鞣花酸对牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的体外抑菌效果

目的观察鞣花酸对牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的生长、黏附的影响。方法将鞣花酸单体溶于二甲基亚砜(DMSO),用二倍梯度稀释法测定最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。0.5 g/L氯己定作为阳性对照组,无药液组为阴性对照组,采用紫外分光光度计测定细菌黏附能力及生长曲线;通过生物膜结晶紫染色法测定生物膜抑制浓度和生物膜清除浓度。结果石榴皮生物活性成分鞣花酸对牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌最低抑菌浓度均为1 g/L,最低杀菌浓度均为2 g/L。在1 g/L时鞣花酸对牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的细菌粘附能力的抑制率为80.68%和83.53%(P<0.05)。鞣花酸对牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的生长影响为将牙龈卟啉单胞菌对数生长期由8 h推迟至12 h,将具核梭杆菌的对数生长期由4 h推迟至12 h。鞣花酸对牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的生物膜抑制浓度及生物膜清除浓度均为4 g/L和8 g/L。结论鞣花酸对牙周主要致病菌牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌都有显著的抑制作用,有望成为一种牙周病防治的辅助治疗药物。

安石榴苷对牙周致病菌的体外抑菌活性作用

目的探讨不同浓度安石榴苷对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌在浮游状态和生物膜状态下的抑菌活性的作用。方法(1)配置浓度为1×10^(8)CFU/mL的牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌悬液,厌氧条件下分别用0.125、0.25、0.5、1、2、4、8 g/L的安石榴苷溶液处理48 h,测定安石榴苷最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)及最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。(2)将牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌悬液分别分为1/2 MIC组(1/2MIC浓度安石榴苷药液)、MIC组(MIC浓度安石榴苷药液)、2 MIC组(2 MIC浓度安石榴苷药液)、阳性对照组(复方氯己定含漱液)和阴性对照组(菌悬液),厌氧条件下培养0、4、8、12、24、48 h时,应用酶标仪测定600 nm波长处光密度(optical density,OD)值。(3)将牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌悬液分别分为MIC组、1/2 MIC组、1/4 MIC组、1/8 MIC组和阴性对照组,厌氧条件下培养48 h,应用紫外可见分光光度计测定600 nm波长处OD值,计算细菌黏附抑制率。(4)厌氧条件下将2种菌悬液与不同浓度安石榴苷溶液共培养制备生物膜,测定生物膜最低形成抑制浓度;厌氧条件下制备2种菌悬液生物膜,应用不同浓度安石榴苷溶液处理24 h,测定最低清除已形成生物膜浓度。结果(1)安石榴苷对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌的MIC均为2 g/L,MBC均为4 g/L。(2)安石榴苷处理4、8、12、24、48 h,1/2 MIC组、MIC组、2 MIC组、阳性对照组和阴性对照组牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌OD值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随安石榴苷浓度增加,作用时间延长,其对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌的抑制作用增强。(3)MIC组、1/2 MIC组、1/4 MIC组牙龈卟啉单胞菌(0.423±0.026、0.764±0.009、1.243±0.023)、具核梭杆菌(0.180±0.007、0.366±0.009、0.612±0.017)细菌黏附OD值均低于1/8 MIC组(1.533±0.015、0.768±0.008)和阴性对照组(1.578±0.058、0.796±0.014)(P<0.05),且依次增高(P<0.05),1/8 MIC组细菌黏附OD值与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(4)安石榴苷对牙龈卟啉单胞菌、具核梭杆菌的生物膜最低形成抑制浓度均为4 g/L,最低清除已形成生物膜浓度分别为16、8 g/L。结论安石榴苷是一种天然药物,对牙周主要致病菌的浮游及生物膜状态有一定的抑制作用。