吡格列酮联合骨髓间充质干细胞移植治疗改善大鼠心肌梗死后的心功能

背景:前期研究发现骨髓间充质干细胞移植能够改善心肌梗死大鼠的心功能,但整体效果并不太理想。目的:拟采用PPAR-γ激动剂吡格列酮联合骨髓间充质干细胞移植治疗以进一步改善心肌梗死大鼠的心功能并探讨相关机制。方法:开胸结扎20只SD大鼠左前降支冠状动脉并随机分为2组:骨髓间充质干细胞组和骨髓间充质干细胞+吡格列酮组。2周后在局部梗死心肌内注射PKH26标记的由PBS悬浮的骨髓间充质干细胞,联合治疗组在注射骨髓间充质干细胞后予以吡格列酮3 mg/(kg·d)连续灌胃2周。细胞移植后2周进行超声心动图检测,免疫荧光染色、Western blot、q RT-PCR检测左心室心肌组织不同区域PPAR-γ、TGF-β1/SMAD通路相关因子和Cx43的表达情况。结果与结论:两组大鼠基础心功能参数无明显差异性。细胞移植2周后,骨髓间充质干细胞+吡格列酮组左室舒张末径、左室收缩末径明显减小,左室射血分数明显增高;左心室心肌组织不同区域PPAR-γ和Cx43的表达量显著增加;TGF-β1、SMAD2、SMAD3在梗死区和梗死边缘区表达明显下降。以上结果提示PPAR-γ激动剂吡格列酮干预能够增强骨髓间充质干细胞移植对心功能的改善作用,其机制可能与PPAR-γ抑制TGF-β1/SMAD通路进而提高Cx43的表达有关。

心脏脱细胞基质支架的制备及临床应用前景

背景:全天然的心脏脱细胞支架材料可提供与受体类似的宏观及微观结构、基质成分和血管网分布,是较理想的心脏生物组织工程材料。目的:综述心脏脱细胞基质支架材料的制备方法、成分特征、生物学特性及其在心脏再植方面的最新研究进展。方法:应用计算机检索Pub Med数据库、万方数据库2008年1月至2017年4月有关心脏脱细胞基质的文献,检索词为"heart,cardiac muscle,myocardial tissue,decellularized matrix;心脏,心肌,脱细胞基质",去除与心脏瓣膜有关的文章,最终选取代表性的英文文献44篇、中文文献6篇。结果与结论:目前制备心脏脱细胞基质支架的方法有:物理处理、化学方法和生物学处理(酶解法)法。心脏的细胞外基质支架主要含有Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原、糖氨聚糖、纤连蛋白、层粘连蛋白及少量生长因子。目前,脱细胞基质在心肌组织工程上的应用主要分为3个方向:基于脱细胞基质片层的"创可贴"心肌组织工程研究;基于脱细胞基质的可注射性心肌组织工程研究;基于心脏全器官脱细胞-再细胞化的人工心脏再造研究。尽管心脏脱细胞基质支架方面已取得了一些成功的经验,但用于心脏再植的临床应用还有许多问题亟待解决。

痰热清注射液治疗小儿轮状病毒性肠炎疗效观察

目的观察痰热清注射液治疗小儿轮状病毒性肠炎的临床效果。方法将93例患儿随机分为观察组和对照组。两组患儿均给予西医常规治疗,观察组加用痰热清注射液。结果观察组总有效率高于对照组。结论痰热清注射液能够增强轮状病毒性肠炎患儿的免疫功能,改善腹泻临床症状。

酮咯酸氨丁三醇治疗肾绞痛30例临床分析

目的:探讨酮咯酸氨丁三醇肌肉注射对肾绞痛的镇痛效果。方法:60例肾绞痛患者随机分为治疗组和对照组各30例,在静脉滴注山莨菪碱的同时,治疗组和对照组分别予酮咯酸氨丁三醇肌肉注射30 mg或盐酸曲马多肌肉注射100 mg,观察两组患者30 min内的疼痛缓解率。结果:治疗组和对照组的显效率和有效率分别为67%、90%和23%、63%,差异显著(P<0.05)。结论:酮咯酸氨丁三醇治疗肾绞痛作用显著,并且起效迅速,可作为治疗肾绞痛的首选药。

apelin干预骨髓间充质干细胞在缺血缺氧条件下的生存和血管再生

背景:课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞移植能够改善大鼠心肌梗死后心功能,但整体效果并不太理想,骨髓间充质干细胞在心肌梗死组织局部的生存力和新生血管密度低下。目的:观察血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白内源性配体(apelin)对骨髓间充质干细胞在缺血缺氧条件下的生存和血管形成能力的影响并探讨相关机制。方法:体外培养的骨髓间充质干细胞分为骨髓间充质干细胞组和骨髓间充质干细胞+apelin组,分别于正常条件(完全培养基,体积分数为20%O_2)和缺血缺氧条件(无血清,体积分数为1%O_2)下培养24 h,其中骨髓间充质干细胞+apelin组在培养同时加入apelin-13(5μmol/L)刺激骨髓间充质干细胞。MTS法检测细胞增殖能力,TUNEL法检测细胞凋亡情况。取细胞培养液分别刺激人脐静脉内皮细胞,观察骨髓间充质干细胞血管形成能力。Western blot检测骨髓间充质干细胞中血管内皮生长因子的表达。结果与结论:与骨髓间充质干细胞组相比较,骨髓间充质干细胞+apelin组正常条件和缺血缺氧条件下扩增能力显著增强,凋亡减少,血管管腔样结构明显增多,血管内皮生长因子的表达明显增高。以上结果提示apelin能够增强骨髓间充质干细胞在缺血缺氧环境下的生存和血管形成能力,此效应可能与其上调血管内皮生长因子的表达相关。

心肌干细胞移植可短期内改善心肌梗死心电生理稳定性和提高室颤阈值

背景:课题组前期研究已证实心肌干细胞移植中期(6周)能有效改善心肌梗死大鼠的心电生理稳定性和室颤阈值。目的:比较心肌干细胞和骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠心电生理学稳定性和室颤阈值的短期疗效差异。方法:取30只健康雄性SD大鼠,开胸结扎大鼠的左前降支冠状动脉建立心肌梗死动物实验模型,随机分成3组,分别为心肌干细胞移植组,骨髓间充质干细胞移植组,PBS对照组,每组10只。分别于建模成功2周后在梗死区心肌内局部注射0.1 m L PBS悬浮的5×106 PKH26标记的心肌干细胞、0.1 m L PBS悬浮的5×106 PKH26标记的骨髓间充质干细胞及0.1 m L PBS。植入2周后,再次开胸检测大鼠心脏梗死区、梗死边缘区、非梗死区的心电生理特性和室颤阈值。实验结束后,分离心脏梗死边缘区进行病理切片及荧光显微镜检查PHK26标记的心肌干细胞和骨髓间充质干细胞缝隙连接蛋白43表达情况。结果与结论:心肌干细胞移植组单极电图纠正的激动恢复时间离散度、电刺激所激发的恶性心律失常及梗死区、梗死边缘区、非梗死区的室颤阈值与PBS组、骨髓间充质干细胞移植组相比差异有显著性意义(P<0.05);骨髓间充质干细胞移植组单极电图纠正的激动恢复时间离散度及非梗死区的室颤阈值与PBS组相比差异有显著性意义。病理结果提示在心肌干细胞组、骨髓间充质干细胞组梗死边缘区发现有心肌干细胞、骨髓间充质干细胞的存在。通过组织免疫荧光检测,PKH26标记的心肌干细胞表达较多的缝隙连接蛋白43,而PKH26标记的骨髓间充质干细胞很少表达缝隙连接蛋白43,PBS组不表达缝隙连接蛋白43。上述结果提示心肌干细胞移植短期内心电生理学特性改善的效应较骨髓间充质干细胞优越,且改善效应与缝隙连接蛋白43相关。

心肌干细胞调控ANG Ⅱ/AT1R/TGF-β1/SMAD/CX43通路改进心电生理学稳定性和室颤阈值

背景:课题组前期研究证实心肌干细胞移植中期(6周)能有效改善心肌梗死大鼠的心电生理稳定性和室颤阈值,但具体的调控机制和通路不明。目的:探讨心肌干细胞改善心肌梗死大鼠心电生理学稳定性和室颤阈值的相关分子调控机制。方法:通过开胸结扎20只SD大鼠左前降支冠状动脉建立心肌梗死模型,并随机分为2组:心肌干细胞组和PBS组,每组10只。造模后2周心肌干细胞组在局部梗死心肌内注射PKH26标记的由PBS悬浮的心肌干细胞,PBS组在梗死心肌内注射等量PBS。细胞移植后6周取外周血及左心室心肌组织检测ANGⅡ/AT1R/TGF-β1/SMAD/Cx43通路相关因子的变化。结果与结论:(1)与PBS组相比,Cx43在心肌干细胞组梗死区、梗死边缘区、非梗死区的表达明显增加(P<0.01);(2)与PBS组相比,ANGⅡ在心肌干细胞组血浆(P<0.05)和左心室各区域(P<0.01)的表达明显减少;(3)与PBS组相比,心肌干细胞组左心室心肌组织不同区域AT1R、TGF-β1、SMAD2、SMAD3表达下降(P<0.01),而SMAD7表达增加(P<0.05);(4)结果表明,心肌干细胞移植改善心肌梗死大鼠的心电生理学稳定性和室颤阈值的机制可能与调控ANGⅡ/AT1R/TGF-β1/SMAD/CX43通路,导致CX43表达增加密切相关。

Apelin干预骨髓间充质干细胞移植治疗改善心肌梗死后心功能

背景:课题组前期研究发现血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白内源性配体(apelin)能够促进骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在体外缺血缺氧条件下的生存和血管再生。目的:采用体内实验探讨apelin联合MSCs移植治疗对心肌梗死后心功能的影响及相关机制。方法:开胸结扎50只C57BL/6小鼠左前降支冠状动脉并随机分为5组:MSCs组、MSCs+apelin组、sh-APJ MSCs+apelin组、apelin组和PBS组。模型建立2周后,对动物进行第2次开胸手术,MSCs组于局部梗死心肌内注射单纯的MSCs,MSCs+apelin组和sh-APJ MSCs+apelin组分别注射MSCs以及sh-APJ MSCs并且均连续腹腔内注射2周apelin-13,PBS组心肌内注射不含MSCs的PBS。各组治疗前及治疗2周后检测心功能。实验结束后,摘取心脏检测左心室心肌组织梗死边缘区的MSCs生存和血管再生情况以及相关因子的表达。结果与结论:(1)与治疗前比较,治疗2周后MSCs组、MSCs+apelin组、sh-APJ MSCs+apelin组、apelin组左室射血分数明显增加(P<0.01),左室舒张末期内径、左室收缩末期内径显著减小(P<0.01);其中MSCs+apelin组以上指标改善最显著(P<0.01);(2)与MSCs组和sh-APJ MSCs+apelin组相比,MSCs+apelin组梗死边缘区PKH26阳性细胞和CD31阳性细胞的平均光密度值显著增高,且PKH26和CD31双阳性细胞占PKH26阳性细胞的比例显著增加(P<0.01);(3)与MSCs组和sh-APJ MSCs+apelin组相比较,MSCs+apelin组APJ、AKT、p AKT以及VEGFA表达显著增加,而MSCs组和sh-APJ MSCs+apelin组在上述各项指标表达方面差异均无显著性意义(P>0.05);(4)以上提示apelin能够通过与其受体APJ结合改善MSCs在心肌梗死局部组织中的生存和血管再生,从而进一步提高心肌梗死后心功能,此效应与VEGFA表达上调相关,PI3K/AKT的激活可能在其中起到一定的调控作用。

TGF-β1/Smad通路在血管紧张素Ⅱ下调缝隙连接蛋白43表达中的作用

目的:分析心肌梗死(MI)后心脏组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、缝隙连接蛋白43(Cx43)和转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路相关因子的变化情况,以探讨AngⅡ能否经由TGF-β1/Smad调节Cx43的表达。方法:采用左前降支冠状动脉(LAD)结扎建立大鼠心肌梗死模型后,20只SD雄性大鼠随机分为氯沙坦(20 mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗组与MI组,分别于结扎后及治疗2周后检测心功能情况,并检测治疗2周后左室心肌组织不同区域AngⅡ、AngⅡ1型受体(AT1)、Cx43以及TGF-β1/Smad通路相关分子的变化情况。结果:氯沙坦组左室舒张末期内径(LVIDd)和左室收缩末期内径(LVIDs)明显缩小(P<0.01),室间隔厚度(IVSd)及左室后壁厚度(LVPWd)明显减小(P<0.05),左室射血分数(LVEF)显著增加(P<0.01);梗死区和边缘区的AngⅡ水平明显降低;梗死区AT1表达显著降低;Cx43在心肌组织不同区域表达增高,TGF-β1、Smad 2、Smad 3在心肌组织不同区域表达均降低,而Smad 7表达增高。结论:心肌梗死后AngⅡ激活可能通过作用于TGF-β1/Smad通路导致Cx43表达下调。

长链非编码RNA-H19对缺血缺氧条件下骨髓间充质干细胞生存和血管再生能力的影响

背景:课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植后其在局部梗死组织中的生存力低下,形成新生血管的密度较低,在一定程度上影响了其治疗的效率。长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)被证实与骨髓间充质干细胞分化及血管形成密切相关。目的:体外观察lncRNA-H19对骨髓间充质干细胞在缺血缺氧条件下生存和血管再生能力的影响,并探讨其可能机制。方法:体外培养的骨髓间充质干细胞分为5组:MSCs+H19组、MSCs+H19对照组(MSCs+H19 NC组),MSCs+si-H19组、MSCs+si-H19对照组(MSCs+si-H19 NC组)和MSCs组。其中MSCs+H19组和MSCs+H19NC组分别予以转染lncRNA-H19及lncRNA-H19 scramble RNA阴性对照,MSCs+si-H19组和MSCs+si-H19NC组分别转染lncRNA-H19 siRNA及lncRNA-H19 siRNA scramble阴性对照,体外缺血缺氧条件(无血清,体积分数为1%O_2)下培养24 h,MTS法检测细胞增殖情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况。取细胞培养基上清液分别刺激人脐静脉内皮细胞,观察血管形成情况。Western blot检测各组血管内皮生长因子A表达。结果与结论:(1)与MSCs组及MSCs+H19 NC组相比,MSCs+H19组增殖能力显著增强,凋亡显著减少,血管管腔样结构明显增多(P<0.01);(2)与MSCs组及MSCs+si-H19 NC组相比,MSCs+si-H19组增殖能力显著减弱,凋亡显著增加,血管管腔样结构明显减少(P<0.01);(3)与MSCs组及MSCs+H19 NC组相比,MSCs+H19组血管内皮生长因子A表达显著增高;(4)与MSCs组及MSCs+si-H19 NC组相比,MSCs+si-H19组血管内皮生长因子A表达显著减少;(5)结果表明,lncRNA-H19促进骨髓间充质干细胞在体外缺血缺氧环境下的生存并增强其血管形成能力,此作用可能与其上调血管内皮生长因子A表达相关。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ促进外源性骨髓间充质干细胞表达Cx43的作用及机制

背景:过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂能促进外源性骨髓间充质干细胞的生存和向心肌细胞分化及改善心功能。研究欲进一步验证吡格列酮能否促进内源性骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化及改善心功能的相关机制。目的:比较过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂吡格列酮联合骨髓间充质干细胞移植治疗、单纯吡格列酮治疗及磷酸缓冲液治疗疗效的差异及其相关机制。方法:开胸结扎30只SD大鼠左前降支冠状动脉并随机分为3组:骨髓间充质干细胞+吡格列酮组、吡格列酮组、磷酸缓冲液组。造模后2周骨髓间充质干细胞+吡格列酮组在局部梗死心肌内注射PKH26标记的由PBS悬浮的骨髓间充质干细胞,吡格列酮组和磷酸缓冲液组在梗死心肌内注射PBS,骨髓间充质干细胞+吡格列酮组和吡格列酮组在注射骨髓间充质干细胞后予以吡格列酮3 mg/(kg·d)连续灌胃2周。治疗2周后检测心功能,摘取心脏检测左心室心肌组织不同区域过氧化物酶体增殖物激活受体γ、缝隙连接蛋白43和TGF-β1/SMAD通路相关因子的表达变化。结果与结论:(1)3组大鼠在干预开始时心功能参数无明显差异性。干预2周后,骨髓间充质干细胞+吡格列酮联合治疗组左室舒张末径、左室收缩末径明显减小,左室射血分数明显增高;(2)骨髓间充质干细胞+吡格列酮组和吡格列酮组左心室心肌组织不同区域过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达量显著增加;(3)骨髓间充质干细胞+吡格列酮组在梗死区和梗死边缘区Cx43表达较吡格列酮组和磷酸缓冲液组显著增高,TGF-β1、SMAD2、SMAD3表达明显下降,吡格列酮组与磷酸缓冲液组在上述指标方面表达差异无显著性意义;(4)结果表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂吡格列酮并不能刺激内源性骨髓间充质干细胞的增殖分化并改进心功能,吡格列酮联合外源性骨髓间充质干细胞能改善心功能,其机制可能与过氧化物酶体增殖物激活受体γ抑制TGF-β1/SMAD通路进而促进外源性骨髓间充质干细胞表达Cx43有关。

HIF-1α/apelin/APJ通路在缺氧预处理促进心肌干细胞增殖和向心肌样细胞分化中的作用

背景:课题组前期研究显示心肌干细胞移植能够改善大鼠心肌梗死后心功能,但心肌干细胞在局部心肌梗死组织中的生存及心肌分化效率低下。目的:体外实验观察缺氧预处理对心肌干细胞增殖和向心肌样细胞分化的影响并探讨HIF-1α/apelin/APJ通路在其中的作用。方法:体外培养的心肌干细胞分为缺氧组(体积分数为1%O2)和常氧组(体积分数为20%O2),培养24 h后,MTS法检测两组细胞的增殖情况,Western blot检测缺氧诱导因子1α、apelin、APJ的表达;两组细胞用5-氮杂胞苷诱导分化24 h,再进行正常培养2周,Western blot检测缺氧诱导因子1α、apelin、APJ以及c Tn T的表达;免疫荧光染色观察c Tn T阳性的心肌样细胞的比例。结果与结论:(1)与常氧组比较,缺氧组在培养24 h后的增殖率和A490值均显著增高(P<0.01);(2)与常氧组比较,缺氧组在培养24 h和诱导分化2周后缺氧诱导因子1α、apelin和APJ的蛋白表达量均明显增高(P<0.01);(3)与常氧组比较,缺氧组诱导分化2周后c Tn T阳性的心肌样细胞的比例显著增加(P<0.01),c Tn T蛋白表达量明显增高(P<0.01);(4)结果表明,缺氧预处理能够促进心肌干细胞的增殖和向心肌样细胞发生分化,此效应可能与缺氧诱导因子1α/apelin/APJ通路的激活相关。

用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向关系

目的:构建长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)萤光素酶报告质粒,利用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)的靶向关系。方法:通过生物信息学网站RegRNA2.0预测获取小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p潜在的互补结合位点。将H19及其突变体克隆到萤光素酶载体psi CHECK-2中,构建H19野生型和突变型质粒,并采用酶切和测序方法鉴定psi CHECK-2-H19载体是否构建成功。将H19野生型和突变型质粒分别与miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照或miR-199a-5p抑制剂阴性对照在293T细胞中共转染。收集细胞后通过双萤光素酶报告系统检测不同组别的萤光素酶活性,从而对lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向调节关系进行验证。结果:构建的重组萤光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确,双萤光素酶报告基因检测显示,与miR-199a-5p模拟物阴性对照组相比,miR-199a-5p模拟物组H19野生型报告基因的萤光素酶活性显著降低,下降约49%左右(P<0.01),而miR-199a-5p抑制剂组H19野生型报告基因的萤光素酶活性较miR-199a-5p模拟物组明显增高(P<0.01)。miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照以及miR-199a-5p抑制剂阴性对照对H19突变型的萤光素酶活性均无明显影响。结论:lncRNA-H19能够靶向结合miR-199a-5p,并在转录后水平对其有直接抑制作用。

ELA/APJ通过上调miR-133a抑制心肌细胞在缺血缺氧条件下凋亡的机制研究

目的观察血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白(APJ)的内源性配体ELABELA(ELA)对心肌细胞在缺血缺氧条件下凋亡的影响,并探讨miR-133a在其中的调控机制。方法将体外培养的心肌细胞分为Control组、ELA治疗组、ELA+siAPJ组、ELA+siAPJ NC组、ELA+miR-133a inhibitor组、ELA+ miR-133a inhibitor NC组,在缺血缺氧条件(无血清,1%体积分数O2)下培养24 h。免疫荧光鉴定心肌细胞标志物心肌α肌动蛋白(α-SA)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达情况。流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。Western blot、qRT-PCR检测各组细胞APJ、miR-133a的表达情况。结果①与Control组比较,ELA治疗组细胞早期凋亡率与晚期凋亡率显著减少(P < 0.01);②与对应的NC组细胞比较,ELA+siAPJ组、ELA+miR-133a inhibitor组细胞早期凋亡率与晚期凋亡率明显增加(P < 0.01);③与Control组比较,ELA治疗组细胞APJ的蛋白与mRNA表达量、miR-133a的mRNA表达量均明显升高(P < 0.01);④采用siRNAs阻断APJ的表达后,与ELA+siAPJ NC组比较,ELA+siAPJ组细胞APJ的蛋白与mRNA表达量、miR-133a的mRNA表达量均显著减少(P < 0.01)。采用siRNAs阻断miR-133a的表达后,ELA+miR-133a inhibitor组细胞APJ的蛋白与mRNA表达量与ELA+miR-133a inhibitor NC组比较,差异无统计学意义(P > 0.05),miR-133a的mRNA表达量显著减少(P < 0.01)。结论 ELA能够抑制心肌细胞在缺血缺氧环境下的凋亡,此效应可能与其激活APJ之后上调miR-133a有关。

LncRNA-Braveheart促进骨髓间充质干细胞在体外向心肌样细胞分化

背景:课题组前期研究发现骨髓间充质干细胞移植能够改善大鼠心肌梗死后心功能,但整体效果并不太理想,骨髓间充质干细胞在体内局部梗死微环境中的分化效率低下,其向心肌细胞分化的能力极其有限。目的:采用lncRNA-Bvht体外转染骨髓间充质干细胞,观察其对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响。方法:构建含lncRNA-Bvht的病毒载体p LVX-IRES-Zs Green1-lncRNA-Bvht,对骨髓间充质干细胞进行lncRNA-Bvht转染并检测转染效率。分离培养C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞,并将第3代细胞分为3组:骨髓间充质干细胞组、空载体组和lncRNA-Bvht组。各组细胞培养48 h后用5-氮杂胞苷进行诱导分化24 h再进行正常培养2周,荧光显微镜观察骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化情况,免疫荧光染色、Western blot、qRT-PCR检测心肌分化标记物肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达。结果与结论:①诱导分化后细胞形态发生改变,细胞之间形成连接,排列方向趋于一致;②免疫荧光检测结果显示lncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白表达呈现强阳性;肌钙蛋白T阳性细胞的比例显著增加;③qRT-PCR和Western blot检测结果显示lncRNA-Bvht组肌钙蛋白T和肌节蛋白的表达较空载体组和骨髓间充质干细胞组均明显升高(P<0.01);④结果提示,lncRNA-Bvht转染能够有效促进骨髓间充质干细胞在体外向心肌样细胞发生分化。

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死及随后的心肺复苏(英文)

背景:至目前为止发表的心肺复苏论文所使用的基本为健康动物,而临床实际情况是在心肺复苏发生之前患者大多有严重的心脏疾病,并导致了心室颤动的发生。目的:实验力图接近临床实际,观察骨髓间充质干细胞移植后心肌梗死大鼠心功能的变化,及对其心肺复苏结果的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-04/08在美国南加州大学和中山大学附属第二医院联合完成。材料:成年SD雄性大鼠18只,随机分为模型对照组、细胞移植组,9只/组。另取1月龄SD大鼠1只用于制备骨髓间充质干细胞。方法:两组大鼠均结扎左前降支冠状动脉建立心肌缺血模型,4周后再次开胸,细胞移植组梗死心肌局部注射PKH26荧光标记的骨髓间充质干细胞悬液0.1mL(5×106个细胞),模型对照组同法注射等量PBS。4周时诱导心室颤动及进行心肺复苏。主要观察指标:移植后2,4周用超声心动图测量心功能;测量心肺复苏前及心肺复苏后4h内的血液动力学参数的变化;在心肺复苏72h后取心肌组织进行病理切片检查。结果:与模型对照组比较,移植后2,4周细胞移植组射血分数均明显升高(P<0.01)。在心肺复苏前及心肺复苏后4h内,与模型对照组比较,细胞移植组心脏指数、左心室收缩压力上升到40mmHg(1mmHg=0.133kPa)时的上升速率、左心室舒张速率、左心室舒张末压均有明显改善(P<0.01,P<0.05)。与模型对照组比较,细胞移植组大鼠心肺复苏后可生存至72h,生存时间明显延长(P<0.05)。病理切片结果显示心肌内存在大量PKH26标记的骨髓间充质干细胞。结论:大鼠心肌梗死后,骨髓间充质干细胞移植治疗能明显改善其心功能、心肺复苏前后的血流动力学参数以及生存时间。

痰热清注射液治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性加重合并2型呼吸衰竭临床观察

目的观察在常规处理基础上加用痰热清注射液治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)合并2型呼吸衰竭的临床疗效。方法将70例患者随机分为治疗组、对照组各35例,对照组采用抗感染、解痉、平喘、氧疗、化痰,维持电解质及酸碱平衡等西医综合治疗,治疗组在此基础上加用痰热清注射液,每日20mL,两组疗程均为2周。结果治疗组总有效率88.57%高于对照组的65.71%,治疗组血气分析指标的改善优于对照组(均P<0.05)。结论在常规处理基础上加用痰热清注射液能有效提高AECOPD合并2型呼吸衰竭的治疗效果。

促进心肌干细胞向心肌细胞分化的策略

背景:近年研究表明心脏内存在内源性的心肌干细胞,可以修复受损心肌,使心肌再生。目的:综述目前能够提高心肌干细胞分化的方法。方法:应用计算机检索Pub Med数据库中近10年有关心肌干细胞分化的文献,检索词为"cardiac stem cells,cardiac progenitor cells,differentiation",选择以提高心肌干细胞分化为主题的文章,最终选取代表性英文文献64篇。结果与结论:通过导入细胞因子,micro-RNA以及一些物理与化学的方法诱导心肌干细胞向心肌细胞分化,从而显著提高了心肌干细胞治疗心肌梗死的效率。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并贫血的相关因素分析

目的了解COPD急性加重期(AECOPD)合并贫血的发生率,探讨其可能相关因素。方法对2012年部分住院的AECOPD患者,根据血红蛋白的水平分为贫血组和非贫血组,比较两组一般资料、血常规和血液生化的检测结果。结果贫血组患者的年龄较高,白蛋白﹑超氧化物歧化酶(SOD)﹑总铁结合力﹑转铁蛋白均显著低于非贫血组,超敏CRP高于贫血组(P均<0.05)。两组的BMI﹑住院时间﹑肺功能﹑PaO2、血清总蛋白﹑血清铁﹑不饱和铁结合力水平比较差异均无统计学意义。Logistic多元回归分析显示,年龄﹑低白蛋白水平和SOD活性下降是AECOPD患者发生贫血的独立危险因素(P均<0.05)。结论部分AECOPD患者合并贫血,这可能与氧化∕抗氧化失衡和营养不良有关。

急诊死亡病例放弃治疗原因分析及临床实践

对本院急诊科2008年～2012年302例急诊死亡病例进行分析,通过比较分析放弃治疗死亡和非放弃治疗死亡2组患者的年龄、疾病分类、伴发病、费用类别等情况,探析放弃治疗原因及探讨在急诊临床工作中如何实施放弃治疗.本组放弃治疗的主要原因是患者为疾病无康复可能、终晚期的老人.在放弃治疗过程中医生要遵循一定的程序,反复评估病情,确定是否符合放弃治疗标准,并与家属充分沟通,尊重患者的各种权利,同时必须规范填写医疗文书.