基于蛋白质保留膨胀显微镜对微囊泡进行荧光成像的实验研究

目的:探讨蛋白质保留膨胀显微镜(proExM)与小鼠下颌骨来源微囊泡(MVs)的相容性,观察膨胀后MVs表面标志物的分布情况并精确识别其细胞来源。方法:采用差速离心法分离小鼠下颌骨来源MVs;利用透射电子显微镜、Western blot、纳米颗粒跟踪分析技术对MVs进行观察鉴定;对MVs表面蛋白CD9、CD63、碱性磷酸酶(ALP)、破骨细胞相关受体(OSCAR)进行免疫荧光染色;采用proExM技术对免疫荧光染色后的MVs进行膨胀放大;测量膨胀系数并利用激光共聚焦显微镜观察膨胀前后MVs的形态以及荧光染色情况。结果:差速离心法分离得到的小鼠下颌骨来源MVs符合MVs鉴定标准;在该实验流程下,通过凝胶的膨胀实现小鼠下颌骨来源MVs的4倍膨胀;膨胀后MVs线剖面上CD9、CD63的荧光强度分布呈现多峰;相较于膨胀前,膨胀后MVs表面标志物CD9、CD63的曼德斯共定位系数(MCC)1方差变大(P<0.01),MCC2方差变小(P<0.05),皮尔森相关系数(PCC)方差变大(P<0.01);膨胀后实现对成骨细胞分泌的MVs以及破骨细胞分泌的MVs的精准识别;膨胀后测得小鼠下颌骨来源CD9+MVs中,成骨细胞来源MVs占比11.11%,破骨细胞来源MVs占比3.70%。结论:该实验流程可在小鼠下颌骨来源MVs的观测中提高分辨率,为揭示MVs表面蛋白分布的异质性,精准识别组织MVs的细胞来源建立一种标准实验流程。

基于MSET算法的民机QAR数据安全预警模型研究

为了提高民机运行安全水平,基于MSET算法建立了民机QAR数据安全预警模型。估计民机系统运行参数的未来发展状态,并运用到SMS的核心要素——安全风险管理中。利用某架A320民机1年内的空调制冷子系统QAR数据进行案例验证。结果表明:基于MSET的QAR数据安全预警模型可以实现风险事件的提前发现。基于安全预警结果,提出了影响安全的人-机-环关键要素,并在安全保证和安全促进中实施各类排查与培训等,最终用于提高民机运行安全水平。

公务机乘客视觉操纵与微环境舒适性工效设计研究

目的建立公务机乘客视觉、操纵、微环境相关的舒适性工效设计准则。方法基于运输类飞机适航条款CCAR/FAR/CS25部等,研究与舒适性相关的工效影响因素并提出相应的人机工效设计要求。分析某型公务机客舱显示器、舷窗、照明、站姿/坐姿/控制面板、微环境等舒适性设计效果。结果视觉、操纵、微环境的设计准则优化了公务机客舱的舒适性效果。结论研究的视觉、操纵、微环境舒适性准则为公务机客舱工效设计提供了技术支持,提高了公务机市场竞争力。

牙周膜干细胞在正畸牙移动中的作用及机制研究

目的:探讨牙周膜干细胞(PDLSCs)在正畸牙移动(OTM)中的作用及经典Wnt信号通路对其骨向分化能力的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为4组(n=6),3个实验组用加力装置对其右侧上颌第一磨牙施加近中向正畸力,对照组不加力;加力0、1、3、7 d后牙周组织取材,HE染色观察形态学变化、TRAP染色观察破骨细胞数的变化,免疫组化染色观察nestin和active-β-catenin的表达。分离培养h PDLSCs并将其随机分为3组,实验组给予100 KPa/12 h的静压力刺激,另2组为对照组,分别于0 KPa静压力和低氧条件下培养12 h,Western blot法检测细胞中OPG、RANKL、ALP、Runx2、p-GSK3β、active-β-catenin的表达水平。结果:随着正畸加力时间的延长,移动牙压力侧的牙周膜间隙逐渐变窄、破骨细胞数逐渐增多;牙周膜内nestin和active-β-catenin的表达亦随加力时间而呈逐渐上升(P<0.05)。Western blot法检测显示,100 KPa/12 h静压力刺激组的h PDLSCs中,p-GSK3β和active-β-catenin的表达水平增加(P<0.05),ALP和Runx2的表达水平下降(P<0.05),RANKL/OPG比例上升(P<0.05)。结论:牙周膜干细胞参与正畸牙移动过程,静压力作用可使h PDLSCs中的Wnt信号通路激活,使其成骨活性降低、破骨活性增强。

调节性T细胞在白癜风发病机制中的作用及治疗应用

白癜风是一种临床常见的色素脱失性皮肤黏膜疾病,以表皮基底层黑色素细胞凋亡破坏为特点,发病机制复杂,治疗手段有限。白癜风的发病与免疫系统功能失调关联很大,其中自身免疫反应过度激活是其重要因素。在机体免疫系统中,CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T细胞(T regulatory cells,Tregs)发挥着调节免疫应答和维持免疫稳态的重要作用。研究显示,白癜风患者外周血中和皮损处的Tregs存在数量减少和功能减弱的现象。Tregs分泌免疫调节相关细胞因子水平下降,插头/翅膀状螺旋转录因子3(FOXP3)、细胞毒性T淋巴细胞表面抗原-4(CTLA-4)以及趋化因子CCL22均表达不良。因此,通过靶向恢复Tregs表达异常基因的治疗是当前白癜风研究的热点领域,此外,过继转移Tregs疗法已在白癜风动物模型上取得了一定的疗效。进一步阐明Tregs在白癜风发病机制中的具体作用,探索Tregs靶向治疗方法,将为白癜风的预防和治疗提供新思路。

利用旧活动义齿制取开窗式印模制作新义齿病例1例

该文报道1例上颌牙大部分缺失的病例。利用旧义齿制取开窗式印模并转移颌位关系,简化了操作流程,同时取得满意的修复效果。

TiO2纳米管表面对成骨细胞与巨噬细胞黏附、形态及迁移的影响

目的:研究TiO 2纳米管对小鼠成骨细胞和巨噬细胞早期黏附、细胞形态及迁移运动的影响。方法:将小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)和巨噬细胞(RAW264.7)分别接种于抛光(P)后的纯钛试样和抛光钛经20 V恒压阳极氧化制备出的纳米管形貌(NT)钛试样表面,扫描电镜观察钛试样的表面形貌以及细胞接种于各组钛试样3、6、12、24、48 h后的细胞形态,Hoechst染色后荧光显微镜统计各组钛试样在接种3、6、12、24 h后的细胞黏附数量,活细胞工作站观察细胞在不同形貌钛表面24 h的迁移运动轨迹。结果:NT组钛试样表面可见均匀排列的纳米管阵列,P组钛表面光滑。与P组相比,NT组表面成骨细胞黏附数量较多,细胞丝状伪足长且丰富,细胞迁移运动缓慢,而巨噬细胞的黏附数量和丝状伪足较少,细胞迁移速率更高。结论:钛表面纳米管形貌可促进成骨细胞黏附,抑制其迁移运动,而对巨噬细胞的影响则相反。

钛种植体表面新型DNA水凝胶递送地塞米松诱导巨噬细胞M2极化的研究

目的:构建壳聚糖DNA水凝胶负载递送地塞米松(Dex),探索其在钛种植体表面对巨噬细胞M2极化的作用。方法:阳极氧化法(20 V)在钛表面制备纳米管(NT);将鲑鱼精双链DNA变性-退火-交叉配对形成预凝胶,与壳聚糖交联形成水凝胶,采用真空抽吸将凝胶加载到纳米管的管腔中;通过SEM、FTIR和体外释放试验检测其结构特征及载药释放性能;将RAW264.7细胞培养在各组钛样本表面,采用CCK-8、CLSM、RT-qPCR检测凝胶对细胞增殖、极化的影响。结果:成功制备出负载Dex的DNA-壳聚糖水凝胶,延长了Dex的半数释放量天数,NT+Dex@Gel组的细胞增殖活性强于NT、NT+Gel组,CD86表达水平显著降低、CD163表达水平显著升高(P<0.05)。结论:壳聚糖交联DNA骨架形成水凝胶负载Dex在钛种植体表面能促进巨噬细胞增殖并诱导其M2型极化。

钛表面纳米管结构金纳米颗粒加载对成骨细胞MC3T3-E1功能影响的研究

目的:在钛纳米管表面加载金纳米颗粒并探究对成骨细胞成骨分化的影响。方法:本研究使用直流电沉积技术将金纳米颗粒沉积在二氧化钛纳米管阵列表面。场发射扫描电子显微镜进行材料表征,CCK-8实验检测细胞增殖能力,通过RT-PCR、ALP染色、茜素红染色检测小鼠成骨细胞MC3T3-E1在改性材料表面成骨分化能力。结果:通过直流电沉积技术成功将金纳米粒子成功组装在二氧化钛纳米管表面,改变电沉积时间可以控制金颗粒的尺寸和负载量。体外实验结果表明,金纳米粒子的加入增加MC3T3成骨分化特异性基因Osx、BMP-2和OPN的表达(P<0.05),显著增强ALP活性和矿化能力(P<0.01)。结论:钛纳米管结构加载金纳米颗粒可以促进MC3T3细胞成骨分化。

钛表面纳米形貌在炎症环境下对巨噬细胞极化调控和炎症相关因子分泌的影响

目的:探讨钛表面纳米形貌在炎症环境下对巨噬细胞极化状态及炎症相关因子分泌功能的影响。方法:将纯钛试样分别制备为光滑表面(P组),5 V阳极氧化反应(NT5V组)和20 V阳极氧化反应(NT20V组)的纳米管形貌。将小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞培养于样品表面4 d。扫描电镜观察试样表面形貌和细胞形态,流式细胞术检测极化标志物,实时荧光定量PCR检测基因表达,Elisa检测炎症相关因子分泌。结果:NT5V和NT20V组样本表面纳米管直径分别为30 nm和100 nm。LPS刺激前后NT5V组细胞伸长率最大、NT20V组细胞伸展面积最大;NT5V组CD 206、NT20V组CD 86阳性率最高;NT5V组IL-10、CD206表达最高;NT20V组IL-1β、TNF-α分泌最高。经LPS刺激,NC组iNOS、IL-1β表达最高;NC、NT20V组IL-1β、TNF-α,NT5V组IL-10分泌最高(P<0.05)。结论:30 nm和100 nm纳米管钛表面分别诱导巨噬细胞向M2和M1方向极化;经LPS刺激,纳米管表面抑制M1极化及炎症相关因子分泌,NT5V纳米管表面促进巨噬细胞维持M2极化及抑炎相关因子分泌。

抗菌肽生物功能化TiO_(2)纳米管的抗菌性能及其对人角质形成细胞生物学行为的影响

目的探讨抗菌肽生物功能化TiO_(2)纳米管的抗菌性能及其对人角质形成细胞黏附、迁移等生物学行为的影响。方法采用阳极氧化法在光滑钛片(光滑钛组)表面构建TiO_(2)纳米管阵列(纳米管组), 通过物理吸附方式将抗菌肽(LL-37)加载至TiO_(2)纳米管表面(抗菌肽组)。每组采用简单随机抽样法抽取3个试样, 借助场发射扫描电镜、原子力显微镜、接触角测量仪、荧光标记和荧光酶标仪观察各组试样表面形貌、粗糙度、亲水性以及抗菌肽释放特点。将人角质形成细胞分别培养于3组钛试样表面, 每组设置3个重复, 场发射扫描电镜观察细胞黏附形态, 细胞免疫荧光染色观察黏附数量;细胞计数试剂盒检测细胞增殖能力;划痕实验分析细胞迁移特点, 评价各组钛试样对HaCaT细胞生物学行为的影响。将牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)接种至3组钛试样表面, 每组设置3个重复, 场发射扫描电镜观察细菌形态, 活死细菌染色法测定细菌活力, 评价各组钛试样对Pg的抑制作用。结果抗菌肽组试样表面可见均匀排列的纳米管阵列, 管口处有颗粒状抗菌肽覆盖。纳米管组和抗菌肽组钛试样表面粗糙度[分别为(20.40±3.10)和(19.10±4.11)nm]和亲水性(接触角分别为22.4°±3.1°和25.3°±2.2°)均比光滑钛组[粗糙度为(2.30±0.18)nm, 接触角为71.8°±1.7°]显著增加(P<0.05)。抗菌肽的释放表现为早期的突释(1~4 h)和长期(1~7 d)的缓释过程。免疫荧光显示, HaCaT细胞接种至钛试样表面0.5和2.0 h后, 纳米管和抗菌肽组钛试样表面细胞黏附数量均比光滑钛组显著增加(P<0.05);细胞计数结果显示, 接种1、3及5 d后各组细胞增殖活性差异均无统计学意义(P>0.05);划痕实验显示, 与光滑钛和纳米管组相比, 划痕后24 h时抗菌肽组钛试样表面愈合率最高[(96.4±4.9)%](F=35.55, P<0.001), 抗菌肽组钛试样24 h即可形成单层细胞并填充划痕。体外细菌共培养实验显示, 相比于光滑钛组, 纳米管和抗菌肽组钛试样表面细菌皱缩明显, 抗菌肽组钛试样表面可见明显的菌体破裂;活死细菌染色显示, 抗菌肽组钛试样表面绿色荧光强度为各组最低(F=66.54, P<0.001)。结论抗菌肽生物功能化TiO_(2)纳米管材料具备良好的抗菌性能, 有利于人角质形成细胞的黏附及迁移。

纤维增强复合材料固定义齿修复的疗效：回顾性临床研究

目的：获取32例纤维增强复合材料固定义齿修复的生存数据．并基于美学、生物学和功能学参数评价这类修复体的效果。材料和方法：选择32例纤维增强复合材料固定义齿修复的病例，其纤维支架由多聚体和单体混合的连续单向玻璃纤维材料构成。本研究记录了修复体的生存时间、失败事件和临床参数。根据改良的USHPS／Ryge标准制定质量分级评估体系：有效修复功能且无失败．为“完全修复”；出现小的不足并需做出后继修补．定为“功能性修复”：修复体脱落，称作“失败”。结果：术后随访时间为2～64个月，中位随访时间为18．2个月。24例修复体为”完全修复”．7例为”功能性修复”．1例“失败”。在中位随访时间内能达到完全修复的病例占744％。对于大多数病例．该质量分级评估体系（USHPS／Ryge标准）给出了优秀级的临床效果：没有效果不佳或差的修复体。结论：纤维增强复合材料固定义齿修复在特定临床适应症的治疗中表现出良好的稳定性，在美学、生物学和功能学方面性能显著。

口腔外科实习中基于微信平台的混合教学设计与实践

基于微信平台，在口腔外科实习中设计与实施混合教学。让学生对实习工作早接触、早熟悉和早计划；在实习中获得多提问、多总结和多考核的过程；在实习后进行巩固复习、学科交流和拓展学习。初步实践显示，该教学激发了口腔外科实习学生的临床学习兴趣和动力，增强了师生之间的互动和教师对学生的监管，提升了实习教学效果。