中介素对大鼠肾小球内皮细胞缺氧损伤的保护作用

目的研究中介素(IMD)对大鼠肾小球内皮细胞(r RGEC)缺氧损伤的作用。方法 r RGEC传代培养后,随机分为正常组(N组),缺氧组(H组)及IMD组,根据培养液中IMD的终浓度将缺氧处理组分为10-8mol/L(IMD1)、10-7 mol/L(IMD2)、10-6 mol/L(IMD3)组。流式细胞仪分析细胞凋亡;检测内皮单层底顶室异硫氰酸荧光素(FITC)-BSA荧光强度,以底顶室荧光强度比值的变化来表示细胞通透性的变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中4-羟壬烯醛(4-HNE)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)变化;实时荧光定量PCR(RTPCR)检测细胞细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)m RNA的表达;免疫细胞化学法检测HIF-1α及VEGF蛋白表达并进行半定量分析。结果与N组相比,IMD1、IMD2、IMD3组细胞凋亡率均降低(P<0.05);H、IMD1、IMD2、IMD3组细胞通透性均增加(P<0.05),H组上清中4-HNE、ROS升高,SOD降低(P<0.05);IMD2组HIF-1αm RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05),VEGFm RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05);与H组相比,IMD1、IMD2、IMD3组细胞凋亡率均降低(P<0.05),细胞通透性降低(P<0.05),4-HNE、ROS降低,SOD升高(P<0.05),IMD2组HIF-1αm RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05),VEGF m RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05)。相关分析发现HIF-1αm RNA、VEGF m RNA相对表达量与细胞凋亡率呈较强负相关(r=-0.919、-0.911,P<0.05)。结论 IMD可减轻肾小球内皮细胞缺氧损伤,保护肾小球内皮细胞,与其上调VEGF与HIF-1α生成有关。

生物水处理工程中实时监测微生物电极的研究(Ⅱ)——微生物电极的反应机制

根据 Albery提出的判断酶电极动力学过程的理论 ,讨论了好氧微生物电极在不同底物作用下电极的速度控制步骤 ,求得电极的米氏常数 Km 与有效电化学反应速度常数 k′ M E的值。

生物水处理工程中实时监测微生物电极的研究(Ⅰ)——优势酶系的选择及好氧生物处理部分

将生物处理废水系统微生物活体固定化,构成一种介体电流型微生物电极,用以测定微生物的活性。提出了以微生物体内优势酶活性表征微生物活性的新构思,并以好氧生物膜为研究对象,分析验证了废水系统中微生物体内优势酶系的存在和种类以及其活性随外界条件变化的特性。通过废水处理系统中容积负荷去除率与微生物活性之间的关系,论证了所建立的微生物电极在生物水处理工程中应用的可行性。

中介素对缺氧肾小球内皮细胞管腔样结构形成的影响

目的研究中介素(IMD)对缺氧条件下大鼠肾小球内皮细胞(r RGECs)管腔样结构形成的影响和可能机制。方法在体外培养传代rRGECs后分为正常对照组、缺氧组、IMD组,后2组放置5%O2缺氧环境中培养6 h,对照组在正常氧浓度中培养,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞存活;小管形成实验检测管腔样结构形成;免疫细胞化学检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮钙黏着蛋白(VE-cadherin)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)检测VEGF、VE-cadherin mRNA表达水平。结果与正常对照组相比,缺氧组细胞增殖率,管腔样结构的管腔长度、成环数和分支数以及VE-cadherin mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),VEGF mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);与缺氧组相比,IMD组细胞存活率,管腔样结构的管腔长度、成环数和分支数以及VEGF、VE-cadherin mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论在缺氧条件下IMD可促进r RGECs增殖和管腔样结构形成,减轻r RGECs损伤,并可能与VEGF、VE-cadherin有关。