病毒性肝炎的实验室检测及其临床意义

病毒性肝炎目前公认的有甲、乙、丙、丁和戊五种类型.临床上对病毒性肝炎的诊断以及其临床意义的分析,取决于实验室检测的结果,主要包括免疫学和分子生物学两方面的检测.现将病毒性肝炎的实验室检测及其临床意义分述如下.

浙江省部分人群风疹抗体的测定

风疹病毒的重要生物学特性之一是其对一日令鸡、鸽、鹅、日本鹌鸪、羊、鸭、公鸡及人O型等红细细在4℃或25℃具有凝集作用。本文报道应用血凝抑制试验来测定杭州地区及乐清山区部分人群的风疹抗体水平,特别是了解生育期妇女的风疹免疫状态,从而提出切合我国实际情况的风疹免疫方案。

复方黄芪治疗慢性乙型肝炎的临床及实验研究

用复方黄芪治疗慢性迁延性肝炎８７例和慢性活动性肝炎２９例，临床显效率分别为６９．０％和５５．２％，总有效率分别为９０．８％和８９．７％；血清ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ－ＤＮＡ阴转率分别为２７．７％和２８．０％，均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５～０．０１）。治疗鸭乙型肝炎模型８只，血清ＤＨＢＶ－ＤＮＡ阴转３只，ＤＨＢＶ－ＤＮＡ平均水平治后比治前明显下降（Ｐ＜０．０５）；鸭肝组织呈轻度炎症改变者３只，病变比对照组轻，原位杂交ＤＨＢＶ－ＤＮＡ定位２只鸭阴性。结果显示，复方黄芪具有较好保肝和一定的抑制ＨＢＶ复制作用。

日本血吸虫病宿主肿瘤坏死因子活性的研究

采用L929细胞杀伤法,对晚期日本血吸虫病(晚血)患者和感染日本血吸虫尾蚴8wk、16wk及杀虫后8wk的新西兰兔,进行了外周血单核细胞(PBMC)的肿瘤坏死因子(TNF)诱生能力和血清TNF活性测定。晚血患者PBMC的TNF诱生能力明显低于正常人,而血清中TNF活性明显增高(P<0.01)。感染8wk和16wk兔PBMC的TNF诱生能力较正常兔显著增高,尤以感染8wk时为甚,血清TNF活性亦相应增高(P<0.01);在杀虫治疗后8wk,其PBMC的TNF诱生能力和血清TNF活性均降至正常。晚血患者血清TNF活性的增高可能参与肝纤维化过程。

鸭乙型肝炎动物模型的建立和DHBV在肝脏的定位研究

本文利用ＤＨＢＶ阳性血清感染１日龄雏鸭，感染后２、４、８周以血清斑点杂交和Ｄｏｔ－ＥＩＡ检测鸭血清中的ＤＨＢＶ－ＤＮＡ和ＤＨＢｓＡｇ，其阳性率分别为５６．３％、６５．６％、７４．２％和５３．１％、７１．９％、７０．９％。进一步采用原位杂交和免疫组化对鸭肝组织内ＤＨＢＶ－ＤＮＡ和ＤＨＢｓＡｇ进行检测，结果表明ＤＨＢＶ－ＤＮＡ主要存在于细胞浆中，而ＤＨＢｓＡｇ主要分布于细胞浆及细胞膜。对肝组织的病理检查及胶原纤维特殊检测发现，ＤＨＢＶ阳性组与阴性组无明显差别。

表达HSV－2 gD基因的重组痘苗病毒保护小鼠对抗致死量HSV病霉攻击

利用ＰＣＲ方法对单纯疱疹病毒Ⅱ型糖蛋白Ｄ（ＨＳＶ－２ｇＤ）基因进行了修饰，在其５＇端删去约５００ｂｐ的非编码区，仅保留ＡＴＧ上游７个ｂｐ。将修饰后的ＨＳＶ－２ｇＤ基因插入到带有痘苗病毒天坛株ＴＫ基因区段的痘苗表达质粒ｐＪＳＡ１１７５，置于痘苗病毒Ｐ７．５ｋ早／晚期启动子控制下。将此重组质粒用脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法转染已受野型ＴＫ￣＋痘苗病毒天坛株感染的ＴＫ￣－１４３细胞，通过同源重组机制和标志基因ＬａｃＺ产物的蓝斑显色作用，以及ＢｕｄＲ试剂对ＴＫ表型的选择压力，筛选出整合有ＨＳＶ－２ｇＤ基因的重组痘苗病毒。Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交表明，ＨＳＶ－２ｇＤ基因已正确地插入痘苗病毒ＴＫ基因区内；间接免疫荧光检测显示，ＨＳＶ－２ｇＤ蛋白已得到有效表达，且主要分布于细胞膜。重组病毒免疫家兔可产生明显的抗ＨＳＶ－２ｇＤ中和抗体。用重组病毒免疫小鼠，３周后可使９４％（１７／１８）的小鼠对抗ＨＳＶ－２的致死量攻击，表明重组病毒具有明显的免疫保护作用。

HBeAg阳性母亲流产胎儿肝及肝外脏器HBV标志的检测

应用免疫金银染色法和原位核酸杂交技术同步检测9例HBsAg和HBeAg均阳性母亲流产胎儿的肝、胸腺、脾、胰中的HBsAg、HBcAg和HBV-DNA.结果,在肝(5例)、胸腺(1例)、脾(3例)、胰(2例)中测出HBsAg及HBV-DNA.其中2例胎肝细胞并呈HBcAg阳性,但在胸腺、脾、胰中未检出HBcAg.HBsAg分布主要为胞浆型,也见有膜型;HBV-DNA及HBcAg主要分布于胞浆内,偶见于核内.此种分布特点,提示HBV处于复制相.在肝脏中,HBsAg、HBcAg及HBV-DNA除见于胞浆外,还见于造血灶中造血细胞内.上述结果表明,HBV已感染胎儿肝脏、胸腺、脾脏、胰腺以及肝内造血细胞.

丙型肝炎病毒DNA核酸免疫的初步探讨

目的：探索ＨＣＶＤＮＡ核酸免疫效应。方法：将构建的重组体ｐＣＤＨＣＶｓ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，用ＥＬＩＳＡ和３ＨＴｄＲ掺入法检测了免疫鼠血清抗体、脾细胞和ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原的增殖反应。结果：重组体ｐＣＤＨＣＶ１、ｐＣＤＨＣＶ２和ｐＣＤＨＣＶ３均可诱导小鼠（ｎ＝６）产生抗体（０．６６５～０．７０７，ＯＤ值）和脾细胞对ＨＣＶ抗原增殖反应（ｎ＝６，ＳＩ为３．８９～４．４７），但各重组体间的免疫效应无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；免疫鼠（ｎ＝１２）血清经４０倍和３２０倍稀释后，抗体阳性率分别为１００．０％和１６．６％；重组体还可诱导鼠ＰＢＭＣ对ＨＣＶ抗原的增殖反应（３．６９～４．０７，ＳＩ）。结论：ｐＣＤＨＣＶｓ重组体可诱导小鼠产生免疫反应，该结果对进一步开展ＨＣＶＤＮＡ疫苗研制将具有重要意义。

原发性肝细胞癌患者癌细胞及癌旁组织中HBV-DNA及HBV抗原的定位研究

应用原位核酸杂交技术和免疫金银染色法分别检测42名原发性肝癌(PHC)患者肝癌及癌旁组织中的HBV-DNA 和 HB 抗原。结果:28例(66.7%)癌旁组织中 HBV-DNA 阳性,其中17例癌组织中也阳性.免疫组化结果显示 HBsAg 阳性者24例、HBcAg 阳性者6例,均见于癌旁组织。提示本组病例 HBV 感染是 PHC 的主要病因之一。本文部分 PHC 患者癌旁组织中仍有活跃的病毒复制,但癌组织中却未见表达相应抗原,推测 HBV 与机体长期作用后,部分病毒通过某种机制从免疫反应中逃逸并整合进入肝细胞基因组中,诱发恶变,可能是 PHC 的主要发病机制之一。

解脲脲原体感染的研究进展

解脲脲原体是非淋球菌尿道炎的主要病原体之一。近年来研究证实,它还与人体多种疾病的发生有关。本文着重介绍解脲脲原体在几种常见疾病中致病方面的研究进展。

慢性乙型肝炎患者T细胞功能的研究

本文以31例慢性乙型肝炎患者为研究对象,用CD系列单克隆抗体检测了患者外周T细胞亚群分型,观察ConA诱导的白细胞介素-2分泌功能,以及非特异性T细胞抑制功能(Ts)对B细胞抗体分泌的影响。结果表明,慢性乙肝患者体内存在T细胞免疫功能的异常,其外周血CD_4^+细胞比例低下,CD^+细胞比例增高,导致CD_4/CD_3比值下降,这种变化与HBV复制活跃的指标HBsAg^+密切相关。因此血清HBeAg^+是反映患者外周血T细胞亚群变化较敏感的指标。此外慢性乙肝患者T细胞产生IL-2的功能明显障碍,同时伴有ConA诱导的Ts功能低下,这种功能的异常与外周血CD_4^+与CD_8^+细胞亚群的变化无明显的统计相关性。

内毒素致病机理研究进展

内毒素血症与内毒素性休克是临床常见的顽症。目前认为内毒素引起的病理生理学改变是通过其诱导的一系列炎症介质和细胞因子所介导。新的研究表明,针对这些生物活性物质的拮抗剂在一定程度上能减轻内毒素的毒性作用。这不仅对探讨内毒素的致病机理大有裨益,而且为临床上治疗内毒素有关疾患提供了理论依据。本文着重介绍这些物质的生物活性以及与内毒素致病机理的相互关系。

肿瘤坏死因子与细菌感染的相互关系(综述)

机体对细菌感染的直接反应之一是产生各种细胞因子,其中肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor, TNF)是最主要的一种.已知,适量的TNF在细菌感染中起保护机体作用;但过量的TNF则是介导细菌感染所致一系列病理生理学变化的主要媒介因子.有关TNF与细菌感染相互关系的研究近来受到了普遍重视,现将这方面研究的最新进展综述于下.

H_(33342)释放法检测NK细胞和单核细胞的杀伤活性

本文采用DNA特异性荧光染料Hoechst dye No 33342(H33342)标记肿瘤细胞技术,建立了自动微量荧光分析法,检测NK细胞和单核细胞介导的杀伤效应。结果表明,损伤的靶细胞其DNA断裂后释放到上清液中,采用微量荧光仪可定量测定上清液中的荧光强度。效应细胞的杀伤活性与靶细胞释放的荧光强度呈正相关性。此外,该法的检测敏感性与经典的^(51)Cr释放法基本相似,是检测细胞杀伤活性的一种新型方法。

婴儿母传麻疹抗体的动态观察及对麻疹疫苗的免疫应答

检测142对母、婴血清中的麻疹血凝抑制抗体(HI),结果有19对母、婴抗体均为阴性,7例低滴度(≤1∶4)抗体母亲的婴儿抗体也为阴性,麻疹抗体的阴性率母亲为13.4%,刚出生的婴儿为18.3%,抗体几何均值(GMT)分别为8.3和6.5.婴儿在3、5、7及8月龄时抗体累积阴性率分别为51.0%、78.1%、97.8%及100%.对母传麻疹抗体消失的14例3月龄、39例5月龄及21例7月龄婴儿进行沪_(191)麻疹减毒活疫苗接种,免疫1月后的抗体阳转率分别为57.2%、97.5%及100%.抗体GMT为12.34、18.89和22.23,在有麻疹患者的地区可考虑将免疫年龄提前到6月龄.

儿童对乙肝疫苗再免效果的观察

乙肝(HB)疫苗初免研究表明,初免后抗-HBs水平会随时间逐渐下降,甚至低于检测水平。当抗—HBs水平降至10IU/L(即抗-HBs抵抗HBV感染最低有效保护水平)时,HBV感染的危险性及感染率就会相对增加。因此,随着HB疫苗的推广应用。

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备

作者用提纯的解脲脲原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得3株稳定分泌抗解脲脲原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株进行了鉴定。用ELISA法测定该抗体腹水效价为1:64000～1:2048000,1F9、2B2抗体的Ig类型为IgG1,5H1为IgG2b。建立的3株能稳定分泌抗解脲脲原体的McAb杂交瘤细胞林,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。

杭州地区HCV感染患者基因分型初步调查

研究资料表明，我国为丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染高发区，且ＨＣＶ基因型、病毒感染量等与丙型肝炎（ＨＣ）治疗有关。为此，作者对杭州地区ＨＣＶ感染病人的基因型作了初步调查，以便了解本地区ＨＣＶ感染主要流行株，并为其临床治疗提供参考。１材料与方法１．１研究对...

肿瘤坏死因子在感染性疾病诊断和治疗中的应用

肿瘤坏死因子是一种主要由单核巨噬细胞分泌的多肽调节因子,既参与机体的抗感染防御,又是感染性疾病发病的重要介质.本文着重介绍肿瘤坏死因子的抗感染作用,在感染性疾病发病机理中的意义及其在感染性疾病诊断和治疗中的应用前景。

乙型肝炎疫苗的加强接种

乙型肝炎(HB)疫苗的免疫保护作用已经充分肯定,但疫苗的保护作用能持续多久,何时应进行加强接种,加强接种的剂量及加强接种的效果如何,都是有待解决的问题.下面就这方面的研究作一概述.