肇庆市2020年全人群风疹和百日咳抗体水平调查

目的:了解肇庆市全人群风疹、百日咳抗体水平,为控制相应疾病、改善免疫策略提供科学依据。方法:分层随机抽取肇庆市4个县区2020年全人群血清标本240份,用酶联免疫吸附试验定量检测风疹IgG抗体、百日咳IgG总抗体、百日咳PT-IgG抗体水平。比较风疹、百日咳抗体水平。结果:肇庆市2020年全人群风疹IgG抗体阳性率为74.58%,GMC为60.02 IU/mL;百日咳IgG总抗体阳性率为12.50%,GMC为22.43 IU/mL,百日咳PT-IgG抗体阳性率为0.83%,GMC为12.70 IU/mL。各县区人群风疹IgG抗体阳性率、百日咳IgG总抗体阳性率、百日咳PT-IgG抗体阳性率,差异无统计学意义(P>0.05)。风疹IgG抗体阳性率在不同年龄段比较,差异有统计学意义(P<0.05);人群百日咳IgG总抗体、百日咳PT-IgG抗体阳性率在不同年龄段比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肇庆市0~11个月龄组3个年龄段风疹IgG抗体阳性率比较,差异有统计学意义(χ^(2)=7.406,P<0.05)。结论:肇庆市全人群风疹抗体水平不高,百日咳抗体水平较低,应加强疫苗接种及免疫效果监测各项工作,采取针对性措施提高全人群防病水平。

保存液类型及56℃灭活前处理对呼吸道病毒荧光PCR检测结果的影响

目的:探讨保存液类型及56℃灭活前处理30~60 min对经磁珠法提取的呼吸道病毒荧光PCR检测结果的影响。方法:将灭活的呼吸道病毒作为质控品,分别以非灭活型病毒保存液和含胍盐的灭活型病毒保存液为基质,制备成两种不同保存液类型的中、低、较低浓度的临床模拟样本。分别在常温与56℃下对样本进行30~60 min的灭活前处理,然后统一采用核酸提取试剂盒(磁珠法)和呼吸道病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)对样本进行检测,并采用SPSS18.0软件分别对三个稀释梯度样本的ORF1ab、N基因Ct值进行统计学分析。结果:两种病毒保存液经磁珠法提取核酸,呼吸道病毒核酸检测的Ct值相比有统计学差异(ORF1ab基因:P<0.05,t=12.085;N基因:P<0.05,t=4.255),含胍盐的灭活型病毒保存液的Ct值比非灭活型病毒保存液靠前0.5~1.5 Ct。两种类型的病毒保存液在常温、56℃下进行30~60 min的灭活前处理后,呼吸道病毒核酸检测组内Ct值的随机区组方差分析无统计学意义(P>0.05)。结论:含胍盐的灭活型病毒保存液可提高经磁珠法提取的呼吸道病毒荧光PCR检测结果的灵敏度,56℃灭活前处理30~60 min未对经磁珠法提取的呼吸道病毒荧光PCR检测结果产生影响。

札如病毒实时荧光RT-PCR的建立与应用

目的建立一种可快速、全面、准确检测人感染札如病毒的Taq Man探针荧光实时RT-PCR方法。方法利用Bioedit2.0、MAGE6.0软件对可感染人的GⅠ、GⅡ、GⅣ、GⅤ基因群札如病毒进行保守序列比对,应用Primer6.0、Primer Express 3.0进行引物和Taq Man探针的设计与评价,分别设计了两套引物及Taq Man探针,克隆相应靶基因并构建阳性标准品,建立及优化一步法实时荧光RT-PCR反应体系,并进行灵敏度、特异度、临床标本验证试验。结果根据基因序列比对分析,札如病毒ORF1与ORF2连接区具有相对高保守序列,针对GⅠ、GⅡ、GⅣ及GⅤ设计了一条共用的下游引物、以及两套上游引物和Taq Man探针,能覆盖当前GenBank可见的感染人的札如病毒基因型,在同一反应管中建立了同时检测札如病毒四个基因群的实时荧光RT-PCR,并可将GⅤ与GⅠ、GⅡ、GⅣ进行初步分型,对人柯萨奇病毒、诺如病毒、轮状病毒、腺病毒等非靶标病原体无扩增,仅对札如病毒有特异扩增,最低检测下限为10拷贝/反应。结论本研究建立了札如病毒一步法实时荧光RT-PCR反应体系,可将GⅤ与GⅠ、GⅡ、GⅣ区分开来,为腹泻疫情防控和风险评估提供快速、准确的病原学依据。

广东省肇庆市2015—2018年禽类市场环境禽流感病毒监测

目的了解肇庆市2015—2018年禽类市场环境中禽流感病毒的动态分布情况,为肇庆市禽流感预警和防控工作提供参考依据。方法采集2015—2018年肇庆市9个县(市、区)的禽类市场环境标本,用实时荧光PCR法进行A型流感病毒(FluA)核酸检测,FluA阳性标本进行H5、H7、H9亚型流感病毒分型。结果共采集禽类市场环境标本4508份,其中FluA核酸阳性标本共1154份,总阳性检出率为25.60%;H5、H7、H9和A型未分型阳性检出率分别为5.72%、2.75%、17.48%和4.44%。FluA阳性检出率在肇庆市9个县(市、区)之间差异有统计学意义(P<0.05),其中阳性检出率最高是鼎湖区。FluA阳性检出率及其他亚型阳性检出率在1、2月份明显高于其他月份,冬春季为禽流感病毒的感染高峰期。FluA阳性检出率在5种类型监测标本之间差异具有统计学意义(P<0.05),其中宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本(简称案板)阳性检出率最高(33.04%),笼具表面擦拭标本(简称笼具)次之(27.22%)。结论肇庆市禽类市场环境中存在H5、H7、H9及多种亚型混合的致病性禽流感病毒潜在传播风险,尤其在冬春季,需结合人感染高致病性禽流感的流行状况,加强禽类从业人群的健康教育与禽类市场环境禽流感病毒监测,对人感染禽流感发生的预警和风险评估有重要意义。

2019年肇庆市鼠疫及其它鼠传传染病监测分析

目的对2019年肇庆市鼠疫及肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)、钩端螺旋体病(钩体病)、恙虫病等鼠传传染病流行情况进行监测,为广东省鼠疫及其它鼠传传染病防控策略的制定提供科学依据。方法系统收集2019年肇庆市高要区5个乡镇的鼠形动物和人间鼠疫及其它鼠传传染病流行资料,并统计2019年10—11月捕获的300只鼠形动物种类,计算鼠种构成比,解剖后分别进行病原学和血清学监测;同时随机选取身体健康的200人开展肾综合征出血热、钩端螺旋体和恙虫病东方体的IgM与IgG抗体水平监测。结果2019年肇庆市高要区各监测点捕获各种鼠形动物共300只,主要为褐家鼠、黑家鼠和黄田鼠,分别占65.34%、12.33%和17.67%。未检出阳性鼠疫F1抗体血清,健康人群肾综合征出血热、钩体病和恙虫病的IgM与IgG抗体均为阴性,鼠出血热抗体、肾综合征出血热、钩端螺旋体和恙虫病东方体阳性率分别为10.94%、12.67%、2.65%、0.67%(鼠耳)。结论2019年肇庆市虽未检出阳性鼠疫F1抗体血清,但鼠间存在肾综合征出血热、钩体病和恙虫病,说明有发生人间肾综合征出血热、钩体病和恙虫病的潜在危险,应加强开展监测和灭鼠工作。