酶法测定糖化血清白蛋白的多中心临床研究

目的糖化血清白蛋白(GA)是反映近期血糖控制总体水平的血糖对应指标,采用酶法测定上海3所三级甲等医院糖尿病患者的GA水平,观察其在中国上海糖尿病患者群中的临床意义。方法分别在3所医院随机抽取142例2型糖尿病患者,测定空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA_1c)、GA等。第1个月内每2周强化治疗1次,以后每个月强化治疗1次,至3个月。结果所有患者强化治疗结束后的各项血糖指标较入组前明显改善(P＜0．01)。GA与FPG或2hPG的相关系数(r=0．598和O．585)均高于HbA_1c (0．574和0．555),均呈显著正相关(P＜0．01)。所有受试者中,GA与HbA_1c呈显著正相关(r=0．777,P＜0．01)；而在初诊患者中相关性更好(r=0．835,P＜0．01)。结论GA是一个可反映血糖近期变化的优良且检测方便的指标,采用酶法测定的GA与各项血糖指标及HbA_1c有较好的相关性,在初次诊断的糖尿病患者中更为显著。

基于微阵列聚焦电泳的糖尿病血样临床阳离子交换高效液相色谱图中血红蛋白A_(3)峰位置推测

血红蛋白A_(1c)(HbA_(1c))是糖尿病诊断的关键生物标志物,目前其常用的分析方法为阳离子交换高效液相色谱法(CX-HPLC,5/50 mm分离柱),此方法虽然具有稳定、快捷与自动化等众多优点,但临床CX-HPLC(VARIANTⅡsystem)谱图中仍存在未知峰,尤其干扰HbA1c准确测定的谷胱甘肽化血红蛋白A_(3)(HbA_(3))在色谱图中的相对位置仍不清楚。针对这一问题,该文以人新鲜血液为样本,首先利用低分辨CX-HPLC对血样进行分析,提示未知峰P3存在。然后通过微阵列等电聚焦(IEF)电泳和高分辨阳离子交换HPLC(Mono-S 5/50 mm分离柱)对血样的主要血红蛋白(Hb)成分进行分析,提示未知峰P3为HbA3峰。随后,通过血红蛋白谷胱甘肽化实验,利用HbA_(1c)峰降低、HbA_(3)峰明显增强这一信息,进一步推测未知峰P3即是HbA_(3)峰,其在CX-HPLC中的保留时间在1.50 min左右。最后,结合前期研究讨论了体内应激情况下Hb谷胱甘肽化对HbA_(1c)检测的影响。该研究丰富了CX-HPLC的未知峰P3的色谱信息,为更精准诊断糖尿病提供了有价值的参考。

TRAb 测定在诊断及预测 Graves 病复发中的价值

目的探讨促甲状腺激素受体抗体（ＴＲＡｂ）在诊断及预测Ｇｒａｖｅｓ病复发中的价值。方法应用放射受体分析法测定７９例Ｇｒａｖｅｓ病患者的血清ＴＲＡｂ活性。结果甲亢未控制组ＴＲＡｂ阳性率（９５５５％）和抑制率［（４５８５±２２６４）％］均显著高于甲亢控制组［分别为３８２３％和（１６２９±１５５８）％］，１２例Ｇｒａｖｅｓ病经停药后随访１２２４个月，８例ＴＲＡｂ阴性者中有５例复发，４例ＴＲＡｂ阴性者均无复发。复发患者的ＴＲＡｂ活性较复发前升高（Ｐ＜００５）。结论ＴＲＡｂ是诊断和预测Ｇｒａｖｅｓ病复发的良好指标。

雅培ALINITY i平台测定甲状腺激素TT3和FT3的性能评价

目的对ALINITY i免疫发光测定系统检测游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)和总三碘甲腺原氨酸(total triiodothyronine,TT3)的性能进行验证,并评估新型ALINITY i系统6点校准体系和传统ARCHITECT系统6点校准体系检测对两项甲状腺激素(FT3和TT3)检测结果的一致性。方法按照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)制定的指南文件和相关文献,对ALINITY i系统测定的FT3和TT3的精密度、最低检出限、线性和生物参考区间进行验证,并参考其中的CLSI EP9-A2文件对雅培ALINITY i系统6点校准体系和雅培ARCHITECT系统6点校准体系两种检测方法间的两项甲状腺激素检测结果进行方法学分析评价,并采用Pearson相关分析和Passing-bablok做数据比对分析。结果ALINITY i系统6点校准体系检测FT3和TT3实验室内各水平总精密度均小于1/3 TEa,在可接受范围。通过线性验证试验证实上述两个项目在厂商声明的范围内呈良好的线性关系。生物参考区间与试剂厂商提供的参考区间数据相符。通过FT3和TT3两个检测项目评价两种检测方式的相关性和偏倚情况,FT3和TT3在雅培ALINITY i平台6点校准试剂检测和雅培ARCHITECT平台6点校准试剂检测的结果之间相关系数分别为0.996和0.987,斜率分别为0.998和0.924,两者检测结果之间有很强的相关性。结论ALINITY i的免疫检测游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和总三碘甲腺原氨酸(TT3)的性能符合既定的实验室设置标准,且关键性能参数与ARCHITECT高度一致。

血清泌乳素单克隆抗体放射免疫测定法

应用小剂量人垂体泌乳素(hPRL),多次免疫BALB/c小鼠,制备了抗hPRL单克隆抗体(MAB),用以建立了人血清hPRL放射免疫测定法。所制备单抗与LH、FSH、TSH、hCG均无交叉反应,与hGH的交叉反应率仅为0.01%。免疫印迹试验结果hPRL-MAB与人垂体抽提物呈现免疫反应色区,分子量约为24KDa。本法最小可测剂量为1ng/ml。批内和批间变异系数分别为2.8%和7.8%,回收试验回收率力0.972±0.057;标本稀释试验呈线性关系。本法与多克隆抗血清放免药盒在测定中相关性良好(r=0.946)。用本法检测了一组闭经、泌乳和伴垂休泌乳素瘤患者,结果与临床符合。

上海地区糖化血红蛋白一致性计划建立和结果初步评价

2009年，美国糖尿病协会（American Diabetes Association，ADA）国际专家委员会正式推荐使用糖化血红蛋白AlC（glycohemoglobin A1c，HbAlC）作为糖尿病的诊断指标之一。自此，沿用多年的以血糖浓度为主要标准的糖尿病诊断模式发生了重要改变。HbAlC不仅作为判断血糖控制情况的疗效评价指标，也在糖尿病诊断中起到重要的作用。

基因型明确的17α-羟化酶／17，20-裂解酶缺陷症杂合子肾上腺皮质功能的研究

目的明确携带CYP17A1基因突变的杂合子个体肾上腺类固醇激素合成功能。方法对17α-羟化酶和17，20-裂解酶缺陷（170HD）5个家系的8例患者和14例家系成员，通过PCR产物直接测序的方法来鉴定CYP17A1基因突变，并测定CYP17A1基因突变携带者与45名年龄、性别匹配的正常个体在ACTH兴奋前后肾上腺皮质激素的变化。结果发现5个家系14例CYP17A1基因突变的携带者中，7例为13487_F489del，6例为Y329fs，1例为H373L。杂合携带者基础和ACTH刺激后的皮质醇水平均低于正常对照，而兴奋后的皮质酮水平高于正常。杂合子的皮质酮与皮质醇的比值在ACTH兴奋前后皆高于正常对照。而男性杂合子在ACTH兴奋前后孕酮水平以及孕酮与17-羟孕酮比值也均都高于正常对照。D487_F489del和Y329fs两组杂合子之间的激素水平无显著差异。结论与CYP21A2基因突变的携带者体内的21-羟化酶活性轻度受损相类似，CYP17A1基因突变杂合携带者的肾上腺类固醇激素合成已有异常。

糖尿病患者尿液高效毛细管电泳图谱分析

高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)技术在药物分析、生物化学方面的应用已日益增多。1991年,Chen等大运用该技术分析了人体部分体液。我们应用HPCE技术对非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者的尿液进行分析,并探讨其临床应用的价值。 一、对象:NIDDM患者100例,来源于本院住院和专科门诊患者。按临床情况分为: 1.NIDDM初发病组12例(男9例,女3例),年龄32～68岁,均为首次发病,不包括同时伴有糖尿病慢性并发症者。

抗人雌激素受体单抗的制备及鉴定

分别采用部份纯化的人乳腺癌雌激素受体（ｈＥＲ）及合成的与ｈＥＲ分子中ＤＮＡ结合区序列相同的多肽（ＡＴ３）作免疫原。经用Ｋｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｉｓｔｅｉｎ杂交瘤技术，制备出７株抗人雌激素受体单体（１Ｈ１２、２Ｄ７、ＡＴ３～２７等），并经ｓｅｐｈａｃｒｙｌ凝胶层析、免疫沉淀反应和间接免疫荧光标记法作特异性鉴定。其中一株高亲和力、高特异性的单抗（１Ｈ１２）在免疫沉淀反应中与人乳腺癌雌激素受体的特异性结合率达４６．２±２２．０％，并用该单抗成功地进行了人乳腺癌组织冰冻切片的ｈＥＲ间接免疫荧光标记。