癌相关CD8^+记忆T细胞在过继免疫治疗中的应用

针对癌症患者的过继免疫治疗是临床肿瘤治疗研究中的热点话题。癌症患者体内天然存在着能够对恶性肿瘤细胞进行识别、攻击和杀伤的癌相关CD8+记忆T细胞,它们具有对少量肿瘤细胞产生快速免疫应答和持续长期发挥抗癌作用的优点。癌相关CD8+记忆T细胞主要存在于骨髓中,如将骨髓中的这部分T细胞分离出来,并以特定手段激活并回输体内,将可发挥强大的免疫治疗作用。为了帮助临床癌症治疗研究者们更加清晰地认识癌相关CD8+记忆T细胞的生物学特性、肿瘤杀伤能力和临床治疗效果,并妥善处理实际应用过程中遇到的各种问题,本文对近年有关癌相关CD8+记忆T细胞在肿瘤免疫治疗中应用的研究进展加以介绍。

HER-2/neu与上皮性卵巢癌术后生存率相关性的Meta分析

目的以Meta分析的方法定量评估HER-2/neu基因扩增/或表达增强状态与上皮性卵巢癌患者手术后的中位生存期和5年生存率的关联性。方法检索、筛选1989年以来所有论述HER-2/neu状态与患者预后关系的中、英文回顾性研究文献。在Ludwig中心符号轶(Centered signed rank)和DerSimonian-Laird等方法基础上对各研究提供的生存数据进行统计分析。结果共纳入25篇文献,3251例患者。HER-2/neu表达率为27.1%[95%CI(0,54.8%)],与病理分期、分型和分级无关。HER-2/neu阳性者中位生存期平均减少0.65年,5年生存率下降[HR=1.22,95%CI(1.09,1.36)]。亚组分析显示,HER-2/neu蛋白表达与预后关系最明确,强阳性者5年内死亡风险增加,且对铂类化疗药物的反应性减低。结论在妇科肿瘤临床中,将HER-2/neu作为常规的病理指标使用,有助于进行合理的预后评估,并制定个体化化疗方案。

剖宫产切口瘢痕妊娠(CSP)子宫动脉栓塞(UAE)后宫腹腔镜联合手术和刮宫术的比较

目的为探索对剖宫产切口瘢痕妊娠(caeasrean scar pregnancy,CSP)更安全有效的治疗措施,本研究对子宫动脉栓塞(uterine artery embolization,UAF)宫腹腔镜联合手术与刮宫术进行比较。方法自2004年3月至2010年8月,从3个临床中心收集患者58例,分为研究组(MTX动脉内注射+UAE+宫腹腔镜联合手术)25例和对照组(MTX动脉内注射+UAE+刮宫术)33例。对两组患者的一般情况、单次手术清除率,术中并发症(大量出血、子宫破裂)、手术时间、住院时间和术后恢复情况进行统计学分析。结果研究组患者单次手术清除率为100%,术中平均出血量78.0mL。对照组除1例因子宫穿孔行全子宫切除外,其余经单次或多次刮宫术后获治,单次手术清除率为82%(P=0.024),平均累计出血量258.5mL(P=0.004),差异有统计学意义。住院时间方面,研究组平均为6.5天,对照组为8.7天,差异有统计学意义(P=0.043)。血β-hCG恢复正常时间方面,研究组平均为19.6天,对照组为29.3天,差异有统计学意义(P=0.033)。术后生活质量方面,研究组患者的下腹疼痛、术后阴道流血和月经恢复情况均显著优于对照组。结论作为CSP双侧UAE术后的一种后继治疗措施,宫腹腔镜联合手术安全有效。

热疗对胃癌细胞株化疗敏感性的影响

目的:探讨热疗时胃癌细胞株对紫杉醇(paclitaxel,TAX)敏感性的变化。方法:用对TAX敏感的胃癌细胞株MKN-45经浓度梯度递增法建立胃癌TAX耐药细胞株,命名为MKN-45/TAX。采用免疫细胞化学染色法检测MKN-45/TAX和MKN-45细胞中多药耐药相关基因(multi-drug resistance gene,MDR1)的表达;采用CCK-8法检测不同温度和不同TAX浓度作用下2种细胞的增殖抑制率;采用实时荧光定量–聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法、蛋白质印迹(Western blotting)法检测经靶向siRNA处理前后MDR1 mRNA和P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达。结果:成功建立MKN-45/TAX。MDR1在MKN-45/TAX中高表达而在MKN-45中低表达。随着紫杉醇浓度的增加,其对MKN-45及MKN-45/TAX的增殖抑制率增加;42℃时紫杉醇对MKN-45/TAX的增殖抑制率降低,而对MKN-45的增殖抑制率则升高。转染MDR1 siRNA后MDR1 mRNA和P-gp的表达水平均下降。结论:热疗联合化疗可增强耐药胃癌细胞株对TAX的耐药性,而增强敏感胃癌细胞株对TAX的敏感性,其机制可能与MDR1表达有关。

P16^(INK4A)和人乳头瘤病毒检测在液基细胞学筛查宫颈病变中的应用

目的:探讨P16INK4A和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)在宫颈癌早期及癌前病变中的表达及液基细胞学标本在P16INK4A检测中的应用。方法:选取8993名宫颈炎患者进行液基薄层细胞学检查,其中有64例呈不良反应,应用免疫组织化学S-P方法检测其P16INK4A表达,同时采用实时定量PCR法检测HPV表达。结果:P16INK4A在低度鳞状上皮内病变(LSIL)中的阳性率为28.6%,高度鳞状上皮内病变(HSIL)中的阳性率为81.8%,鳞状细胞癌(SCC)中的阳性率为100.0%。随着宫颈病变级别的上升,P16INK4A及HR-HPV阳性率均相应增高。结论:P16INK4A的表达与宫颈癌的发生、发展相关,并与宫颈病变分级及HPV感染高度相关,是筛查液基细胞学组织标本宫颈病变的一个有用指标。

口腔HPV携带者子宫颈病变的发病风险分析

目的通过人群调查，分析口腔HPV携带者中宫颈病变[包括宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌]的发病风险。方法选取2009年1月至2011年12月在上海地区3个临床中心（包括上海交通大学医学院附属仁济医院、上海市第一妇婴保健院和上海市奉贤区中心医院）诊治的1200例门诊患者（包括行年度体检和门诊就诊患者）和50例术前诊断为CINⅢ、宫颈癌的住院患者，以荧光定量PCR技术检测其口腔HPV感染情况。对其中1200例门诊患者进行横断面队列分析，比较口腔HPV阳性和阴性者之间宫颈病变发生率的差异，并分析口腔HPV感染患者的人口一行为学特征；另对1250例门诊和住院患者进行病例一对照分析，比较宫颈正常者与宫颈病变患者口腔HPV感染的差异，分析宫颈病变发病的主要危险因素。结果荧光定量PCR技术检测显示，1200例门诊患者中，口腔HPV阳性71例，占5．9％（71／1200）；50例住院患者中，口腔HPV阳性16例，占32．0％（16／50）。横断面队列分析显示，1200例门诊患者中，共发现宫颈病变患者（包括CINI和CINⅡ）18例，口腔HPV阳性（71例）和阴性（1129例）患者的宫颈病变发生率分别为4．2％（3／71）和1．3％（15／1129），两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；口腔HPV阳性者发生CINI和CINⅡ的相对危险度分别为2．9和4．0；口腔HPV阳性者口交频繁（包括口交频度为经常和一直者）及性伴侣数〉3个者显著多于口腔HPV阴性者（P〈0．01）。病例一对照分析显示，1250例门诊和住院患者中，宫颈正常者（1182例）口腔HPV阳性率为5．8％（68／1182），宫颈病变者（68例）口腔HPV阳性率为27．9％（19／68），其中CINI、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌患者口腔HPV阳性率分别为2／13、1／5、31．4％（11／35）和5／15，CINI、cINⅡ、CINⅢ、宫颈癌患者口腔HPV阳性率分剐与宫颈正常者比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。口腔HPV阳性者发生CINI、CINⅡ、CINⅡ和宫颈癌的比值比分别为3．1（95％CI：1．6～10．1）、4．2（95％凹：1．7～28．4）、7．1（95％CI4．8～19．8）和10．1（95％CI：3．2—32．1）。以多元logistie回归模型对宫颈病变者和宫颈正常者的人口一行为学特征分析表明，口交频繁、多个性伴侣是HPV口腔一宫颈共同感染及宫颈病变发病的高危因素。结论口腔和宫颈之间，HPV有复杂多样的传播方式，应对口腔HPV携带者的HPV相关性宫颈病变加以重视，并给予综合治疗。

GFP标记的GDNF重组腺病毒载体的构建和体内外表达

通过构建绿色荧光蛋白(GFP)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)共表达的腺病毒载体,讨论其在治疗脊髓和脑有关神经系统疾病的潜在应用价值,了解腺病毒载体在大鼠体内的分布及在体外分泌外源基因产物能力,并对其生物安全性作了初步考察,为GDNF重组腺病毒载体在临床和基础研究中的应用作了一定准备.

宫腹腔镜下瘢痕切除修补术与雌孕激素治疗剖宫产切口憩室效果比较

目的将宫腹腔镜下剖宫产切口瘢痕切除修补术治疗剖宫产切口憩室与雌孕激素周期治疗对比，探讨其临床价值。方法自2009年2月到2012年1月，收集至复旦大学附属妇产科医院就诊的剖宫产切口憩室患者145例，分别采用宫腹腔镜下剖宫产切口瘢痕切除修补术和雌孕激素周期治疗（分别设为研究组、对照组）。对患者治疗前后阴道出血、切口愈合等进行统计学分析。结果研究组患者术后切口愈合良好者占73．5％，每月阴道出血时间≤7d占38．8％，8～14d占51．0％，月经量减少至正常者占24．5％，超声提示切17完全愈合占73．5％，明显缩小占20．4％，无明显变化占6．1％。对照组治疗后每月阴道出血时间≤7d占8．5％，8—14d占44．7％，月经量减少至正常者占4．3％，切口缺损无明显变化。两组间各项差异有统计学意义（P〈0．01）。两组间下腹疼痛改善情况差异无统计学意义（P〉0．05）。结论宫腹腔镜下剖宫产切口瘢痕切除修补术的有效性和治疗彻底性均明显优于传统雌孕激素周期治疗，值得推广应用。

人乳头瘤病毒58型的系统地理学分析

人乳头瘤病毒58型(HPV58)是具有高度致癌危险性的HPV型别之一,在亚洲和非洲等地呈现出特殊的流行状况.由于全球HPV58数据分布零散,加之一些高发地区(如中国内地)数据缺乏,迄今为止尚未有对世界范围内HPV58地理分布的全面分析.本研究对中国内地妇女宫颈癌组织标本进行了HPV58检测,共获得14条HPV58-E6,L1基因序列.对GenBank收录的自1985年起分离的HPV58序列进行了系统地理学分析.结果表明,在上海、江苏和四川等地检出的HPV58-E6,L1序列均与以往来自中国香港、西安和日本等HPV58亚洲株同源.HPV58毒株可能由非洲西部起源,而中国内地及东南亚地区则在接受"根部"来源的变异株之后,成为毒株播散源"中转站"和新的策源地.HPV58型可能与HPV16,HPV18相同,也是宫颈癌发生和散播的主要HPV型别.

组织间Duffy抗原／趋化因子受体在大鼠静脉高压炎症反应中的作用及其机制

目的探讨组织间Duffy抗原／趋化因子受体（DARC）在下肢静脉高压炎症反应中的作用及其可能的机制。方法采用股动一静脉瘘建立大鼠后肢静脉高压模型，36只sD大鼠数字随机分为pcDNA3．1-DARC质粒组、pcDNA3．1空质粒组和对照组。术后14d和42d，采用实时定量聚合酶链反应（Real—PCR）和蛋白印迹（Westernblotting）检测组织间DARCmRNA和蛋白的表达；酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素（IL）一8的含量；TUNEL法和HE染色检测组织凋亡和白细胞浸润情况。结果随着静脉高压时间的延长，组织间DARC表达量、组织凋亡及白细胞浸润程度在pcDNA3．1-DARC质粒组和pcDNA3．1空质粒组均呈增加的趋势，同期各组间比较，pcDNA3．1-DARC质粒组明显高于pcDNA3．1空质粒组和对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；血清IL-8含量在pcDNA3．1-DARC质粒组和pcDNA3．1空质粒组均表现为降低的趋势，同期各组间比较，pcDNA3．L．DARC质粒组明显低于pcDNA3．1空质粒组，但两组均高于对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论组织间DARC表达与静脉高压组织的炎症程度呈正相关，可能通过加强白细胞的黏附和迁移促进静脉高压炎症反应的发展。

p16^INK4a在宫颈液基细胞学辅助筛查中的标记意义

目的评价p16^INK4a在宫颈液基细胞学检查中的标记意义。方法收集74例宫颈外口和颈管的脱落细胞标本，分别进行液基细胞学检测和p16^INK4a免疫细胞化学染色，并应用杂交捕获二代法检测高危人乳头瘤病毒（HR—HPV）感染。结果74例标本中，细胞学诊断未见癌细胞或癌前病变细胞（阴性）10例，意义不明的不典型鳞状细胞（ASC—US）15例，鳞状上皮内低度病变（LSIL）28例，不除外上皮内高度病变的不典型鳞状细胞（ASC—H）5例，鳞状上皮内高度病变（HSIL）11例，鳞状细胞癌（SCC）5例。各级别病变中，HR—HPV阳性者分别为1、4、3、9、7和5例，p16^INK4a免疫细胞化学染色阳性者分别为2、5、3、8、9和5例。随着宫颈病变级别的上升，HR—HPV和p16^INK4a免疫细胞化学染色阳性率均增高。结论p16^INK4a免疫细胞化学染色增强了对不典型细胞的区分能力，可以提高宫颈癌筛查的准确性。

GDNF提高端粒酶活性并且促进神经干细胞生长和分裂(英文)

对于多种神经细胞,胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)具有维持生长、存活、促进分化和成熟的作用.初次在神经干细胞中发现了GDNF的这一营养效应,但这种作用并不对神经干细胞的分化方向产生影响.进而通过测定神经干细胞的端粒酶活性和端粒酶活性的抑制实验,表明端粒酶活性的增高与GDNF对神经干细胞生长和分裂的促进作用有关,因此完善了GDNF在神经细胞中的信号传导和功能实现途径的理解.

卵巢黏液性癌表面黏液的分解及其对化疗药物作用的影响

目的探索分解卵巢黏液性癌表面黏液的方法及其对化疗药物泰素作用于人卵巢黏液性癌细胞株OMC685的影响。方法2007年4月至11月于复旦大学妇产科研究所运用免疫细胞化学法分析OMC685所分泌黏液中粘蛋白的类型,通过查阅文献筛选出适当的黏蛋白分解酶,用ELISA法证明黏液的分解,并于黏液分解后加用泰素,MTT法检测OMC685增殖的变化。选取人卵巢浆液性癌细胞株SKOV3加入含黏蛋白培养液后,再给予泰素,MTT法检测细胞增殖。结果OMC685表面所包绕黏液成分为黏蛋白2(mucin2)。α-N-内切乙酰半乳糖苷酶能够较特异地分解黏液。黏液分解后加用泰素对OMC685细胞增殖的抑制显著增强,而SKOV3加含粘蛋白的培养液后再加入泰素,对细胞增殖的抑制作用显著减弱。结论卵巢黏液性癌细胞分泌的黏液可能起到一定的屏障保护作用,通过使用分解酶分解黏液能够提高化疗药物泰素的作用效果。

人和小鼠神经干细胞的体外培养的分化研究

首次克隆了小鼠神经元标志性微管蛋白 βⅢ基因 ,从核苷酸序列推导出小鼠与人两者之间在其羧基端有相同的EAQGPK六肽 ,进一步证实用抗人微管蛋白 βⅢ单抗可检测小鼠神经干细胞分化成的神经元细胞 .免疫组化鉴定显示小鼠神经干细胞在体积分数为 1%胎牛血清 (FBS)诱导下 ,可分化成神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞 .同时培养了 13周龄胎儿脑来源的人类神经干细胞 ,用特异性的抗人nestin抗体鉴定 ,全部为阳性细胞 ,但是它们经诱导分化产生较不同寻常的细胞分化结果和分化程度 ,在生长因子减半和 1%FBS诱导条件下可分化为神经元和星形胶质细胞 ,而无少突胶质细胞分化 。