板连败毒口服液的急性毒性与长期毒性试验

探索板连败毒口服液的急性毒性与长期毒性。急性毒性试验中,SPF级昆明小鼠预试验高剂量组灌胃达到6000 mg/kg,实验动物死亡为0/4,故将动物数量增加至10只(雌、雄各半),并且重复2次,观察实验动物中毒表现和死亡情况。长期毒性试验中,SPF级SD大鼠96只分为4组,每组24只(雌雄各半),空白对照组、板连败毒口服液高、中和低剂量组,给药期限30 d,停药后观察15 d。每天观察大鼠外观体征、饮水和食欲情况,每周称量体重,第30天和第45天分别处死16只和剩余部分,采血检测血常规、血液生化和解剖观察主要脏器病理学变化。急性毒性试验中,板连败毒口服液LD50大于6000 mg/kg,实际无毒。长期毒性试验中,体重增长趋势组间均无显著差异;组间血常规和血液生化指标均在正常范围内,其中红细胞数量等指标有波动,但其差异水平停药后恢复正常;重要器官的脏器系数及病理变化组间均无差异显著性。研究结果表明,板连败毒口服液实际无毒,在临床拟用量范围内使用安全。

应用型本科院校人文素质教育路径

为了培养德、智、体、美、劳全面发展、德才兼备的学生,提高学生的人文素养,文章首先阐述了应用型本科院校人文素质教育现状,然后提出了应用型本科院校人文素质教育策略,包括合理设置人文素质教育课程、加强校园文化建设、采用多元化教育手段。

板连败毒口服液解热作用及其机理研究

对板连败毒口服液(BBO)的解热作用及其可能的作用机制进行探索。48只清洁级新西兰大白兔随机分成6组(8只/组),分别为阴性对照组、阳性对照组、阳性药物组(布洛芬)、BBO低剂量组、BBO中剂量组、BBO高剂量组。阴性对照组家兔耳缘静脉注射生理盐水4mL/kg;其余各组家兔耳缘静脉注射330mL/L脱脂牛奶溶液4mL/kg建立发热模型。造模1h后,低、中、高剂量组分别灌胃给予BBO(0.6、1.2、2.5g/kg),连续3次,每次间隔1h;阳性药物组灌胃给予布洛芬水溶液(0.03g/kg)连续3次,阳性对照组与阴性对照组给予等体积灭菌生理盐水灌胃,连续3次,每次间隔1h。造模后每1h测定体温一次,连续监测5次,观察BBO对家兔发热的解热作用。监测完最后一次体温后麻醉家兔取下丘脑,ELISA检测下丘脑中与炎性发热相关因子,包括白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、环磷酸腺苷(cAMP)和前列腺素E2(PGE2)等,探讨BBO的解热机制。结果表明,BBO能够显著降低家兔体温;能够显著降低下丘脑中IL-1β、IL-6、cAMP、PGE2的含量。BBO的解热机制可能与抑制下丘脑IL-1β、IL-6、PGE2等内生致热源从而降低cAPM分泌有关。

恩诺沙星诱导鸡急性肝损伤模型的建立

旨在制作鸡的急性药物性肝损伤模型,将40只33日龄SPF级白羽鸡随机分成4组,每组10只,模型组灌胃不同浓度的恩诺沙星(200、150、100 mg/kg),对照组灌胃等体积蒸馏水,每天给药1次,连续给药5 d。最后1次灌胃后,禁食不禁水,24 h后空腹称重并颈静脉采血用于肝功能检测,取肝脏计算肝指数、剖检后肉眼观察、组织切片进行HE染色观察肝脏组织病理学变化。结果显示,模型组丙氨酸氨基转移酶(ALT)和直接胆红素(DBIL)同时升高,其中DBIL升高至对照组的2倍以上;总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)同时升高,其中TBIL升高至对照组的2倍以上,认为这2组指标可以作为恩诺沙星致鸡急性肝损伤诊断的生化参考依据;模型组肝脏病理切片均有不同程度的肝细胞病变,可视为鸡急性药物性肝损伤诊断的“金标准”。结果表明,鸡连续灌胃100 mg/kg的恩诺沙星5 d可以制作急性药物性肝损伤模型,此模型可用于保肝护肝药物筛选和药物性肝损伤机制的研究。

茵黄口服液的安全药理学试验

为评价茵黄口服液对动物心血管系统、呼吸系统和神经系统的影响,取SPF级KM小鼠80只,随机分为4组,分别为黄口服液高剂量组[20.0 g/(kg·bw)]、中剂量组[10.0 g/(kg·bw)]、低剂量组[5.0 g/(kg·bw)]和空白组(灌胃相同体积的蒸馏水),给药前(-1 h)、后(0 h、1 h、2 h、4 h)采用MC4000无创血压仪检测小鼠收缩压(SAP)、舒张压(DAP)和脉搏(P);采用EMKA无创肺功能仪检测呼吸频率(RF)、潮气量(TV)和呼吸曲线。此外,采用常规方法分别检测对戊巴比妥钠阈剂量和阈下剂量的催眠效果、自主活动和机能协调运动情况。结果显示,高剂量组和低剂量组在给药后4 h的收缩压和舒张压较对照组有显著下降(P<0.05);各剂量组对呼吸频率、潮气量和呼吸曲线无显著影响;高剂量组显著减少戊巴比妥钠阈剂量小鼠的入睡时间(P<0.05),显著延长小鼠的睡眠维持时间(P<0.05);各剂量组对阈下剂量小鼠的睡眠个数、自主活动次数和转棒坠落率无显著影响。表明茵黄口服液有一定的降压作用和镇静作用。

多指标综合评分结合正交试验法优选大鼠对乙酰氨基酚肝损伤模型

采用正交试验方法优选大鼠对乙酰氨基酚(APAP)染毒致肝损伤模型最佳制作条件。选择对肝功能指标有影响的3个因素:染毒剂量、中毒途径和采血时间,设置3个水平,采用L_(9)(3^(4))正交表安排试验,以肝生化指标综合评分作为参考依据,优选大鼠肝损伤模型的最佳条件。结果显示,APAP以800 mg/(kg·bw)经腹腔注射雄性大鼠,28 h后可以得到最优化肝损伤模型。本方法可为肝损伤新药研发和机理研究提供可靠的模型。

基于蛋白质芯片技术探究大黄酸通过精氨酸代谢抑制结直肠癌机制

大黄酸是从大黄、芦荟、何首乌等中提取的一种蒽醌类化合物,本研究通过蛋白质芯片技术筛选大黄酸潜在作用靶点,并探究其抑制结直肠癌的潜在机制。采用集落形成实验和划痕实验分别检测大黄酸对人HCT116细胞系增殖和迁移能力影响;利用蛋白质芯片技术筛选大黄酸靶向蛋白,对大黄酸特异性结合蛋白进行KEGG和蛋白互作分析;利用qRT-PCR和Western blot技术检测大黄酸对HCT116细胞中B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,BAX)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,BCL-2)和精氨基琥珀酸合成酶1(argininosuccinate synthetase 1,ASS1)表达水平影响;并通过氧化偶氮甲烷与葡聚糖硫酸钠(azoxymethane and dextran sodium sulfate,AOM/DSS)联合诱导的结直肠癌模型小鼠验证大黄酸的体内抗肿瘤效果,实验动物操作均按照动物福利和华南农业大学实验动物伦理委员会标准执行,并得到伦理委员会的批准。结果表明,大黄酸特异性结合蛋白主要参与氨基酸合成代谢,尤其是精氨酸合成代谢信号通路;并以浓度依赖性抑制HCT116细胞增殖和迁移。大黄酸作用HCT116细胞24 h后,显著增强BAX和ASS1表达,以及细胞一氧化氮水平;在结直肠癌小鼠模型中,大黄酸显著缓解AOM/DSS诱导的体重下降,降低便隐血评分,增强结肠肿瘤组织中BAX和ASS1的表达,并提高血清中精氨酸和一氧化氮含量;IHC和HE染色表明,大黄酸减轻AOM/DSS诱导的结直肠癌小鼠结肠组织中Ki67表达及巨噬细胞浸润,延缓肿瘤形成。综上,大黄酸可通过精氨酸关键限速酶ASS1,调节精氨酸和NO代谢,从而发挥抗肿瘤活性。

热应激麻鸡感染大肠杆菌后空肠TLR4-TBK1信号通路免疫因子变化研究

为了探索热应激麻鸡感染大肠杆菌后对空肠中TLR4-TBK1信号通路及相关免疫因子的影响,试验将24只雄性麻鸡随机均分为3组,即空白组、大肠杆菌组(E.coli组)和热应激+大肠杆菌组(HS+E.coli组)。HS+E.coli组麻鸡于41℃热应激12 h后恢复7 d,随后E.coli组和HS+E.coli组麻鸡均灌胃给予1×109 cfu/mL大肠杆菌O157:H71 mL,空白组麻鸡给予相同剂量的无菌生理盐水。于感染大肠杆菌后第4天处死麻鸡,取一段空肠进行病理组织学检查,并通过Western-blot法测定β干扰素(IFN-β)、γ干扰素(IFN-γ)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、热休克蛋白70(HSP70)、Toll样受体4(TLR4)和TANK结合激酶1(TBK1)等相关蛋白的表达情况。结果表明:E.coli组与空白组相比,大肠杆菌感染降低了空肠中绒毛高度并增加了隐窝深度,使空肠中IFN-β、IFN-γ、HMGB1、p-IRF3、TLR4蛋白水平极显著升高(P<0.01),IRF3(P<0.01)、HSP70(P<0.05)、TBK1(P<0.01)蛋白表达水平降低。而HS+E.coli组与E.coli组相比,热应激降低了空肠的隐窝深度,空肠中IFN-β(P<0.01)、IFN-γ(P<0.01)、p-IRF3(P<0.01)、TBK1(P<0.05)和TLR4(P<0.01)蛋白表达水平降低。说明热应激可以通过下调TLR4-TBK1信号通路相关免疫因子表达抑制大肠杆菌感染麻鸡空肠的免疫反应。