煅烧温度对环保型莫来石多孔陶瓷结构和性能的影响

莫来石多孔陶瓷因其高强度和耐腐蚀等性能得到广泛地应用。然而,由于合成莫来石的原料高岭土的不可再生性及持续上涨的价格,寻找廉价易得的替代原料对于合成莫来石多孔陶瓷迫在眉睫。建筑废弃物的成分与高岭土相似,可作为高岭土的可行替代品之一。以建筑废弃物和Al_(2)O_(3)为主要原料,AlF_(3)为晶须催化剂,B_(2)O_(3)为烧结助剂,成功制备了环保型莫来石多孔陶瓷。通过阿基米德排水法、XRD和SEM等表征手段,深入探究了多孔陶瓷的晶相、微观形貌和物理化学特性。同时,研究了煅烧温度对莫来石多孔陶瓷结构和性能的影响规律及作用机制。结果表明,适当提升煅烧温度有助于莫来石晶须的生成,但过高的温度会导致晶须粗化和晶粒增大。当煅烧温度为1200℃时,莫来石晶须的生长形貌最佳,晶须直径约为0.05—0.1μm、长度为0.5—1μm、长径比在15—20之间。随着煅烧温度增加,莫来石多孔陶瓷的开口孔隙率不断降低,抗折强度不断增强。当煅烧温度为1200℃时,样品的开口孔隙率达到(61.78±0.72)%,抗折强度达到(3.74±0.46)MPa。因此,以建筑废弃物为主要原料可成功制备具有高气孔率的莫来石多孔陶瓷。本研究为建筑废弃物合成莫来石多孔陶瓷提供了可靠的理论支持,对降低生产成本及推动建筑废弃物资源化再利用等有重要理论价值和实际意义。

CRISPR/Cas9沉默Fas可抑制急性肝衰竭细胞线粒体自噬及减轻线粒体损伤

目的 探讨凋亡相关因子(Fas/CD95)在急性肝衰竭疾病进展中的作用及机制。方法 构建刀豆蛋白A诱导的急性肝衰竭小鼠动物模型,通过透射电子显微镜及免疫印迹检测了急性肝衰竭肝细胞内的线粒体自噬发生;在小鼠尾静脉输注靶向Fas基因的CRISPR/Cas9质粒,随后予以刀豆蛋白A诱发急性肝衰竭,检测小鼠肝组织急性损伤情况及肝细胞内线粒体自噬及线粒体损伤的变化,同时体外转染靶向Fas的CRISPR/Cas质粒到细胞内,刀豆蛋白A诱导HepG2肝细胞损伤,验证Fas敲除后对线粒体自噬和线粒体损伤的影响。结果 刀豆蛋白A可诱导小鼠急性肝衰竭,透射电镜观察发现肝细胞中发生了线粒体自噬,肝细胞内p62蛋白水平降低,PINK1/Parkin的蛋白上调,Fas的表达上调;小鼠肝组织和体外肝细胞先予以PX330Fas质粒转染,再予以刀豆蛋白A诱导肝损伤后,LC3II/LC3I表达比值减低,p62蛋白的表达得到恢复,线粒体蛋白COX4I1和线粒体DNA含量的水平下降,Fas表达下调,与转染空白质粒的对照组相比,差异均有统计学意义。结论 CRISPR/Cas9沉默Fas抑制急性肝衰竭进展及肝细胞内线粒体自噬的发生和线粒体损伤,从而减轻急性肝衰竭的细胞死亡,为临床开展急性肝衰竭的新治疗策略提供了新依据和新靶点。

Fas通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活调控肝癌细胞增殖

目的探究肿瘤坏死因子受体超族成员6(Fas)调控肝癌细胞株增殖的潜在分子机制。方法收集正常肝细胞LO2和肝癌细胞株Hep3B、Huh7、PLC/PRF/5、Bel-7402、SMMC-7721、HepG2和SK-hep1,实时荧光定量PCR法检测Fas基因表达,运用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析Fas基因表达与肝癌的关系,设计特异性靶向Fas的siRNA,敲低肝癌细胞中Fas基因的表达,通过噻唑蓝(MTT)实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,双荧光素酶实验检测β-连环蛋白(β-catenin)介导的T细胞因子(TCF)/淋巴增强子(LEF)转录活性,蛋白质印迹法检测β-catenin蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测无翅型MMTV整合位点家族成员(Wnt)/β-catenin信号通路下游靶基因八聚体结合转录因子3/4(Oct3/4);G1/S-特异性周期蛋白-D1(CCND1);血管内皮生长因子(VEGF);B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点-1(Bmi)的表达。结果TCGA肝癌样品中Fas基因表达谱结果显示,肝癌组织Fas mRNA水平显著低于正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.001);同时随着肝癌病程的进展Fas基因的表达逐渐下调,且Fas高表达患者的生存率显著高于低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌细胞Hep3B、Huh7、PLC/PRF/5、Bel-7402、SMMC-7721中Fas基因表达显著低于正常肝细胞LO2,差异均有统计学意义(t=19.20、19.16、19.20、12.81、7.58,P均<0.05)。与siRNA阴性对照(si-NC)组比较,肝癌细胞HepG2和SMMC-7721转染si-Fas后(si-Fas组)Fas基因表达显著下调,差异均有统计学意义(t=25.20、42.63,P均<0.05);克隆形成明显增多,差异均有统计学意义(t=3.97、3.76,P均<0.05);凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(t=4.76、16.54,P均<0.05);G2/M细胞周期占比更低,差异均有统计学意义(t=11.31、4.09,P均<0.05)。机制研究发现,与si-NC组比较,HepG2和SMMC-7721细胞si-Fas组中Wnt/β-catenin信号通路核心蛋白β-catenin蛋白表达上调,差异均有统计学意义(t=8.67、11.38,P均<0.05);TOPflash相对荧光强度显著增加,差异均有统计学意义(t=5.54、5.06,P均<0.05);Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因Oct3/4、CCND1、VEGF和Bmi表达上调,差异均有统计学意义(t=5.27、5.27、3.59、4.92,6.70、7.73、6.74、7.87,P均<0.05)。结论Fas可通过抑制肝癌细胞Wnt/β-catenin信号通路的激活发挥抑制肝癌增殖的作用。