LY294002抑制肺癌细胞自噬、增殖、侵袭和迁徙的体外研究

目的探讨体外LY294002是否通过PI3K/AKT信号通路抑制肺癌细胞自噬、增殖、侵袭和迁徙。方法采用0、10、15、20、25、30μmol·L-1 LY294002(LY294002处理组)作用于人肺癌细胞A549,以PBS替代药物作为对照组。采用CCK8实验检测LY294002处理后A549细胞增殖情况;采用Western blot检测2组A549细胞Beclin-1、LC3B(Ⅱ、Ⅰ)、PI3K、p-AKT及AKT蛋白表达水平;采用Wound healing和Transwell invasion实验检测2组A549细胞迁徙、侵袭情况。结果 LY294002能有效抑制A549细胞的增殖,且在24h呈剂量依赖性,24h IC50为19.348μmol·L-1。LY294002处理组细胞中Beclin-1、PI3K、p-AKT蛋白表达水平及LC3B(Ⅱ/Ⅰ)比率、细胞迁徙和侵袭力均显著低于对照组(P<0.05)。结论 LY294002通过抑制PI3K/AKT信号通路降低人A549细胞的自噬活性、增殖、迁徙和侵袭。

下调HER2降低自噬活性抑制人肺癌细胞增殖转移作用的体外研究

目的探讨下调HER2表达是否抑制细胞自噬活性,从而影响人肺癌细胞的增殖、迁徙和侵袭。方法采用浓度5μmol/L自噬抑制剂3-MA、10μmol/L HER2抑制剂Neratinib分别作用人肺癌细胞A549。Western blot检测肺癌细胞A549中HER2、Beclin-1及LC3B(Ⅱ/Ⅰ)蛋白表达水平;Wound healing和Transwell invasion实验检测细胞迁徙、侵袭能力;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞的增殖能力。结果 Neratinib和自噬抑制剂(3-MA)作用24 h后,细胞HER2、Beclin-1及LC3B(Ⅱ/Ⅰ)蛋白表达水平显著低于阴性对照组;Neratinib、自噬抑制剂(3-MA)处理组的细胞增殖、迁徙和侵袭能力显著低于阴性对照细胞。结论下调HER2能降低人肺癌细胞A549的自噬活性并抑制其增殖、迁徙和侵袭。