白细胞介素-33和Ⅱ型固有淋巴细胞在慢性阻塞性肺疾病发病中的作用机制

目的探讨白细胞介素-33(IL-33)、II型固有淋巴细胞(ILC2)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用机制。方法选择2017年11月至2018年5月新疆医科大学附属中医医院门诊及住院COPD患者50例为研究对象(COPD组),同期体检健康人群46例为健康对照组。抽取受试者5 mL肘静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMC),使用流式细胞术检测2组受试者PBMC中ILC2所占的比例;将2组受试者PBMC分别给予磷酸盐缓冲液(PBS)、IL-33刺激(加入50μg·L^-1 IL-33)、IL-33中和抗体阻断(IL-33中和抗体阻断剂预处理1 h后加入50μg·L^-1 IL-33)干预,体外培养48 h;酶联免疫吸附试验检测PBMC培养基上清液中IL-13和IL-5含量;实时荧光定量聚合酶链反应检测2组受试者PBMC中前列腺素D2受体/表达在Th2细胞上的趋化因子受体同源分子(CRTH2)、GATA结合因子3(GATA3)、IL-33受体生长刺激表达基因2蛋白(ST2)mRNA相对表达水平。结果COPD组患者PBMC中ILC2的比例为(3.64±1.84)%,健康对照组受试者PBMC中ILC2的比例为(0.69±0.28)%。COPD组患者PBMC中ILC2的比例高于健康对照组(P<0.001)。IL-33刺激后,2组受试者PBMC培养基上清液中IL-5、IL-13水平高于PBS干预后(P<0.01);IL-33中和抗体阻断后,2组受试者PBMC培养基上清液中IL-5、IL-13水平低于IL-33刺激后(P<0.01)。经PBS干预、IL-33刺激、IL-33中和抗体阻断后,COPD组患者PBMC培养基上清液中IL-5、IL-13水平均高于健康对照组(P<0.01)。经IL-33刺激后,COPD组患者PBMC中GATA3、CRTH2、ST2 mRNA相对表达量高于健康对照组(P<0.001);加入IL-33中和抗体阻断后,COPD组患者PBMC中GATA3、CRTH2、ST2 mRNA相对表达量显著低于经IL-33刺激后(P<0.001)。结论COPD患者外周血PBMC中ILC2比例升高,IL-33可促进ILC2增殖并分泌Th2型细胞因子,从而参与COPD免疫反应。

支气管哮喘患者外周血TH1、TH2、TH17及Treg细胞相关细胞因子的表达及意义

目的研究支气管哮喘患者T_H1、T_H2、T_H17及Treg细胞相关炎性因子的变化规律。方法采用多重蛋白定量技术(CBA法)检测支气管哮喘患者及健康对照人群血清中T_H1、T_H2、T_H17及Treg细胞相关细胞因子的蛋白质表达。结果在支气管哮喘患者血清中转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-17A的表达水平明显高于健康对照人群,且差异有统计学意义(P<0.05)。在支气管哮喘患者与健康人群血清中IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论支气管哮喘患者外周血中TGF-β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A的表达水平明显升高,推测存在TH1、TH2、TH17及Treg细胞的比列失衡。

神香草挥发油对急性炎症的作用

目的探讨神香草挥发油(HEO)对急性炎症的抑制作用及其作用机制。方法昆明种小鼠40只,建立急性炎症疾病动物模型,随机分成模型对照组(0.9%氯化钠溶液)、阿司匹林组(200mg·kg^-1)和HEO大剂量组(0.4mL·kg^-1)、小剂量组(0.2mL·kg^-1),每组10只。采用二甲苯致炎法观察小鼠耳肿胀度和肿胀抑制率,Griess法检测小鼠血清一氧化氮(NO)含量、硫代巴比妥酸(TBA)法检测小鼠血清丙二醛(MDA)含量,紫外分光光度法检测前列腺素E2(PGE2)含量。结果在耳肿胀炎症模型中,致炎后各组小鼠右耳立刻出现明显红肿现象,阿司匹林组、HEO大剂量组与小剂量组都有很明显的抗炎作用,HEO大剂量组平均肿胀抑制率为57.96%;HEO在实验浓度范围内可明显降低二甲苯致小鼠的耳廓肿胀度(P<0.01);与模型对照组比较,阿司匹林组、HEO组的MDA含量明显降低(P<0.01),PGE2含量明显降低(P<0.05);HEO大剂量组NO含量明显降低(P<0.0.5)。结论HEO对二甲苯所致急性炎症具有一定的抑制作用,其作用机制可能与降低MDA、PGE2和NO含量有关。

慢性阻塞性肺疾病患者外周血中Th17／Treg和内皮微粒关系的研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者外周血中辅助性T细胞17（Th17）、调节性T细胞（Treg）、内皮微粒（EMPs）的变化并分析其相互作用对疾病进程的影响。方法抽取COPD患者外周血,其中慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患者59例,COPD稳定期56例,健康对照46例。按要求对外周血全血和贫血小板的血浆用相应抗体进行标记,使用流式细胞技术检测Th17、Treg和血管-钙依赖黏连蛋白（VE-cadherin）、血小板-内皮细胞黏附分子（PECAM）、黑素瘤细胞黏附分子（MCAM）、E选择素（E-selectin）的数目。结果与健康组比较,AECOPD患者血浆中VE-cadherin含量升高（P〈0.05）,与稳定期患者比较,虽有升高的趋势,但差异无统计学意义;与健康组和稳定期患者比较,AECOPD患者PECAM、MCAM、E-selectinEMPs显著升高（P〈0.01）;与健康对照组比较,AECOPD患者、COPD稳定期患者Th17型细胞增加明显,Treg细胞减少,Th17/Treg比例失衡;健康对照组、AECOPD组中EMPs与Th17、Treg存在低相关,COPD稳定期组中Th17、Th17/Treg与VE-cadherin呈负相关（r=-0.5343、-0.6091,P〈0.05）。结论COPD发展过程中产生大量EMPs,存在Th17/Treg免疫失衡,两者可能共同作用进一步加重炎症反应和细胞凋亡。

Ⅱ型固有淋巴细胞在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展

Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2s)是固有淋巴细胞家族中新发现的成员之一。ILC2s在转录因子维甲酸相关孤核受体α和GATA结合因3调控下由骨样淋巴祖细胞发育而来,主要分布于皮肤、肺脏、肠道等黏膜组织。ILC2s可被IL-25、IL-33和胸腺基质淋巴细胞生成素刺激产生IL-5和IL-13等Th2型细胞因子,在抗寄生虫感染、病毒感染、组织修复和呼吸道炎症中发挥重要的功能。本文综述ILC2s的生物学特征和功能,并特别关注了ILC2s在慢性阻塞性肺疾病中的作用。

香烟烟雾暴露及戒烟对小鼠肺部炎性反应与肺功能的影响

目的：探讨香烟烟雾暴露及戒烟小鼠肺部炎性反应与肺功能的影响。方法将84只小鼠随机分为正常组、熏烟2个月组、熏烟4个月组、熏烟6个月组，熏烟2个月戒烟2个月组、熏烟4个月戒烟2个月组、熏烟6个月戒烟2个月组，每组12只。酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测小鼠血清中 IL-4的含量，肺功能的测定用美国 Buxco 公司的无创肺功能仪。结果与正常组相比，熏烟4个月组、熏烟6个月组 IL-4表达增多，熏烟6个月戒烟2个月组 IL-4表达减少，与熏烟6个月相比，熏烟2个月戒烟2个月组、熏烟4个月戒烟2个月组、熏烟6个月戒烟2个月组 IL-4表达均减少；与正常组相比，熏烟2个月，熏烟4个月，熏烟6个月的 Penh 值明显升高（P 〈0.05），与正常组相比，熏烟2个月戒烟2个月，熏烟6个月戒烟2个月组的 Penh 值差异无统计学意义，仅熏烟4个月戒烟2个月组 Penh 较高（P 〈0.05）。结论烟雾暴露可影响肺炎性因子 IL-4的表达，降低肺功能，戒烟后上述作用有所恢复。

乌鲁木齐地区RT-PCR法检测儿童急性呼吸道病毒的临床研究

目的利用多重荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析急性下呼吸道感染患儿4种病毒:人腺病毒(HADV)、人博卡病毒(HBoV)、人偏肺病毒(HMPV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)的感染情况。方法收集1045例急性呼吸道感染的住院患儿鼻咽深部分泌物标本,采用多重荧光RT-PCR进行呼吸道病毒4项指标检测,就病毒分布情况、季节因素等方面进行临床流行病学特点分析。结果1045例患儿中有281例4种呼吸道病毒阳性,总阳性率为26.89%;其中单一病毒感染194例(69.04%)、混合病毒感染87例(30.96%),HMPV感染最多,为120例(42.70%)、其次为HRSV感染119例(42.35%);在各年龄组中≤3岁组阳性229例(36.06%),4~7岁组阳性114例(42.22%),≥8岁组阳性63例(45.00%)。从季节分布来看,春、夏、秋、冬四季的检出率分别为25.68%、28.24%、49.34%、65.57%。结论多重荧光RT-PCR法能快速检测乌鲁木齐地区儿童急性呼吸道病毒,呼吸道病毒感染主要为HMPV和HRSV感染;呼吸道病毒患儿感染率最高年龄段为≥8岁;以秋季和冬季为呼吸道病毒感染高发期。

基于生物信息学的m6A甲基化调控因子对慢性阻塞性肺疾病基因与免疫细胞浸润的分析

m6A RNA甲基化是mRNA最普遍的内部化学修饰,据报道m6A RNA甲基化调控因子通过调节JAK-STAT信号通路参与多种炎症疾病的发生,然而在慢性阻塞性肺疾病COPD中的作用从未被报道。方法:我们对91例正常肺组织和98例慢阻肺肺组织样本中18个m6A调控因子通过调节JAK-STAT信号通路参与免疫细胞浸润进行评价。结果:研究发现m6A调控因子可以很好地区分慢阻肺和对照样本,并且M1巨噬细胞,中性粒细胞等免疫细胞与m6A调控因子密切相关,而m6A调控因子又与JAK-STAT信号通路有很强的相关性。结论:m6A调控因子可能通过调节JAK-STAT通路从而影响免疫细胞浸润最终参与慢性阻塞性肺疾病的发生。