EP联合方案耐药小细胞肺癌细胞株的构建及机制探讨

目的构建依托泊苷(etoposide,VP-16)联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗方案(EP联合方案)耐药的小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株H446/EP,并进行耐药特性鉴定及机制探讨。方法以药物浓度递增法,使用VP-16联合DDP处理NCI-H446细胞构建H446/EP细胞株。以H446/EP与NCI-H446细胞为研究对象,MTT法检测细胞活力,计算H446/EP细胞耐药指数(resistance index,RI);细胞克隆实验、Incucyte细胞增殖(无标记)法检测细胞增殖能力;转录组学测序后,对2种细胞差异表达基因进行富集分析;Western blot检测细胞耐药、DNA损伤修复(repair of DNA damage,DDR)、自噬标志分子的蛋白表达量。结果MTT结果显示,H446/EP细胞对VP-16、DDP与DOX的RI分别为6.14、3.43与1.96;细胞克隆实验与Incucyte细胞增殖(无标记)法结果显示,H446/EP细胞增殖能力显著高于NCI-H446细胞(P<0.01);转录组学测序、通路富集分析显示差异表达基因在肿瘤化疗耐药、DDR、自噬相关通路富集;Western blot结果显示,相比NCI-H446细胞,H446/EP细胞MRP1、BCRP、RAD51、γ-H2AX及LC3-II/LC3-I蛋白表达量显著升高,p62蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论EP联合方案耐药的SCLC细胞株H446/EP构建成功,增殖能力增强;细胞外排转运蛋白表达量增加、DDR及自噬水平升高可能是SCLC对EP联合方案产生耐药的机制。

超声辅助合成安息香的研究

目的以超声辅助对苯甲醛进行安息香缩合,并探索不同条件对其产率的影响,以确定最佳反应条件,提高产率。方法以苯甲醛为原料,维生素B1为催化剂,在超声条件下进行安息香缩合反应,并设置了单因素试验和4因素3水平正交试验,考察超声时间、温度、功率及催化剂用量对产率的影响,得出最佳反应条件。结果由正交试验数据分析得该反应最佳反应条件为催化剂量1.47 g、时间75 min、温度60℃、功率210W,该条件下的产率为50.6%。结论对比传统加热回流方法,产率提高了18%,时间缩短了15 min,超声有效提高了苯甲醛合成安息香的产率,且操作简便,重现性好。