核受体FXR调控内质网应激途径缓解小鼠溃疡性结肠炎病理损伤

目的 探究法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)激活对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型小鼠结肠组织病理损伤的影响及其作用机制。方法 将40只C57BL/6雄性健康小鼠随机分为对照组、模型组、奥贝胆酸(obeticholic acid,OCA)组、奥贝胆酸+衣霉素(OCA+TM)组,记录各组小鼠体质量、粪便性状与隐血程度、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、剥离结肠长度。ELISA法检测各组小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量,HE染色观察各组小鼠结肠组织病理形态变化,免疫组化染色检测各组小鼠结肠组织中GRP78和CCAAT/CHOP阳性表达情况,RT-qPCR和Western blotting检测各组小鼠结肠组织中GRP78和CHOP在mRNA与蛋白水平上的表达变化。结果 与对照组比较,模型组小鼠DAI升高,结肠长度缩短,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量均增加,结肠组织发生明显损伤,可见广泛炎性细胞浸润,结肠组织中GRP78和CHOP阳性染色增强,GRP78和CHOP的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均上调(P<0.05);与模型组比较,OCA组小鼠DAI降低,结肠长度增加,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量均减少,结肠组织损伤程度明显改善,未见炎性细胞浸润,结肠组织中GRP78和CHOP阳性染色减弱,且GRP78和CHOP的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05);而与OCA组比较,OCA+TM组小鼠DAI升高而结肠长度缩短,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量也均增加,结肠组织损伤,表现出明显的溃疡现象,同时,结肠组织中GRP78和CHOP阳性染色增强,GRP78和CHOP的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量也均上调(P<0.05)。结论 在UC小鼠模型中激活FXR能够有效缓解结肠组织病理损伤,该机制可能与调控内质网应激途径有关。

LncRNA CASC15通过miR-153-3p/Nrf2反馈环调控胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化

目的:探讨LncRNA CASC15通过miR-153-3p/Nrf2反馈环对SGC-7901细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法分析胃癌组织、癌旁正常组织、SGC-7901细胞、GES-1细胞中LncRNA CASC15、miR-153-3p和Nrf2的表达量。下调CASC15后,通过MTT、Transwell及Western blotting实验检测SGC-7901细胞的增殖、侵袭和EMT能力。用miRcode和双荧光素酶报告基因实验分析LncRNA CASC15的作用靶点、CASC15和miR-153-3p的相关性。检测下调miR-153-3p对SGC-7901细胞增殖、侵袭和EMT的影响以及上调LncRNA CASC15通过miR-153-3p对SGC-7901细胞增殖、侵袭和EMT的影响。TargetScan软件分析miR-153-3p的作用靶点,双荧光素酶报告基因实验检测miR-153-3p和Nrf2之间的关系。分析Nrf2 siRNA对SGC-7901细胞的增殖、侵袭和EMT的影响。结果:与癌旁正常组织相比,胃癌组织中LncRNA CASC15和Nrf2表达上调,miR-153-3p表达下调;与GES-1细胞相比,SGC-7901细胞中LncRNA CASC15和Nrf2表达上调,miR-153-3p表达下调。LncRNA CASC15 siRNA或Nrf2 siRNA抑制了细胞增殖、侵袭与EMT;LncRNA CASC15靶向miR-153-3p,miR-153-3p靶向Nrf2。miR-153-3p inhibitor促进SGC-7901细胞增殖、侵袭与EMT;上调LncRNA CASC15通过miR-153-3p促进Nrf2表达(均P<0.05)。结论:LncRNA CASC15在胃癌中表达上调且通过miR-153-3p/Nrf2轴促进SGC-7901细胞增殖、侵袭及其EMT。