四川省首次分离出的风疹野病毒的基因型分析

[目的]为了解2006年引起一起风疹暴发疫情的风疹病毒的分子生物学特征,确定其基因型别。[方法]用Vero-Slam细胞从风疹暴发患者的标本中分离风疹病毒,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和序列测定与分析鉴定其基因型。[结果]四川省首次分离出的2株风疹野病毒全部鉴定为2B基因型。与3株WHO风疹病毒2B基因型参考株(I11-IS-68、TS34-CH-00和TAN-IND-00)核苷酸同源性分别为93.6%、95.6%和97.1%;氨基酸同源性分别为99.5%,99.5%和100%。[结论]此次疫情是由2B基因型风疹病毒引起的暴发疫情,此项研究为将来四川省风疹病毒的分子流行病学研究打下了基础。

四川省脊髓灰质炎Ⅰ型野毒株的分子病毒学检测

１９９１年安岳县和１９９２年会东县各１例临床诊断为脊髓灰质炎（脊灰）的患者，从其粪便标本中各分离出１株病毒，血清学定型均为脊灰Ⅰ型病毒，经ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ－ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＦｒａｇｍｅｎｔＬｅｎｇｔｈＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ａｓｓａｙ）法检测，２株病毒与Ｓａｂｉｎ Ⅰ有明显差异定为Ⅰ型野毒株。又经核酸序列测定，其与Ｓａｂｉｎ Ⅰ型疫苗株亦有明显的差异，证实为脊灰互型野毒株。结果显示，不同年份、不同地方流行株间的序列有差异。四川省脊灰流行与毒株间核酸序列的差异有关，但我国现行疫苗ＯＰＶ（ＯｒａｌＰｏｌｉｏＶａｃｃｉｎｅ）能有效预防我省脊灰，基础兔疫和强化免疫是预防和消灭脊灰的有力武器。

口服脊髓灰质炎疫苗免疫儿童对四川Ⅰ型脊髓灰质炎病毒的抗体水平

目的：为了解我国口服脊髓灰质炎（以下简称脊灰）疫苗（OPV）按现行免疫程序接种后，被免疫儿童对四川1型脊灰病毒的免疫水平，以指导预防、控制乃至消灭脊灰策略的制定。方法：应用微量中和试验方法检测血清中对三种毒株的中和抗体滴度。结果：儿童基础兔疫后对三种毒株Sabinl、Mahoney、四川株的阳性率为100％，免后GMT分别为1196．8、317．9、62．9。结论：免疫儿童对四川Ⅰ型脊灰病毒抗体的GMT较SabinⅠ型和Mahoney低．但OPV能诱生抗四川株的抗体，OPV对四川Ⅰ型脊灰病毒是有效的。

四川省麻疹野病毒的分离和鉴定

目的 了解四川省麻疹病毒分子生物学特征 ,确定现阶段四川省流行的麻疹野病毒的基因型别。方法 用绒猴淋巴母细胞 (B95a )从一疑似麻疹散发患者的标本中分离麻疹病毒 ,通过逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR )和其序列测定方法鉴定是否为麻疹病毒。结果 四川省分离的这株毒株确定为麻疹野病毒H1基因型。结论 分离出麻疹野病毒属于H1基因型 。

四川省2002~2004年麻疹实验室网络监测

目的:评价四川省麻疹实验室网络在加速控制麻疹阶段的作用。方法:按世界卫生组织颁发的麻疹病毒感染的实验室诊断基本操作手册。结果:省级实验室每年通过国家麻疹实验室的质控考核,考核成绩均为100分,复核标本的符合率100%。2003年21个市州麻疹实验室均通过省对市州的质控考核。省级麻疹实验室2002-2004年10月共检测346例疑似麻疹病例血清标本,确定24起麻疹暴发疫情,11起风疹暴发疯情,4起其他发热出疹性疾病暴发疫情,10例散发病例;4个年龄组健康人群血清共731份,麻疹IgG抗体平均阳性率为96.28%,抗体滴度≥1:800的占78.83%;从54份咽拭子和尿液标本中分离出20株麻疹病毒,8株经核酸序列分析鉴定为H1基因型。结论:为了提高麻疹的监测质量,必须进一步加强和完善麻疹实验室网络建设。

四川省两株脊髓灰质炎Ⅰ型野病毒的核酸序列分析

目的 :探索脊髓灰质炎 (脊灰 )流行与野毒株性状的关系。方法 :选择了 1991年安岳县和 1992年会东县各一例临床诊断为脊灰的患者 ,从其粪便标本中各分离出一株病毒 ,用微量中和试验进行血清学鉴定 ,PCR— RFL P法进行型内鉴定 ,对 VP1区 30 0个核苷酸进行测序。结果 :血清学定型均为脊灰 型病毒 ,经 PCR— RFL P法检测 ,判为野病毒。核酸序列分析证实两株病毒与 Sabin 有明显差异为野病毒。两毒株间核酸序列不完全一致 ,有 2 0个核苷酸的差异。结论 :不同年份、不同地方流行株间的序列有差异。四川省脊灰流行与毒株间核酸序列的差异有关。但我国现行疫苗 OPV能有效预防我省脊灰 。

4岁儿童对四川Ⅰ型脊髓灰质炎野病毒的免疫水平观察

目的 了解已口服脊髓灰质炎疫苗 (OPV)基础免疫的儿童在加强免疫前后对四川Ⅰ型脊灰野病毒的免疫水平 ,指导预防、控制乃至消灭脊灰策略的制定。方法 微量中和试验。结果 80名 4岁儿童加强免疫前对Sabin 1、Ma honey、四川株的阳性率分别为 98 8%、 93 8%、 73 8% ,GMT分别为 2 5 6 0、 49 8、 9 9,免后的阴性率分别为 98 8%、98 8%、 82 5 % ,GMT分别为 415 9、 177 9、 2 5 6。结论 4岁儿童加强免疫后的阳性率和GMT均有明显的提高 ,加强服苗对四川Ⅰ型脊灰病毒是有效的。因此 ,强化免疫对预防、控制、消灭脊灰是行之有效且十分必要的手段。

2003-2007年中国风疹病毒基因特征分析

本研究用Vero细胞或Vero/SLAM细胞从我国10个省(直辖市、自治区,下同)2003～2007年风疹暴发和散发病例的咽拭子标本中分离到57株风疹病毒,用RT-PCR方法扩增了57株风疹病毒E1基因1107个核苷酸的片段,并对该PCR产物进行序列测定和分析。结果提示,在基于WHO基因定型靶序列739个核苷酸片段构建的基因亲缘关系树上,其中55株风疹病毒株属于1E基因型,相对于其他国家的1E基因型,形成一个独立分支;另外2株风疹病毒属于2B基因型。57株风疹病毒大部分核苷酸的突变为无义突变,氨基酸序列高度保守,除了2株风疹病毒在E1蛋白血凝抑制和中和位点区域第212位氨基酸由Thr变为Ser,其他病毒株均无重要抗原位点的改变;所有我国已分离到的1E基因型风疹病毒在E1蛋白第338位氨基酸共享突变位点(Leu338→Phe338),而其他基因型以及其他国家的1E基因型风疹病毒在该位点均未发生突变,提示该氨基酸(Phe338)可能是我国1E基因型风疹病毒所特有。2003～2007年在我国10个省均分离到1E基因型,而2B基因型只在2006年从四川省的越南输入病例中分离到,提示1E为绝对优势基因型,2B基因型为输入基因型。与1979～1984年和1999～2002年我国流行的风疹基因型不同,发生了基因型的更替,近年我国风疹的流行是由1E基因型为主的风疹野病毒的多个传播链引起。

四川省首次麻疹疫苗强化免疫效果评价

目的 :评估麻疹疫苗强化免疫的实施对控制麻疹发病的效果 ,为加速控制麻疹工作提供对策依据。方法 :对全省 8～ 30月龄儿童均实施麻疹疫苗强化接种 1剂 ,1年后 ,利用全省麻疹病例监测资料 ,进行年龄队列发病专率比较、病例免疫状况与发病关系描述分析。结果 :2 0 0 2年麻疹疫苗强化免接种率为 94 .30 % ,极大提高了免疫保护水平 ,有力消除了流动和漏种儿童的免疫空白。接受强化免疫的 8～ 30月龄队列儿童 ,2 0 0 3年其发病专率较上年该年龄队列下降 32 .92 %～33.30 % ,同时 ,未接受强化免疫的 3～ 7岁儿童 ,2 0 0 3年其发病专率较上年上升 2 5 .6 6 %～ 74 .77%。 2 0 0 3年全省麻疹发病率比上年上升 2 1.0 7% ,主要由 5～ 9岁儿童中免疫保护水平相对较差的部分儿童发病和爆发所引起。结论 :麻疹疫苗强化免疫对降低麻疹发病的效果显著而肯定 ,该省应创造条件实施麻疹疫苗强化免疫策略。

乙肝疫苗低(无)应答儿童再免疫效果观察

目的评价乙肝疫苗低应答/无应答儿童重新接种或加大剂量接种后的免疫效果。方法用酶联免疫法（ELISA）筛选出1岁以内已全程接种乙肝疫苗的4-6岁儿童血清HBsAg、抗-HBs、抗-HBc 3项指标全为阴性者,再用固相放射免疫法（RIA）复核并对抗-HBs小于10mIU/ml者,使用重组（CHO细胞）乙肝疫苗,按10μg剂量/1针次和20μg剂量/1针次分2组接种,均为0、1、6程序接种3针,完成接种后1-2月时采血,检测抗-HBs水平。结果2019例筛选儿童血清HBsAg、抗-HBs、抗-HBc 3项指标全为阴性者672例,占33.28%。抗-HBs〈2.1mIU/ml的无应答儿童占27.44%,2.1-9.9mIU/ml的低应答儿童占5.05%。10μg剂量接种组采集到158例血清,抗-HBs≥10mIU/ml者155例,占98.10%,GMT为364.36mIU/ml。20μg剂量接种组采集到173例血清,抗-HBs≥10mIU/ml者172例,占99.42%,GMT为392.86mIU/ml。2组疫苗再免疫后抗-HBs的GMT增幅为53.61-721.87倍。结论乙肝疫苗无（低）应答儿童重新接种乙肝疫苗3针后免疫效果良好,10μg剂量组与20μg剂量组的抗体达到保护水平率差异无统计学意义,无应答儿童再免疫后产生的抗体GMT水平2组差异无统计学意义,低应答儿童的抗体GMT水平则表现为20μg剂量组高于10μg剂量组。

四川省健康人群麻疹抗体水平监测

目的 了解四川省健康人群麻疹抗体水平状况 方法 用血凝抑制实验对 5 81名 2～ 15岁儿童进行了麻疹抗体监测 结果 麻疹抗体阳性率为 99 83 % ,抗体几何平均滴度 (GMT)为 1∶77 71。结论 我省的麻疹抗体维持在较高的水平 。

四川省吸毒人员乙型肝炎血清流行病学和乙肝疫苗免疫效果研究

[目的]了解四川省吸毒人员乙型肝炎流行现状以及乙肝疫苗免疫效果,为制定策略提供依据。[方法]2005年在成都市、南充市、遂宁市戒毒所内随机选取既往未接种过乙肝疫苗的吸毒人员665名为研究对象。用酶联免疫吸附试验(ELISA)对HBsAg、抗-HBs和抗-HBc3项指标进行初筛,用固相放射免疫法(SPRIA)复核3项指标全阴者,用20μg乙肝疫苗按0、1、2程序接种,1月后采血,检测抗-HBs水平。[结果]四川省吸毒人群乙肝病毒(HBV)总感染率为90.52%,男性90.40%,女性90.97%,男女无统计学差异;吸毒人员乙肝感染标志物HBsAg,抗-HBs和抗-HBc的流行率分别为26.45%,45.86%和35.34%;静脉吸毒者(IDU)HBV总感染率高于口吸者。接种乙肝疫苗后,抗-HBs阳转率为86.96%,抗-HBs几何平均滴度(GMT)为159.39mIU/ml。[结论]四川省吸毒人群HBV总感染率高于全人群,IDU是感染乙肝的高危人群。对吸毒人群进行乙肝疫苗接种效果良好。

四川省1996年AFP病例监测情况分析

四川省１９９６年急性驰缓性麻痹（ＡＦＰ）病例监测结果：共报告ＡＦＰ病例３７２例，其中临床确诊２例，年发病率为０．００２／１０万，比１９９５年（０．００８／１０万）〔１〕下降７５．００％。ＡＦＰ发病者中以５岁以下为主占５８．０７％，这与国内资料报告相似〔２〕。病例中未服苗及未全程服苗者占１３．４４％，全程服苗者占７１．５１％，表明我省服苗率较高，但仍有免疫空白点存在。为确保按期消灭脊灰，我省应在做好常规基础免疫的同时，认真搞好强化免疫，提高ＡＦＰ监测系统的质量。

一起风疹疫情的流行病学调查

目的调查一次风疹病毒爆发流行情况,并通过调查分析风疹病毒对不同人种宿主的差异。方法调查、分析一起2006年局限于四川省成都市某高校越南京族学生中的风疹疫情的流行病学、病原学和临床资料,并调查该次疫情前数次类似情况,着重了解发病人群局限于越南京族学生的相关情况。采用Vero-Slam细胞从患者的标本中分离风疹病毒,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和序列测定与分析鉴定其基因型别。结果 2006年该次疫情发病率为3.14/万。而该校越南学生累计发病率达10.8%。远高于中国学生累计发病率。两国学生生活、学习环境同一。中国学生存在被暴露的可能。通过现场调查明确了21名中国人的暴露情况。分离出的2株2B基因型风疹野病毒系四川省首次,与目前中国大陆风疹病毒优势病毒株在组间遗传距离上较远,与从印度2B基因型病毒分离株(TAN-IND-00株)组间遗传距离最为接近。结论 2006年该次风疹爆发流行是由2B基因型风疹病毒引起的疫情,极有可能系由越南输入我国;其疫情局限于该校越南籍京族学生中的现象可能与除宿主所处环境、免疫状况以外的人种因素有关。

红外碳硫仪测定煤中全硫技术研究

采用红外碳硫分析仪直接对煤中全硫的测定方法进行研究；该分析方法速度快，准确度高，简便易操作，自动化程度高，分析一个样品从准备到分析结果报出仅需3min的时间，克服了传统高温管式炉或马弗炉升温慢，精度差等弊端，RSD（％）小于0．028％，结果满意。

婴儿麻疹疫苗免疫前后抗体水平观察

目的：了解婴儿接种麻疹免疫前后的抗体水平。方法：４０例婴儿在接种麻疹疫苗前后１月分别采集血清标本，以血凝抑制法（ＨＩ）检测其抗体。结果：免前抗体几何平均滴度（ＧＭＴ）为１∶３．３６，血清阳性率为９２．５％，免后抗体ＧＭＴ为１∶２４．５９，血清阳性率为１００％，免疫成功率为８７．５％。结论：免前抗体的存在对免疫成功有干扰作用，高比例的免前血清阳性说明体内仍还残留有胎传抗体，或已受麻疹病毒的感染。

恒河猴肾MK-8611细胞系的建立及其生物学特性

从健康雄性恒河猴肾脏,经胰酶——EDTA二钠液消化,获得的细胞悬液,采用延长传代时间和28℃及37℃交替单层静置培养,建立一株能稳定传代的细胞系,命名为MK-8611细胞系。该细胞退变缓慢、维持正常形态时间长,未发现细菌、霉菌、支原体等微生物污染,对异种动物无致瘤性,经试验对脊灰、麻疹、腺病毒、ECHO、COXB、乙型流感、轮状病毒、呼吸道合胞、流行性出血热等病毒敏感。

农村生活污水治理的探讨

近年来,随着我国农村经济建设的快速发展,农民的收入和生活水平日益提高。而在提升农村生产力的同时,农村地区的资源及环境问题也日益凸显,尤其是水体污染现象尤为突出,这对于农村地区的长远发展造成了一定的制约和阻碍。因此,农村生态环境保护已成为现阶段乡村振兴以及高质量发展中亟待解决的重要问题。本文就农村生活污水的特点和污水治理现状进行了分析,并对农村生活污水治理的有效策略进行了探讨。