幽门螺杆菌CagA对胃黏膜Runx3抑制作用的分子机制探讨

目的分析幽门螺杆菌分泌的细胞毒素相关蛋白A(CagA)对胃黏膜Runx3抑制作用的分子机制。方法构建CagA表达载体pWT-CagA,突变载体PR-CagA(B-)、PR-Cag(D-),利用上述载体及空白载体转染人胃黏膜上皮永生化细胞GES-1,分别标记为pWT-CagA质粒组、PR-CagA(B-)质粒组、5 PR-CagA(D-)质粒组、空载体组,另设空白对照组。采用免疫印迹方法检测Runx3蛋白表达水平。应用BAY11-7082、PP1、PD98059、SB203580预孵育GES-1细胞,再利用pWT-CagA质粒及空转染质粒转染GES-1细胞,探讨CagA对Runx3表达影响的分子机制。结果pWT-CagA转染后,GES-1细胞Runx3蛋白表达量明显低于空白对照组、空转染组及PR-CagA(B-)转染组、PR-Cag(D-)转染组。应用PP1、PD98059、SB203580预孵育GES-1细胞后,pWT-CagA组和空载体组Runx3表达水平对比,差异无统计学意义(P>0.05)。应用BAY11-7082预孵育GES-1细胞后,pWT-CagA组Runx3表达水平仍明显低于空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论幽门螺杆菌CagA能够抑制胃黏膜Runx3的表达,且这种抑制作用可能与MAPK/MEK/ERK信号通路有关。