大黄及单体对金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用及作用机制研究

目的研究大黄及单体对金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用及作用机制。方法采用高效液相色谱仪分析不同溶剂萃取大黄及8种单体,采用抑菌试验检测大黄对3株金黄色葡萄球菌及8种单体对标准菌株的抑菌作用。采用微量倍比稀释法测定大黄对80株金黄色葡萄球菌及8种大黄单体对标准菌株的最小抑菌浓度(MIC)。采用全自动鉴定药敏仪对80株金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏试验,并测定标准菌株的生长曲线。采用酶标仪检测DNA、RNA等大分子物质的外渗水平。结果选择乙醇作为溶剂对大黄进行萃取,在8种单体中,大黄酚、大黄素等5种大黄单体提取率最高,其中大黄素对标准菌株抑菌效果最明显,平均抑菌圈直径为20 mm,MIC为0.025 mg/mL。大黄对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用较明显,抑菌圈直径为19 mm。大黄对80株金黄色葡萄球菌的MIC范围为16~128 mg/mL。40株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗菌药物中青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸的耐药率均为100.0%,40株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌抗菌药物中青霉素的耐药率(90.0%)最高。大黄对标准菌株金黄色葡萄球菌有抑菌作用,能够破坏金黄色葡萄球菌的细胞膜,导致菌体中DNA、RNA等大分子物质外渗。结论大黄及抑菌单体对金黄色葡萄球菌具有较好的抑菌作用,作用机制是通过破坏金黄色葡萄球菌的细胞膜,导致菌体中DNA、RNA等大分子物质外渗,发挥抗菌作用。

广东省清远地区鼠咬热1例

念珠状链杆菌(Streptobacillus moniliformis)主要寄居在野鼠、宠物鼠和健康实验大鼠等动物的鼻咽、中耳及气管上部等部位,对人类等有极强致病性。常呈多形性,如短杆状、丝状等,或可呈念珠状长链,最后分裂成球杆形。引起人感染的一般是鼠咬伤(鼠咬热)或污染的水或食物,表现为寒战、高热、呕吐、头痛、丘疹、关节疼痛,病死率为10%。

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的整合子分布及MLST分析

目的 收集该院临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),通过研究CRKPⅠ、Ⅱ、Ⅲ类整合子分布情况,碳青霉烯类耐药基因携带情况,以及多位点序列分型(MLST),了解CRKP的耐药情况与流行病学特征。方法 收集、保存临床送检标本中分离的CRKP 45株,采用BD phoenix M50全自动细菌鉴定仪进行药敏试验,并用质谱仪再次进行细菌鉴定。整合子及可变区测定采用PCR扩增,并对阳性菌株可变区进行测序分析及比对;采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM试验)进行表型确认,采用PCR扩增碳青霉烯类耐药基因,以及MLST方法分析其同源性。结果 45株CRKP中检测出Ⅰ类整合子阳性菌株共44株,未检出Ⅱ类及Ⅲ类整合子。有36株菌株成功扩增出可变区。检出3种耐药基因盒,分别为aadA2(34/36)、dfrA1(1/36)、aac(6′)-Ib-cr(1/36)。45株CRKP扩增耐药基因测序结果显示,44株检测到bla基因,未检出bla、bla、bla、bla、bla基因。45株CRKP的优势序列分型(ST)主要为ST11型(43株),其余为ST15型(2株)。结论 该院CRKP以Ⅰ类整合子为主,尚未发现Ⅱ类及Ⅲ类整合子,CRKP对碳青霉烯类药物耐药的主要机制是携带bla基因,应及时采取防控措施,防止CRKP在院内的克隆传播。

产ESBLs及非产ESBLs大肠埃希菌耐药性及多位点序列分型

目的对该院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)与非产ESBLs ECO耐药性及多位点序列分型(MLST)结果进行分析,为感染性疾病的治疗提供理论依据。方法收集89株非重复ECO,其中产ESBLs ECO 48株,非产ESBLs ECO 41株;采用BD phoenix M50全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定与药敏试验;89株ECO进行MLST分析,所得数据与数据库比对,获得对应等位基因序列分型(ST)。结果产ESBLs ECO耐药率显著高于非产ESBLs ECO(P<0.05);89株ECO共获得45种ST,其中产ESBLs ECO 24种,9株为ST131型,6株为ST1193型,其他型别散在分布。非产ESBLs ECO获得21种ST,其中7株为ST95型,4株为ST69型,其他型别散在分布。结论89株ECO中,产ESBLs ECO以ST131型和ST1193型为主,非产ESBLs ECO以ST95型、ST69型为主,产ESBLs和非产ESBLs ECO菌株之间存在明显ST差异;MLST对于流行病学研究具有重要意义。

临床分离CRKP耐药和毒力基因检测及分子进化分析

目的了解临床耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药和毒力基因携带情况,为临床防治提供依据。方法收集某院2020年3月—2021年3月临床标本分离的CRKP 36株,对菌株进行药敏鉴定,采用聚合酶链反应(PCR)扩增检测耐药基因、荚膜血清型基因、毒力基因,采用多位点序列分型(MLST)方法对菌株进行序列分型(ST分型),基于wzi测序结果进行血清型分型和分子进化分析。结果36株CRKP均检出bla_(KPC)基因,未检出bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(OXA-48)基因。黏液丝试验均为阴性,未检出K1、K2、K5、K20、K57五种常见荚膜血清型,36株CRKP rmp A2、wca G、ybt S、aerobactin、iut A、iro N、ycf、mrk D、mrk A、sil S、uge、P lvpk、fim H、wzi基因检出率为100%;Ter W为86.11%;fim A、mag A均为阴性。MLST结果分析显示,36株均为ST11型。仅32株成功测序wzi基因,wzi分型结果为K14.K6496.88%(31/32),K243.12%(1/32)。基于测序结果构建分子进化树,结果显示32株菌中31株100%同源,1株与浙江菌株KP1806999%同源。结论该院CRKP对碳青霉烯类耐药的主要机制是携带bla_(KPC)基因,优势ST分型为ST11,wzi分型以K14.K64为主,且携带了大量的毒力基因。分子进化树提示存在同源性感染,怀疑有输入性传播,应及时采取防控措施,防止耐碳青霉烯类高毒力肺炎克雷伯菌医院传播。

脑脊液中分离出1株奥斯陆莫拉菌

莫拉菌属包含20多种菌种,其中卡他莫拉菌、奥斯陆莫拉菌、林肯莫拉菌等是存在于人体呼吸道的正常菌群,较少引起人类感染。随着检出率的不断提升,本实验室于2019年7月在脑脊液中检出1株奥斯陆莫拉菌,该菌在脑脊液检出的报道国内未见,现报道如下。1临床资料患儿,女,3月。1个月前出现反复发热伴咳嗽,诊断为“1.化脓性脑膜炎2.社区获得性肺炎3.肝损害4.卵圆孔未闭5.胃肠功能紊乱”在本院住院治疗,1.1体格检查双肺呼吸音粗,双肺可闻及痰鸣音。

屎肠球菌耐药性与相关耐药基因研究

目的研究从临床感染者分离的屎肠球菌耐药性与耐药基因、整合子携带相关性,为屎肠球菌引起各种感染治疗提供依据。方法收集并保存广州医科大学附属第六医院临床送检标本中分离屎肠球菌30株,鉴定与药敏试验采用Vitek compact全自动细菌鉴定仪,同时用质谱仪复核,并采用聚合酶链式反应(PCR)及琼脂凝胶电泳方法对耐药基因及整合子进行检测。结果30株屎肠球菌分别来自尿液13株、胆汁5株、血液4株、腹腔引流物3株、伤口分泌物3株、腹水1株、皮肤分泌物1株。药敏结果显示,屎肠球菌对红霉素、左氧氟沙星耐药率为100%,对青霉素、阿莫西林/克拉维酸、氨苄青霉素、阿莫西林耐药率分别为93.33%、90.00%、90.00%、86.67%,对高水平庆大霉素、四环素耐药率分别为46.67%、40.00%,对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁表现为全敏感。耐药基因检测阳性率从高到低分别为:qacE△1-sull阳性率73.33%、aac(6')/aph(2')阳性率40.00%、aph(3')阳性率63.33%、ant(6)-I阳性率53.33%、tet M阳性率43.33%、erm B、vanA、vanB均为阴性,未检出Ⅰ类整合子。结论屎肠球菌耐药性与耐药基因携带呈一定相关性,未检出Ⅰ类整合子,可能与地区分布差异有关。

尿路感染粪肠球菌耐药性与耐药基因相关性研究

目的对临床尿液标本中分离的粪肠球菌进行耐药基因与细菌耐药性分析,为粪肠球菌感染提供防治依据。方法对我院临床送检尿液标本中的粪肠球菌38株进行药敏分析,对Ⅰ类整合酶基因以及耐药基因(qacE△1-sull基因、tetM、ermB、aac(6′)/aph(2″)、aph3′Ⅲ、ant(6)Ⅰ、VanA、VanB)进行检测,阳性标本PCR产物进行测序分析及比对,并对耐药基因携带情况与耐药表型进行分析。结果38株粪肠球菌对12种抗生素耐药率从高到低为:红霉素(100%,38/38)、四环素(94.74%,36/38)、环丙沙星(47.37%,18/38)、左氧氟沙星(47.37%,18/38)、莫西沙星(44.74%,17/38)、高水平庆大霉素协同(31.58%,12/38)、呋喃妥因(5.26%,2/38)、氨苄青霉素(5.26%,2/38)、青霉素(5.26%,2/38)、利奈唑胺(2.63%,1/38)、万古霉素(0%)、替考拉宁(0%);耐药基因阳性率从高到低:tetM为92.11%(35/38)、qacE△1-sull为78.95%(31/38)、aph3′Ⅲ为71.05%(27/38)、aac(6′)/aph(2″)为44.74%(17/38)、ant(6)Ⅰ为34.21%(13/38),未检测出ermB基因、VanA基因、VanB基因和Ⅰ类整合子酶基因。结论粪肠球菌对临床常用药物具有不同程度耐药,多药耐药性与耐药基因携带有一定相关性,未检测到Ⅰ类整合子阳性菌株,可能与区域差异有关。