑马鱼模型的溶菌酶(lysozyme,LYS)活性、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、免疫球蛋白G(immunoglobulinG,IgG)含量,其中,喂养冷冻干燥样品组中LYS活性最高达到(166.04±23.48)U/L、ALP活性最高达到(7.46±1.02)IU/L、IgG含量最高达到(0.31±0.09)μg/mL,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.05);在超滤组分中,与>10 kDa和5 k^10 kDa样品组相比,<5 kDa超滤样品组的活性明显较高(P<0.05),LYS活性最高为(1481.29±160.70)U/L、ALP活性最高为(1617.39±206.70)IU/L、IgG含量最高为(30.74±1.73)μg/mL。结果显示,鲍鱼酶解多肽具有一定的免疫活性,并且<5 kDa超滤组分免疫活性较强。

鲍鱼肌肉蛋白对Lewis肺癌化疗小鼠短期营养支持作用研究

目的:探讨鲍鱼肌肉蛋白对化疗肿瘤小鼠营养状况的影响。方法:构建Lewis肺癌化疗小鼠模型,给予鲍鱼肌肉蛋白作为营养支持,以体质量、肿瘤体积、脏器指数(脾脏指数和胸腺指数)以及血清中蛋白因子水平【白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、血红蛋白(Hb)】为指标,对比饲喂蛋白前、后相关指标的变化。结果:小鼠皮下注射Lewis肺癌细胞7 d后有明显肿块;生存状况显示化疗质量浓度为0.02 mg/mL和0.04 mg/mL的小鼠无死亡率,考虑生存周期选用0.02 mg/mL为最适化疗药物浓度。在营养支持过程中中剂量组的肿瘤体积明显减小,抑瘤率达20.7%。与空白组(NT)对比,高剂量组可以提高化疗小鼠的脾脏指数和胸腺指数(P>0.05)。营养指标显示,与空白组(NT)对比,对化疗小鼠进行营养支持后,各组的ALB、PA水平均有明显升高,且低剂量组的PA水平显著升高(P<0.05),Hb水平明显降低(P<0.05)。结论:鲍鱼肌肉蛋白对化疗肿瘤小鼠营养状况具有一定的改善作用。

2种塔形马蹄螺肌肉营养成分分析与品质评价

为分析深圳大鹏湾和海南琼海塔形马蹄螺(Tectus pyramis)的营养成分与品质,采用国标法检测了2种塔形马蹄螺肌肉的基本营养成分、氨基酸组成、脂肪酸组成及部分矿物元素含量,氨基酸评价采用氨基酸评分、化学评分和必需氨基酸指数方法。结果显示,海南琼海捕捞的塔形马蹄螺肌肉灰分含量显著高于深圳大鹏湾海域,其他基本营养成分无显著差异(P>0.05);深圳大鹏湾和海南琼海塔形马蹄螺肌肉总氨基酸含量分别为(18.45±0.13)和(18.83±0.03)g/100g,必需氨基酸含量均高于27%,支链氨基酸含量超过13%,鲜味氨基酸含量为55%。2种塔形马蹄螺肌肉多不饱和脂肪酸含量均>48%,其中,深圳大鹏湾塔形马蹄螺亚油酸、α-亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)含量显著高于海南琼海海域,且DHA+EPA含量高达11.79%。检测的3种矿物元素中,含量最高的均是常量元素钙(Ca),微量元素铁(Fe)次之,最低的是微量元素锌(Zn),且海南琼海塔形马蹄螺肌肉的Ca和Zn含量显著高于深圳大鹏湾海域。研究表明,2种塔形马蹄螺蛋白含量高,多不饱和脂肪酸含量丰富,肌肉营养价值高,具有很大的开发潜力,研究数据为进一步开发利用岛礁海域新型螺类食品提供参考。

乳液输送体系包埋海洋源脂溶性活性物质研究进展

海洋源脂溶性活性物质表现出许多潜在的有益生物学功能,如增强机体免疫力、缓解疲劳、抗氧化、改善生长发育等,然而其水溶性差、易降解、在胃肠道中损失率高等劣势降低了它们生物利用度。乳液输送体系可作为海洋源脂溶性活性物质递送载体,可以有效改善其物理化学不稳定性,提高生物利用度。文章介绍了运载海洋源脂溶性活性物质的乳液体系类型及制备方法,同时对几种主要海洋源脂溶性活性物质的乳液体系构建及特性研究现状进行综述;最后,针对目前研究中存在的问题,对未来海洋源脂溶性活性物质输送体系的研究方向提出了建议。

牡蛎低分子肽LOPs对短期免疫抑制小鼠的免疫调节作用

目的:研究牡蛎低分子肽(LOPs)对短期免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法:120只雄性KM小鼠按照体质量随机分为空白组、环磷酰胺模型组、乳清蛋白对照组及LOPs低、中、高剂量组。实验开始1~3 d,空白组每天腹腔注射生理盐水10 mL/kg bw,其余组每天腹腔注射等体积环磷酰胺80 mg/kg bw,建立短期免疫抑制小鼠模型。第4天起,乳清蛋白组经口灌胃给予0.4 g/kg bw乳清蛋白,LOPs低、中、高剂量组分别经口灌胃给予0.2,0.4,0.8 g/kg bw的LOPs。空白对照组和模型组经口灌胃等体积蒸馏水。连续灌胃27 d后,测定小鼠体质量、免疫脏器质量及其组织形态、血清溶血素、细胞因子和免疫球蛋白。结果:与模型组相比,LOPs组有助于修复小鼠脾脏和胸腺组织形态学结构的损伤,增强血清溶血素水平,提高白细胞介素-2、γ-干扰素、免疫球蛋白质量浓度。结论:LOPs对环磷酰胺短期免疫抑制小鼠具有一定的免疫调节作用,具有作为特殊医学用途配方食品基料的潜在应用价值。

基于牡蛎肽构建油包水型乳液体系及其稳定性研究

为了拓宽牡蛎肽粉在食品领域的应用范围,对牡蛎肽基料的粉体学性质进行测定,进一步以牡蛎肽溶液为水相,大豆油为油相,聚甘油蓖麻醇酸酯为乳化剂,用剪切法制备油包水型乳液。采用电子鼻分析技术,流变仪和低场核磁成像技术对乳液的理化性质进行表征,探究乳液在对抗不同温度、离心力、热处理、反复冻融等环境条件下的稳定性。结果显示,牡蛎肽基料的休止角为(22.29±0.49)°,滑动角为(29.19±0.46)°,堆积密度为(0.4697±0.0076)g/mL,振实密度为(0.5857±0.0069)g/mL,平衡吸湿率为37.89%。牡蛎肽基料具有较好流动性,吸湿能力较强。流变测定结果表明,构建的乳液为假塑性流体,核磁成像的伪彩色图像表明乳液油水相分布均匀。电子鼻测定结果表明,牡蛎肽的腥味物质主要来源于无机硫化物,构建的乳液体系对牡蛎肽溶液的腥味具有明显掩蔽效果。乳液在不同环境条件下均表现出较好的稳定性。

马氏珠母贝黏液糖蛋白组成及其体外抗癌活性研究

采用透析、醇沉法提取马氏珠母贝(Pinctada martensii)黏液中的糖蛋白,经Sephadex G-150分离纯化后得糖蛋白纯化品,对糖蛋白纯化品MP-FI、MP-FII进行分子量分布、氨基酸组成及傅里叶红外光谱(FTIR)分析,进一步采用体外细胞试验初步评估MP-FI和MP-FII的体外抗癌生物活性。结果表明,MP-FI和MP-FII均含有与抗癌功能活性相关的赖氨酸和精氨酸且含量较高,MP-FI中赖氨酸和精氨酸的含量占水解氨基酸总量的8.81%和5.80%。MP-FI的分子量集中在6.7~39.0 kDa范围。MP-FI、MP-FII的FTIR特征吸收峰表明2种样品结构组成存在差异,MP-FI具有α螺旋的二级结构和β-型糖苷键的糖链结构。MP-FI、MP-FII均表现出一定的抗癌活性,当MP-FI作用质量浓度达6 mg/mL时,对HepG2的抑制率高达61.56%±0.99%,IC_(50)值为2.7 mg/mL,对LLC的抑制率达42.23%±3.27%,IC_(50)值为12.1 mg/mL,且MP-FI对HepG2、LLC的抑制作用明显高于MP-FII(p<0.05)。研究结果可为探索马氏珠母贝黏液中的生物活性物质提供理论基础数据。

κ-卡拉胶对马氏珠母贝肌肉水溶性蛋白稳定性的影响

【目的】探究Kappa-卡拉胶对马氏珠母贝肌肉水溶性蛋白稳定性的影响,为进一步开发利用马氏珠母贝肉以及改善水产肌肉蛋白加工特性提供数据参考。【方法】以马氏珠母贝肌肉水溶性蛋白(WSP)为研究对象,采用浊度法、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析不同pH值条件下,热处理前后kappa-卡拉胶对WSP稳定性的影响,同时利用凝胶过滤层析对WSP进行了初步的分离及分子质量分布分析。【结果】热处理前后,在酸性条件下(pH<4.0)添加了kappa-卡拉胶的胶体蛋白混合体系(K-WSP)透光率均下降;热处理前,pH4.0～5.0范围内,与WSP对照,K-WSP混合体系透光率上升,而pH> 5.0条件下,kappa-卡拉胶对WSP体系透光率无显著性影响;热处理后,pH 4.0～7.5范围内,与WSP对照,K-WSP混合体系透光率上升,而pH>8.0条件下,kappa-卡拉胶对WSP体系透光率无显著性影响。SDS-PAGE结果显示:热处理前,酸性pH条件下与未添加WSP相比较,K-WSP在35 ku附近条带较多。热处理后,WSP和K-WSP的大分子蛋白组分(200、116 ku)均基本发生了热变性。WSP分离纯化曲线显示出两个组分,分子质量分别分布于200～35 ku和35～14.4 ku。【结论】pH值4.0～5.0条件下,kappa-卡拉胶对WSP的热稳定性有一定促进作用。

马氏珠母贝黏液中天然牛磺酸分离纯化及其结构表征

以马氏珠母贝黏液为原料,等电点沉淀法脱除黏液中蛋白,经强酸性阳离子交换树脂、乙醇结晶获得牛磺酸晶体,同时采用高效液相色谱法测定其纯度,傅利叶红外光谱及扫描电镜对其结构进行表征。结果显示:提取的天然牛磺酸呈白色粉末状,提取率为0.68 mg/mL;提取的天然牛磺酸晶体红外光谱图与合成牛磺酸标准品基本一致;扫描电镜观察可见提取的天然牛磺酸晶体呈针状,外形棱角分明,表面粗糙,附着较多细小晶粒;高效液相色谱法测定提取的天然牛磺酸晶体纯度为85.2%。