腺病毒36感染对人脂肪源性间充质干细胞PPARγ和adiponectin基因表达的影响

目的探讨腺病毒36感染对人脂肪源性间充质干细胞过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptor,PPARγ）和脂联素（adiponectin）基因表达的影响。方法无菌条件下获取人皮下脂肪组织、I型胶原酶消化并收集人脂肪源性间充质干细胞（human adipose-derived mesenchymal stem cell,h AMSC）,细胞传至第3代（P3代）对h AMSC进行定向成脂诱导,并进行油红O染色;流式细胞仪检测h AMSC表面免疫表型;人类腺病毒36（adenouirus-36,Ad36）感染h AMSC,采用荧光实时定量PCR（Real time-PCR）方法检测Ad36感染的h AMSC PPARγ和adiponectin基因表达的变化规律。结果 （1）h AMSC在体外呈梭形生长,且能稳定传代;（2）细胞在加入成脂诱导剂后可定向分化成脂肪细胞;（3）流式细胞术检测结果显示h AMSC免疫表型：CD105（93.0±1.3）%,CD44（99.6±0.3）%,CD34（0.2±0.1）%,CD45（0.2±0.3）%,CD31（0.3±0.3）%,CD29（3.4±0.2）%;（4）Ad36感染h AMSC后细胞内脂滴逐渐增多、增大。PPARγ和adiponectin基因在Ad36感染h AMSC后的第1天开始表达,感染后第2～6天较0 MOI组显著升高（P〈0.05）,至感染后第8天10 MOI剂量组表达水平开始下降。结论 Ad36使h AMSC定向分化成脂肪细胞,并上调了PPARγ和adiponectin基因的表达。

骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性研究

目的探讨骆驼蓬多糖调节细胞自噬及巨噬细胞炎症反应的活性。方法用不同浓度的骆驼蓬多糖干预,诱导NRK细胞自噬,用激光共聚焦显微镜观察自噬体,筛选出骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳干预浓度和时间范围;利用RAW264.7细胞,以1μg/mL脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)建立体外细胞炎症模型;在骆驼蓬多糖诱导细胞自噬的最佳浓度和时间下进行干预,以CCK-8试验检测细胞活性,用Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用ELISA试剂盒检测炎症因子IL-1β和IL-6的分泌量。结果骆驼蓬多糖对NRK细胞诱导自噬的最佳时间为12 h,浓度范围为50～100μg/mL。骆驼蓬多糖干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型后,对细胞活力均无明显影响,诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,细胞培养液中IL-6和IL-1β分泌量降低,与模型组有显著差异(P(27)0.05)。结论骆驼蓬多糖能抑制LPS刺激诱导的炎症因子的释放,诱导细胞自噬和凋亡,在50～100μg/mL范围内对巨噬细胞RAW264.7具有良好的免疫调节作用。

浅论传统维吾尔医辅助治疗肺结核的原则和方法

肺结核是由结核杆菌引起的一种危害人类健康的传染病, 主要致病因素是腐蚀性乃孜莱液（O-FUNATLIK NAZLA）,患者感染了结核杆菌后,浸润腐蚀性乃孜莱液、血液或淋巴液,并通过循环系统到达肺部,进而在肺组织形成创伤. 本文就肺结核浅论维吾尔医辅助治疗方法及原则.

腺病毒36型对PPARγ和CIDEC在脂肪细胞分化过程的调节作用

为探讨腺病毒36型在人脂肪细胞分化过程中对PPARγ及CIDEC基因表达的调节作用,利用腺病毒感染人脂肪源性间充质干细胞(h AMSC)、油红O染色和RT-q PCR鉴定Ad36诱导h AMSC分化为脂肪细胞模型;葡萄糖氧化酶法和甘油三酯终点法测定人类腺病毒36型(Ad36)诱导h AMSC分化为脂肪细胞的过程中培养基葡萄糖浓度及细胞甘油三酯含量;RT-q PCR、Western Blotting方法检测Ad36诱导的人脂肪细胞中,PPARγ和CIDEC蛋白表达水平的变化;用PPARγ特异性抑制剂GW9662抑制PPARγ表达后,Western Blotting方法检测Ad36诱导的人脂肪细胞中CIDEC蛋白质的表达。Ad36诱导的h AMSC定向分化成人脂肪细胞,分化过程中培养基葡萄糖含量较对照组显著降低(P<0.05),细胞内甘油三酯含量较对照组显著升高(P<0.05),PPARγ和CIDEC基因表达水平较对照组显著升高(P<0.05),在诱导第6天表达水平最高,在使用GW9662抑制PPARγ蛋白质表达后,CIDEC蛋白质表达水平较对照组显著降低(P<0.05)。从细胞水平证实,Ad36诱导人脂肪细胞分化过程中,Ad36通过PPARγ上调CIDEC基因的表达水平。