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题名烟曲霉植酸酶基因的克隆及在毕赤酵母的高效表达
被引量:6
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作者
张桂敏
张晚鸣
何国帮
马立新
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机构
湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室
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出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期529-532,共4页
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基金
武汉市青年科技晨光计划(20025001038)
湖北省自然科学基金项目(2003ABA118)资助
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文摘
根据文献报道的烟曲霉植酸酶序列,设计引物以烟曲霉CCTCCAF93044的总DNA为模板进行梯度PCR,扩增出了1条约1.4 kb的带,将该片段进行DNA序列测定,其序列与已报道的烟曲霉植酸酶序列完全一致,但只编码完整的成熟植酸酶序列。将该片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K上,获得表达质粒pHBM108。该质粒转化毕赤酵母KM71所得重组子经PCR验证后进行诱导表达,其中一重组子经144 h诱导,植酸酶表达量至少为1.25 mg/ml,比同类报道的表达量高出60%以上,以植酸钠为底物测得酶活为11.17U/ml。
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关键词
烟曲霉植酸酶基因
基因克隆
毕赤酵母
基因表达
菌种
质粒
PCR扩增
饲料添加剂
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Keywords
Aspergilius fumigatus phytase gene
Pichia pastoris
gene cloning
gene expression
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分类号
S816.7
[农业科学—饲料科学]
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