改性柑橘果胶对兔关节软骨细胞糖酵解代谢的影响

目的研究改性柑橘果胶(MCP)对兔关节软骨细胞的糖酵解代谢的影响。方法分离、培养兔膝关节软骨细胞至第3代后,分别用含0、500μg/ml MCP的培养液(MCP0和MCP500)培养3 d,设MCP0为对照组;连续传代培养软骨细胞,每代软骨细胞分别以MCP0和MCP500培养3 d;以白细胞介素-1β(IL-1β)处理软骨细胞1 d后,再分别用MCP0和MCP500培养3 d。以2-脱氧-葡萄糖(2DG)处理软骨细胞1 d后,再分别用MCP0和MCP500培养3 d;于培养3 d后,通过CCK-8方法检测软骨细胞的相对增殖情况;利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒测定软骨细胞的葡萄糖摄取量和乳酸生成量;通过免疫荧光染色方法考察连续传代软骨细胞的Ⅱ型胶原α1(COL2A1)合成情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测软骨细胞的COL2A1、蛋白聚糖(ACAN)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白-1(Glut-1)、丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和葡萄糖转运蛋白-3(Glut-3)的基因表达情况。结果与对照组相比,MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量和乳酸生成量,上调了ACAN、HIF-1α、Glut-1和PKM2的基因表达水平;与对照组相比,连续传代过程中,MCP可以促进软骨细胞的增殖、维持软骨细胞的表型,上调COL2A1、ACAN、SOX9、HIF-1α、Glut-1、P KM2和LDHA的基因表达,提高软骨细胞COL2A1合成量和乳酸生成量;在经IL-β处理后,与对照组相比,MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量,上调了COL2A1、ACAN、HIF-1α和Glut-1的基因表达。在经2DG处理后,MCP处理提高了软骨细胞的葡萄糖摄取量,上调SOX9、HIF-1α、PKM2和Glut-3的基因表达。结论MCP能够增强软骨细胞的葡萄糖摄取能力,提高软骨细胞糖酵解代谢水平。

改性柑橘果胶对滑膜成纤维细胞的影响

目的研究改性柑橘果胶(MCP)对滑膜成纤维细胞(SF)及半乳糖凝集素-3(Gal-3)诱导处理后SF细胞的代谢活性及相关基因表达情况的影响。方法分离、培养兔SF细胞,分别用不同质量浓度(0、250、500、750 mg/L)MCP的培养液处理SF细胞,同时用10µg/ml Gal-3诱导24 h后进一步进行MCP处理SF细胞;分别于处理的第1、3、5天,通过CCK-8检测SF细胞的增殖活性;利用实时荧光定量PCR检测SF细胞的转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(COL1A2)及Gal-3的mRNA表达情况,并通过免疫荧光染色法考察SF细胞的COL1A2合成情况。结果在第1、3、5天,不同质量浓度MCP均对SF细胞增殖有抑制作用(均P<0.05)。与对照组相比,不同浓度的MCP可以引起不同的基因表达,高浓度的MCP上调了SF细胞的TGF-β1、COL1A2和Gal-3的mRNA表达;同时,MCP对SF细胞的COL1A2蛋白合成无影响。Gal-3诱导后,MCP处理可以下调TGF-β1和COL1A2的mRNA表达,且可以显著降低COL1A2蛋白的合成;尤其是500 mg/L MCP可以明显降低TGF-β1、COL1A2和Gal-3的mRNA表达。结论MCP具有抑制SF细胞过度增殖、调控SF细胞基因表达的作用。

防术后粘连生物膜材料研究进展

术后粘连是外科手术后在伤口恢复过程中由于过度炎症和纤维蛋白沉积常易发生的一种现象,可导致内脏器官或组织黏附在一起,进而影响脏器功能,甚至产生术后并发症。以物理屏障方式预防术后粘连发生的生物膜材料是目前应对术后粘连的最佳策略。因此,综述了以天然高分子材料和合成高分子材料为原料所制备的防术后粘连生物膜材料,以及纳米微粒薄膜和载药生物膜2种新型防术后粘连生物膜材料,以期为未来防术后粘连生物膜材料的研制提供参考。