超氧阴离子对培养的牛动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响

目的研究超氧阴离子对牛主动脉平滑肌细胞内钙及收缩性的影响。方法采用Ｆｕｒａ－２测定牛肺动脉平滑肌细胞内钙及采用胶原凝胶实验方法分析平滑肌细胞的收缩性。结果超氧阴离子作用于平滑肌细胞后使ＡＴＰ（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导的细胞内钙浓度的增加从（２０６± １０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１４７±１５） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。 ５ ｍｉｎ内细胞内钙浓度增加的积分（∫ △［Ｃａ２＋］ｉ·ｄｔ）从（１２．２± ０．５）μｍｏｌ· Ｌ－１·ｓ－１降至（９．８± ０．８）μｍｏｌ·Ｌ－１·ｓ－１。ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ在无钙溶液中诱导的细胞内钙浓度的增加不受超氧阴离子的影响，而在含钙的Ｋｒｅｂａ溶液中，超氧阴离子能使随后的钙释放激活的钙进入（△［Ｃａ２＋］ｉＣＲＡＣ）从（２７．３ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１降到（１３．５ ±１．０） ｎｍｏｌ·Ｌ－１。ＡＴＰ诱导的凝胶面积减少的百分比从２４％±５％降到 ７．４％ ±０．２％；在无钙 Ｋｒｅｂｓ溶液中，ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ诱导的凝胶面积减少的百分比从 ３．５％± ０．６％降到－０．５％±０．７％。结论超氧阴离子通过影响平滑肌细胞的内钙动员而降低它的收缩性。

吡咯野百合碱对培养的肺及主动脉内皮细胞形态,数量及一氧化氮产生的影响

吡咯野百合碱 (MCTP)注射是建立肺动脉高压病理模型的常用方法 ,但机理不清 .实验采用细胞培养方法和DAF 2荧光法观察了MCTP对培养的牛肺动脉内皮细胞 (CPAE)形态 ,数量及NO产生的影响 ,以探讨MCTP导致肺动脉高压的机理 .结果表明 :MCTP(1μmol·L- 1)使培养的CPAE表面积增大〔从 (4 6± 4 ) μm2 增加到 (2 2 3± 2 7) μm2 〕 ;细胞数量减少〔从 (175± 9)× 10 6 L- 1减少到 (4 9± 6 )× 10 6 L- 1〕 ;在CPAE和牛主动脉内皮细胞 ,MCTP还可抑制由ACh所致的NO生成〔分别从 (16 .1± 1.3) %减少到(1.5± 1.1) %和从 (14.2± 1.6 ) %减少到 (1.4±1.6 ) %〕 .提示MCTP可通过损伤CPAE ,减少NO的生成而导致肺动脉高压 .

吡咯野百合碱对培养的牛肺动脉内皮细胞NO、细胞内钙及胶原凝胶收缩的影响

目的 :通过吡咯野百合碱 (monocrotalinepyrrole ,MCTP)对牛肺动脉内皮细胞 (calfpulmonaryarteryendothelialcells,CPAE)NO、细胞内钙和胶原凝胶收缩的影响 ,探讨MCTP导致肺动脉高压的机理。方法 :采用fura 2测定细胞NO及细胞内钙的含量 ;采用胶原凝胶收缩实验分析CPAE的功能。结果 :MCTP减少ACh所致NO及细胞内钙增加的作用 ,分别从 (6 1± 1 3) %减少到 (1 5± 1 1) %和从 (70 2± 3 2 )nmol·L-1减少到 (2 6 8± 5 3)nmol·L-1。MCTP还可抑制ACh所致的胶原凝胶舒张 ,从 (10 1 3± 0 6 8) %减少到 (94 1± 0 77) %。结论 :MCTP可通过抑制CPAE的NO生成 ,影响肺动脉平滑肌的舒缩 。

Effects of superoxide anion on intracellular Ca^(2+) concentration in rabbit pulmonary arterial smooth muscle cells

目的：研究超氧阴离子对兔肺动脉平滑肌细胞内钙的影响．方法：采用Ｆｕｒａ２测定酶分离的兔肺动脉平滑肌细胞内钙．结果：ＡＴＰ３０μｍｏｌ·Ｌ－１诱导平滑肌细胞内钙瞬时性增加．Ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ引起平滑肌细胞内钙缓慢的增加．超氧阴离子作用于平滑肌细胞后，使ＡＴＰ诱导细胞内钙增加的持续相升高，在ＡＴＰ作用后５和１０ｍｉｎ的比值（Δｒａｔｉｏ５ｍｉｎ和Δｒａｔｉｏ１０ｍｉｎ）分别由００９１±００２２和００２１±００２０升高至０１４９±００４８和０１１７±００４７．但超氧阴离子对ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ诱导的细胞内钙变化没有明显的影响．结论：超氧阴离子延迟ＡＴＰ诱导的平滑肌细胞内钙瞬时性增加，而不影响钙的泄漏途径．