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pVAX1-IL-4/SYN-B融合质粒的构建及表达 被引量:8
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作者 何卿玮 王加才 +1 位作者 彭国光 王法祥 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期588-590,595,共4页
目的构建含人白介素4(human IL-4,hIL-4)基因与人α-突触核蛋白(humanα-synuclein,hα-syn)B细胞表位基因的真核表达质粒,并研究其在COS-7细胞内的表达。方法RT-PCR扩增人IL-4基因后,通过基因重组技术将其与α-synuclein蛋白B细胞表位... 目的构建含人白介素4(human IL-4,hIL-4)基因与人α-突触核蛋白(humanα-synuclein,hα-syn)B细胞表位基因的真核表达质粒,并研究其在COS-7细胞内的表达。方法RT-PCR扩增人IL-4基因后,通过基因重组技术将其与α-synuclein蛋白B细胞表位基因融合,在两者之间引入柔性短肽(GSGGGSG)。将融合产物克隆到真核表达载体PVAX1上,利用电泳和测序鉴定融合质粒的大小、方向和序列。采用脂质体转染法,将融合质粒转入COS-7细胞中,用Western blotting技术检测其表达。结果电泳和测序结果与预期一致,并命名为PVAX1-IL-4/SYN-B;质粒转染COS-7细胞株成功,并且能在细胞内高效表达。结论成功构建PVAX1-IL-4/SYN-B融合质粒,并在哺乳动物COS-7细胞中高效表达,为研究融合质粒在帕金森病动物模型中的免疫效果奠定了基础。 展开更多
关键词 人α-突触核蛋白 融合质粒 帕金森病
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优化核酸疫苗对帕金森模型小鼠黑质COX-2表达的影响 被引量:6
2
作者 赵臣勇 何卿玮 +4 位作者 王发祥 万金城 周长青 彭国光 张江伟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期244-248,共5页
目的探讨预防性注射优化hα-syn核酸疫苗对遭受急性神经毒素损害的多巴胺能神经元的作用。方法制备优化hα-syn质粒疫苗pVAX1-IL-4/SYN-B。根据分组对C57BL小鼠双侧后肢胫骨前肌进行注射,pVAX1-IL-4/SYN-B质粒组给予α-syn核酸疫苗、pV... 目的探讨预防性注射优化hα-syn核酸疫苗对遭受急性神经毒素损害的多巴胺能神经元的作用。方法制备优化hα-syn质粒疫苗pVAX1-IL-4/SYN-B。根据分组对C57BL小鼠双侧后肢胫骨前肌进行注射,pVAX1-IL-4/SYN-B质粒组给予α-syn核酸疫苗、pVAX1空质粒组给予空载体、PBS组给予PBS各50μl,共3次。末次注射2周后,各组小鼠均经腹腔注射MPTP(20mg/kg)制备帕金森病(PD)模型,间隔2h注射1次,共4次。在模型制备过程中观察小鼠行为学变化,评价PD模型是否制备成功。于末次MPTP注射后1、3、7d处死小鼠(n=6)。采用RT-PCR法检测不同时间点小鼠中脑黑质炎症因子COX-2 mRNA的表达,免疫组化法检测黑质COX-2和CD11b(反映小胶质细胞激活状态)的表达变化。结果各组小鼠PD模型制作成功。与pVAX1空载体组、PBS组相比,pVAX1-IL-4/SYN-B质粒组黑质区COX-2及CD11b阳性细胞明显减少(P<0.05),而前两组比较无显著差异(P>0.05)。RT-PCR检测显示,在MPTP末次注射后1、3、7d,COX-2 mRNA在各组均有表达,1d表达微弱,3d达高峰,7d各组表达均降低。同一时间点,pVAX1-IL-4/SYN-B质粒组的COX-2 mRNA表达(1、3、7d分别为0.28±0.07、0.59±0.07、0.45±0.05)与pVAX1空质粒组(1、3、7d分别为0.43±0.05、0.74±0.15、0.61±0.10)、PBS组(1、3、7d分别为0.41±0.02、0.73±0.13、0.60±0.01)相比显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),后两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论优化hα-syn核酸疫苗预防注射能对抗炎症因子COX-2表达、抑制小胶质细胞激活,对多巴胺神经细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 疫苗 DNA 环氧化酶2 Α突触核蛋白
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空肠营养在急性重症胰腺炎治疗中的效果评估 被引量:5
3
作者 莫波 何卿玮 +5 位作者 王云侠 秦建平 蒋明德 李晓静 刘琴 周娟 《西南国防医药》 CAS 2014年第5期489-491,共3页
目的评估在急性重症胰腺炎的治疗中应用空肠营养的效果。方法选择2001年12月~2008年12月收治的急性重症胰腺炎患者共31例为对照组,给予常规治疗;选择2008年12月~2013年12月收治的急性重症胰腺炎的患者共31例作为观察组,在常规治疗基... 目的评估在急性重症胰腺炎的治疗中应用空肠营养的效果。方法选择2001年12月~2008年12月收治的急性重症胰腺炎患者共31例为对照组,给予常规治疗;选择2008年12月~2013年12月收治的急性重症胰腺炎的患者共31例作为观察组,在常规治疗基础上加用空肠营养,比较两组治疗过程中的营养指标等好转情况以及不良反应的发生情况。结果经治疗2 w后,两组营养指标均有所好转,但观察组的好转情况明显优于对照组(P〈0.05),且观察组的胃肠道功能、血淀粉酶、尿淀粉酶恢复至正常的时间以及住院总时间明显短于对照组(P〈0.05)。两组治疗过程中均无明显严重并发症发生,所有患者均痊愈出院。结论空肠营养治疗急性重症胰腺炎的安全性好,操作难度小,所需营养液的配制简单,可有效增加患者症状改善速度,明显缩短住院时间,减少医疗费用,患者易于接受,值得临床推广。 展开更多
关键词 空肠营养 急性重症胰腺炎 肠外营养 效果
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优化hα-syn基因疫苗预防注射对MPTP急性帕金森病小鼠的神经保护作用 被引量:4
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作者 王法祥 彭国光 +2 位作者 王加才 王少君 何卿玮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第18期1761-1765,共5页
目的探讨预防注射优化hα-syn基因疫苗对多巴胺神经元在遭受急性神经毒素损害时的保护作用。方法在小鼠双侧后肢胫骨前肌部位分别注射优化基因疫苗、空重组质粒或PBS各50μl,共3次。末次注射3周后,优化基因疫苗组皮下注射MPTP30mg/kg,... 目的探讨预防注射优化hα-syn基因疫苗对多巴胺神经元在遭受急性神经毒素损害时的保护作用。方法在小鼠双侧后肢胫骨前肌部位分别注射优化基因疫苗、空重组质粒或PBS各50μl,共3次。末次注射3周后,优化基因疫苗组皮下注射MPTP30mg/kg,对照组用等容量的PBS背部皮下注射,每日1次,连续5d。最后1次模型注射后,观察行为学和病理生理改变。结果优化基因疫苗组小鼠的爬杆分数与空重组质粒组比较明显减少(P<0.05),与PBS对照组比较,爬杆分数增多,但差异无统计学意义(P>0.05)。优化基因疫苗组与空重组质粒组相比,黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数明显增多,凋亡细胞数明显减少(P<0.05),α-突触核蛋白表达略减少(P>0.05)。空重组质粒组与PBS对照组相比,黑质区酪氨酸羟化酶阳性细胞数明显减少,凋亡细胞明显增多(P<0.05),α-突触核蛋白表达明显增多(P<0.05)。结论优化hα-syn基因疫苗预防注射能够较好的防止神经毒素对黑质多巴胺细胞的损害,对多巴胺神经细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 免疫预防 基因疫苗 MPTP
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胰腺脓肿压迫脾静脉致区域性门静脉高压1例报告 被引量:3
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作者 汤善宏 何卿玮 +5 位作者 何乾文 梁燕 周晓蕾 李红永 曾维政 蒋明德 《临床肝胆病杂志》 CAS 2015年第5期773-774,共2页
1 病例资料 患者男性,43岁,主因“腹痛、气紧、乏力2个月余”入院。病史:患者缘于20余天前无明显诱因出现中上腹隐痛于外院住院治疗,诊断为“急性胰腺炎、高血压、糖尿病”,给予相应治疗(具体不详),之后出现间断发热,经抗... 1 病例资料 患者男性,43岁,主因“腹痛、气紧、乏力2个月余”入院。病史:患者缘于20余天前无明显诱因出现中上腹隐痛于外院住院治疗,诊断为“急性胰腺炎、高血压、糖尿病”,给予相应治疗(具体不详),之后出现间断发热,经抗生素及对症治疗后好转,12 d 后患者出现高热,最高达39.7℃,自觉气促、心跳加快,磁共振胰胆管造影提示胆囊增大,遂转入本院治疗。入院后给予泰能抗感染、胆囊穿刺引流、胸腹腔穿刺引流,对症及支持治疗后上述症状有所好转,后自行要求出院。出院后,仍间断发热、腹痛,遂再次入院。查体:神清,精神差,腹部膨隆,中上腹、左上腹及中下腹可见3条引流管,腹软,全腹无压痛、反跳痛及肌紧张,肝脾肋下未及,肝脾肾区无叩痛,肠鸣音约3次/min,移动性浊音阴性,双下肢无水肿。查血常规示:白细胞计数8.44×109/L,红细胞计数2.98×1012/L↓,血红蛋白浓度84 g/L↓,中性粒细胞比率81.51%↑;血生化:肌酐41.30μmol/L↓,葡萄糖7.21 mmol/L↑,GGT 126.00 U /L↑,ALP 197.10 U /L↑,降钙素原<0.05 ng/ml;尿常规:隐血(+)↑。余肝肾功能、电解质未见异常。查腹部 CT 示:急性坏死性胰腺炎治疗后改变,腹腔积液引流术后,胰腺体见一5.7 cm ×2.7 cm 大小脓肿,邻近脾静脉、门静脉主干,肠系膜上静脉上段稍显狭窄,周围结构显示不清,侧枝血管形成,食管胃底静脉曲张(图1)。胃镜检查示:胃底见团块状静脉曲张,无红色征;胃底、胃体广泛黏膜肿胀,诊断为:(1)胃底重度静脉曲张(无红色征);(2)门静脉高压性胃病(图2)。 展开更多
关键词 胰腺脓肿 脾静脉 高血压 门静脉 病例报告
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优化人alpha-syn基因疫苗免疫MPTP慢性PD小鼠的神经保护作用 被引量:2
6
作者 王法祥 彭国光 +2 位作者 王加才 王少君 何卿玮 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2009年第20期2125-2128,共4页
目的:探讨优化高分泌型人α-突触核蛋白(human alpha—synuclein,ha—syn)基因疫苗免疫MPTP慢性帕金森病小鼠的治疗效果和神经免疫保护作用.方法:建立慢性PD小鼠模型,采用神经毒素MPTP25mg/(kg·d),2次/wk,累计共10次... 目的:探讨优化高分泌型人α-突触核蛋白(human alpha—synuclein,ha—syn)基因疫苗免疫MPTP慢性帕金森病小鼠的治疗效果和神经免疫保护作用.方法:建立慢性PD小鼠模型,采用神经毒素MPTP25mg/(kg·d),2次/wk,累计共10次.建模后随机分为3组:优化基因疫苗组、疫苗组、PBS对照组;每次治疗前,每只动物分别在双侧后肢胫骨前肌部位注射5g/L布比卡因50μL,注射72h后,3组动物分别于同部位同深度注射优化基因疫苗、基因疫苗或PBS各50μL,1次/3wk,共3次.末次免疫后2wk观察行为学改变后,处死取脑.运用免疫荧光、免疫组化等方法观察酪氨酸羟化酶阳性细胞数,以及α-syn表达变化.结果:优化基因疫苗组、疫苗组小鼠爬杆能力与PBS对照组比较都得到明显改善,有统计学差异(P〈0.05);但优化基因疫苗组与疫苗组行为学评分间差异无统计学意义.优化基因疫苗组酪氨酸羟化酶阳性细胞数与其它两组相比增多约20%-68%(P〈0.05),α-syn表达减少约15%~45%(P〈0.05).结论:优化基因疫苗具有较强改善帕金森小鼠行为学的作用,能增强疫苗的免疫原性,促进受损黑质细胞修复,对帕金森病小鼠有更好的免疫治疗作用. 展开更多
关键词 帕金森病 MPTP 基因疫苗 免疫保护 alpha-突触核蛋白
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超声引导经皮置管引流治疗急性胰腺炎的疗效分析 被引量:3
7
作者 莫波 何卿玮 +5 位作者 王云侠 秦建平 蒋明德 李晓静 刘琴 周娟 《西南军医》 2014年第6期620-622,共3页
目的比较超声引导经皮置管引流与常规保守方法治疗急性胰腺炎的疗效。方法早期急性胰腺炎患者104例,分为观察组和对照组各52例。观察组采用超声引导经皮置管引流治疗,对照组给予常规保守治疗。治疗结束后对两组的临床疗效进行比较。结... 目的比较超声引导经皮置管引流与常规保守方法治疗急性胰腺炎的疗效。方法早期急性胰腺炎患者104例,分为观察组和对照组各52例。观察组采用超声引导经皮置管引流治疗,对照组给予常规保守治疗。治疗结束后对两组的临床疗效进行比较。结果观察组患者中败血症、ARDS、MODS等并发症发生率、中转手术率及死亡率明显低于对照组,观察组患者体温恢复时间、血清CRP恢复时间、积液消失时间及住院总天数均少于对照组。结论采用超声引导经皮置管引流治疗急性胰腺炎有利于胰腺、胰周积聚液体的清除,效果明显好于对照组,且安全性好。 展开更多
关键词 超声引导 经皮穿刺引流 急性胰腺炎 保守治疗
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金属钛夹与药物注射治疗Dieulafoy溃疡伴活动性出血的疗效观察 被引量:3
8
作者 刘琴 陈虹彬 +3 位作者 何卿玮 杜超 秦建平 徐辉 《西南军医》 2015年第4期369-372,共4页
目的观察内镜下金属钛夹与药物注射治疗Dieulafoy溃疡并活动性出血的临床疗效。方法对2009年1月-2013年12月我院内镜明确诊断为Dieulafoy溃疡伴活动性出血,且予以内镜下治疗62例患者的临床资料进行回顾性分析。根据治疗方式不同,分为钛... 目的观察内镜下金属钛夹与药物注射治疗Dieulafoy溃疡并活动性出血的临床疗效。方法对2009年1月-2013年12月我院内镜明确诊断为Dieulafoy溃疡伴活动性出血,且予以内镜下治疗62例患者的临床资料进行回顾性分析。根据治疗方式不同,分为钛夹组与药物注射组,钛夹组35例于内镜下金属钛夹止血治疗,药物注射组27例于内镜下局部注射肾上腺素止血治疗。对比两组即时止血率、有效止血率、再出血率、外科手术率之间的差异。结果钛夹组即时止血率及有效止血率明显高于药物注射组,再出血率、外科手术率明显低于药物注射组,P﹤0.05,具有统计学意义;药物注射组出现4例心悸、3例血压升高并发症,钛夹组术后无明显并发症,两组均未出现死亡患者。结论与药物注射治疗相比,金属钛夹治疗Dieulafoy溃疡伴活动性出血具有止血迅速、成功率高、复发出血率低、无并发症,可作为内镜下治疗止血首选方式。Dieulafoy溃疡为少见胃肠道出血性疾病,病灶小、隐匿,出血前多无先兆,病情反复,诊断困难,胃镜检查容易漏诊[1],直接威胁生命。本文回顾性分析我院2009年1月-2013年12月收治的62例Dieulafoy溃疡伴出血患者的临床资料,对比分析内镜下金属钛夹治疗与药物注射治疗Dieulafoy溃疡的止血疗效。 展开更多
关键词 DIEULAFOY溃疡 金属钛夹 肾上腺素
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Dubin-Johnson综合征9例临床分析并文献复习 被引量:2
9
作者 刘琴 何卿玮 +5 位作者 秦建平 汤善宏 蒋明德 李英 莫波 周娟 《西南军医》 2015年第6期629-631,共3页
目的对已确诊病例的临床特点进行总结和分析,以提高对该类遗传性疾病的认识,减少误诊误治,并对相关文献进行复习。方法结合病史、临床表现、实验室检查、肝组织学检查及治疗后反应综合分析明确诊断为Dubin-Johnson(DJS)综合征的9例住院... 目的对已确诊病例的临床特点进行总结和分析,以提高对该类遗传性疾病的认识,减少误诊误治,并对相关文献进行复习。方法结合病史、临床表现、实验室检查、肝组织学检查及治疗后反应综合分析明确诊断为Dubin-Johnson(DJS)综合征的9例住院患者。住院期间检测肝功能、凝血常规、病毒性肝炎标志物、自身免疫抗体等化验,腹部彩超、腹部核磁共振,肝脏活体组织病理检查。结果所有患者均为青年男性,一般情况良好,无明显症状,如合并其他疾病,以合并疾病为主要表现,肝功能总胆红素及直接胆红素明显增高,其余酶学指标均正常。DJS肝穿病检见弥漫性褐色色素颗粒沉积。结论 Dubin-Johnson综合征临床表现常为不明原因的高胆红素血症伴轻度非特异症状体征,由于缺乏血清学标志物,诊断较为困难。肝脏穿刺病理活检可见典型褐色色素颗粒沉积,对诊断该疾病有临床参考价值,值得推广应用。 展开更多
关键词 Dubin-Johnson 高胆红素血症 肝脏病理活检
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需手术治疗的肠梗阻患者的梗阻原因及其疾病谱分布
10
作者 李英 何卿玮 +2 位作者 何胜 沈才飞 秦建平 《西南国防医药》 CAS 2017年第8期879-881,共3页
目的分析内科无法解除、需外科手术治疗的肠梗阻患者的梗阻原因及其疾病谱分布,为临床诊断和治疗提供参考依据。方法选取2012年1月~2016年7月在本院确诊的263例内科无法解除、需外科手术治疗的肠梗阻患者临床资料,总结其最后临床诊断、... 目的分析内科无法解除、需外科手术治疗的肠梗阻患者的梗阻原因及其疾病谱分布,为临床诊断和治疗提供参考依据。方法选取2012年1月~2016年7月在本院确诊的263例内科无法解除、需外科手术治疗的肠梗阻患者临床资料,总结其最后临床诊断、梗阻原因和疾病谱分布。结果 263例中,术前病因明确者225例,余38例术前病因不明。病因分布按构成比高低依次为:恶性肿瘤90例,粘连88例,疝气嵌顿36例,肠扭转23例,腹腔炎症5例,十二指肠溃疡伴梗阻4例,肠套叠4例,粪石嵌顿4例,结核3例,先天性巨结肠2例,小肠间质瘤2例,P-J综合征和腹腔巨大血肿各1例。结论肠梗阻病因多且复杂,以恶性肿瘤、粘连、疝气嵌顿最常见。对于内科保守治疗无效的肠梗阻,外科手术有很大帮助,手术可发现一些少见原因引起的肠梗阻。 展开更多
关键词 肠梗阻 疾病谱 手术 病因
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伴畸胎瘤的腹膜假黏液瘤一例
11
作者 何卿玮 莫波 +3 位作者 王云侠 秦建平 郑淑梅 蒋明德 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期60-61,共2页
患者女,48岁,因进行性腹围增大,伴腹胀、纳差半年,于2013年2月收入成都军区总医院消化内科。体格检查:消瘦,腹部膨隆,腹围100cm,腹壁静脉曲张,中上腹叩诊呈鼓音,中腹及下腹叩诊浊音,移动性浊音阴性。
关键词 腹膜假黏液瘤 畸胎瘤 成都军区总医院 移动性浊音 腹壁静脉曲张 消化内科 体格检查 腹部膨隆
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