单细胞RNA测序在畜禽遗传育种中的研究进展

单细胞RNA测序(single cell RNA sequencing, scRNA-seq)是在单细胞水平上实现高通量测序的技术,可以用来研究特定细胞亚群基因表达的异质性,帮助我们识别未知或稀有的细胞类型,并为进一步的研究奠定基础。scRNA-seq技术的进步使其在肿瘤、临床医学和发育生物学等领域得到了广泛应用,但在畜禽育种中的研究还较少。本文介绍了scRNA-seq一般流程,着重阐述了其在畜禽的生殖分化、毛囊发育和肌肉生成等方面的研究现状以及前景,以期为scRNA-seq在畜禽遗传育种中的研究和应用提供理论依据。

一株苯酚降解菌的筛选及其降解特性的初步研究

苯酚是一种严重污染物,目前的化学降解方法存在众多弊端,生物处理方法越来越受到重视。从胜利油田河口采油厂的飞雁滩油田土壤样品中分离,得到一株能够利用并降解苯酚的菌株P2。该菌株能够在以苯酚为唯一碳源和能源的培养基上生长,经BIOLOG细菌自动鉴定系统及16S rDNA鉴定,该菌株为类产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)。通过苯酚羟化酶特异性引物的设计,从该菌株扩增出苯酚羟化酶大亚基(LmPH)基因,该基因片段编码对苯酚有催化活性的多肽。苯酚降解实验证实,该菌能在30℃192 h内完全降解500mg/L的苯酚,Cu2+严重抑制该菌株对苯酚的降解,但碱性环境有利于其对苯酚的降解。

甲氨蝶呤联合宫腔镜保守治疗宫颈妊娠9例临床分析

目的:探讨宫颈注射甲氨蝶呤(MTX)联合宫腔镜技术保守治疗宫颈妊娠的临床价值。方法:回顾性分析9例宫颈妊娠患者应用宫颈注射MTX联合宫腔镜技术保守治疗患者的临床资料。结果:9例宫颈妊娠患者均成功保留子宫及生育能力,一次性清宫干净,术中出血少,疗效满意。结论:宫颈注射MTX联合宫腔镜技术是治疗宫颈妊娠的一种具有临床价值的保守治疗方法。

IL-33敲除促进弓形虫感染小鼠腹腔巨噬细胞的M1偏移

目的研究IL-33敲除(IL-33^(-/-))对小鼠急性弓形虫感染腹腔巨噬细胞(pMφ)极化的影响,探讨IL-33^(-/-)在弓形虫感染免疫应答中的作用。方法收集C57BL/6IL-33^(-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠pMφ,各分为弓形虫感染组和未感染组,比较各组pMφ感染率、细胞因子及表面分子表达水平的变化。结果 IL-33^(-/-)小鼠pMφ弓形虫感染30 min后的感染率低于WT小鼠(t=-2.49,P<0.05);IL-33^(-/-)小鼠感染组pMφM1型标志物NO(t=29.71,P<0.05)、MHCⅡ(t=19.05,P<0.05)、TLR4(t=8.34,P<0.05)表达高于WT小鼠感染组,而M2型标志物CD206表达低于WT小鼠感染组(t=-3.34,P<0.05);感染组小鼠pMφNO、IL-10、TNF-α、MHCⅡ类分子及CD86的表达高于各自未感染对照组;IL-33敲除和弓形虫感染对IL-33^(-/-)与WT小鼠pMφMHCⅡ(F=5.25,P<0.05)、TLR2(F=14.88,P<0.05)分子的表达有交互作用。结论在急性弓形虫感染早期,IL-33敲除驱动小鼠pMφ向M1方向极化,促进pMφ抗感染。

大莲湖池杉林湿地土壤可培养细菌的分离与鉴定

采用牛肉膏蛋白胨培养基培养,从大莲湖池杉林土壤中共分离得到20个菌落形态不同的菌株。通过对这些菌株的形态、培养特征、生理生化特征的研究以及16S rDNA序列分析,初步确定这些菌株分别属于假单胞菌属(Pseudomonas)、芽胞杆菌属(Bacillus)、红球菌属(Rhodococcus)、北里孢菌属(Kitasatosporia)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、黄杆菌属(Flavobacterium)、鞘氨醇杆菌属(Sphingobacte-rium)和丛毛单胞菌属(Comamonas)等9个属细菌。其中芽胞杆菌属和不动杆菌属细菌是优势菌,分离到的红球菌属、北里孢菌属、鞘氨醇杆菌属和丛毛单胞菌属细菌在国内湿地土壤中报道较少。

红色诺卡氏菌对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的:观察红色诺卡氏菌(N·R)及其提取物—细胞壁骨架(N-CWS)对小鼠巨噬细胞(Macrophage,M)吞噬功能的影响。方法:取BALB/C小鼠30只随机分成3组,分别为生理盐水对照组、实验A组(N-CWS450mg/kg·d-1)及实验B组(N·R5400mg/kg·d-1),连续灌胃给药20d后,检测小鼠腹腔M的吞噬百分率及吞噬指数。结果:实验A、B组与对照组的吞噬百分率和吞噬指数相比差异有统计学意义(P<0·05,P<0·01);A、B组间的吞噬百分率及吞噬指数差别均无统计学意义(P>0·05)。结论:N-CWS/N·R灌胃给药对小鼠的M吞噬功能均有促进作用。

DAMP-PRR-巨噬细胞途径与动脉粥样硬化斑块的易损性

动脉粥样硬化(As)是一种慢性炎症性疾病,并与自身免疫相关。易损斑块是大多数急性心血管事件的元凶。巨噬细胞对As斑块的易损性起关键作用。本文重点论述巨噬细胞通过"DAMP-PRR"途径如何影响As斑块的易损性,探讨新的抗As治疗策略。

利用MR&R微处理系统取出根管内分离器械四手操作的护理配合体会

目的探讨利用MR&R微处理系统取出根管内分离器械的四手操作护理配合要点,提高分离器械的取出率。方法对38例利用MR&R取出根管内分离器械的病例进行回顾,结合其治疗过程,总结分析利用MR&R微处理系统取出根管内分离器械四手操作护理配合要点。结果经医护密切配合,成功取出根管内折断器械33例,成功率86.84%(33/38);失败5例,其中2例患者患牙发生器械二次折断,1例患者患牙发生断针并推出根尖孔,另2例患者患牙建立旁路。结论四手操作护理极大地提高了医生工作效率,完善的术前评估、专业的术中配合及科学的术后指导是四手操作护士配合医生利用MR&R微系统取出根管内分离器械的护理重点。

VEGF、AR在外阴上皮内非瘤样病变HIFU治疗前后的表达变化及其意义

【目的]探讨血管内皮生长因子（VEGF）、雄激素受体（AR）在外阴上皮内非瘤样变（NNEDV）高强度聚焦超声（HIFu）治疗前后的表达变化及其意义。【方法】采用免疫组化（SP）法检测VEGF、AR在外阴正常组织、NNEDV病变前、治疗后的表达并比较，分析其临床意义。【结果]VEGF在NNEDV组织中表达高于正常组织（P〈O．01），治疗后1个月明显高于治疗前及正常组织（P〈O．01），治疗后3个月表达高于正常组织，但低于治疗后1个月（P〈0．05），与治疗前比较差异无统计学意义（P〉0．05）；AR在NEDv及正常组织中表达比较差异无统计学意义（P〉0．05），治疗后1个月与治疗前、正常组织比较也无统计学差异（P〉0．05），治疗后3个月明显高于治疗前、治疗后1个月及正常组织（P〈0．01）；治疗后3个月病变组织皮肤形态基本恢复正常。【结论】HIFU治疗NNEDV有效，治疗后1个月VEGF明显增加，治疗后3个月反馈性下降近正常水平，治疗后皮肤基底层AR表达的增加，可能是其治疗该病变的机制之一。

大莲湖池杉林土壤细菌的季节性变化

应用稀释平板法对大莲湖池杉林湿地土壤细菌进行分离,采用16S rDNA序列分析法对所分离细菌进行鉴定。结果表明,池杉林不同季节土壤细菌种类和数量有差异。其中夏季土壤细菌数量和种类最多,春、秋季次之,冬季最少。四个季度共分离得到60株菌株,分属15个细菌种属,分别为芽胞杆菌(Bacillus),假单胞菌(Pseudomonas),黄杆菌(Flavobacterium),红球菌(Rhodococcus),北里孢菌(Kitasatosporia),金黄杆菌(Chryseobacterium),不动杆菌(Acinetobacter),鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium),丛毛单胞菌(Comamonas),伯克霍尔德氏菌(Burkholderia),链霉菌(Streptomyces),沙雷氏菌(Serratia),肠杆菌(Enterobacter),窄食单胞菌(Stenotrophomonas)和节杆菌(Arthrobacter)。

显微根尖外科手术的护理

总结了2009年9月～2011年9月在四川大学华西口腔医学院牙体牙髓科行显微根尖外科手术的30例慢性根尖周病患者的手术护理。主要包括在手术过程中护士应根据不同的牙位做好环境、物品及患者的准备工作,为患者选择方便舒适的体位,术中严格遵守无菌操作原则,始终保持术野清晰,准确无误的传递器械,调拌合格的充填材料,术后对患者进行详细的健康指导并对显微镜进行专业保养。认为规范的显微根尖外科手术护理技术可极大地缩短手术时间,保障手术成功。

国内外牛传染性鼻气管炎的流行现状及防控措施的研究进展

牛传染性鼻气管炎被OIE列为二类疫病,是一种急性、热性、接触性传染病。近年来,随着我国奶牛业的快速发展,规模化、集约化程度不断提升,IBR在我国广泛流行,给养牛业造成了巨大的经济损失。本文就国内外IBR的流行现状及防控措施作以综述,以期能为该病的防控提供依据,从而促进我国奶牛养殖业的健康发展。

铜绿假单胞菌两种保存方法的比较

铜绿假单胞菌亦称绿脓杆菌，为专性需氧菌。用传统半固体培养基保存绿脓杆菌的方法，一般3个月左右就需再次移种；若保存到半年则有存活率低、复苏后色素不明显、长期保存易发生变异等缺点。本研究目的在于用超低温甘油保存法与传统方法进行比较，以期寻找更适合绿脓杆菌保存的方法，以达到长期保存存活率高和保留细菌的生物学特性的目的。笔者应用超低温甘油保存法后，现已保存两年多，菌种存活率高达i00％，且细菌的微生物特性未发生变异，该方法明显优于传统的半固体保存方法，现报道如下。

HIFU治疗VINⅠ～Ⅱ的临床分析（附病例18例）

目的：探讨高强度聚焦超声治疗外阴上皮内瘤变（灾陨晕）Ⅰ～Ⅱ的临床疗效、无创性及安全性。方法采用海极星悦在云型超声治疗仪治疗18例灾陨晕Ⅰ～Ⅱ患者，观察治疗前后患者症状和体征的变化，探讨聚焦超声治疗的临床意义。结果临床治愈12例（66.7%），有效6例（33.3%），无效0例（0.0%），总有效率（100.0%）。有效的6例于术后6个月行第二次治疗，取得明显的临床疗效。结论高强度聚焦超声治疗技术治疗灾陨晕Ⅰ～Ⅱ是有效、安全、无创的。

红细胞免疫黏附试验在外周血T、B淋巴细胞鉴别中的应用

目的探讨快速鉴别外周血T、B淋巴细胞的可能性。方法利用红细胞免疫黏附试验。结果红细胞可直接与酵母菌结合:T淋巴细胞只能与结合有酵母菌的红细胞直接结合;而B淋巴细胞只能与酵母菌细胞直接结合。结论凡直接与结合有酵母菌的红细胞结合的淋巴细胞是T细胞,凡直接与酵母菌结合的淋巴细胞是B细胞。

牛传染性鼻气管炎病毒部分gB蛋白的原核表达及抗原性分析

为对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因进行原核表达,并对表达产物进行抗原性分析,利用笔者所在实验室已构建好的gB-BL21重组阳性菌落,进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对培养及诱导表达条件(IPTG最佳浓度、作用时间)等影响表达的因素进行优化,然后将表达的gB重组蛋白进行亲和层析纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,gB蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达蛋白的相对分子量约为32.4ku,与预期的蛋白大小一致。经BCA(聚氰基丙烯酸正丁酯)蛋白含量测定试剂盒测定,gB重组蛋白浓度为1.84mg/mL。Western Blot结果显示,纯化后的gB重组蛋白能被标准IBR阳性血清识别,说明表达的目的蛋白具有良好的反应原性,可作为IBRV检测的特异性抗原。试验为建立牛传染性鼻气管炎诊断方法及研究gB蛋白的功能特性提供了材料和技术理论支持。

IL-33缺陷调节小鼠抗弓形虫感染的CD8^(+)T细胞应答

目的探讨IL-33缺陷(IL-33^(-/-))对弓形虫感染小鼠的炎症反应和CD8^(+)T细胞功能的影响。方法C57BL/6野生型(Wild-type,WT)和IL-33^(-/-)小鼠分别设感染组和对照组,建立弓形虫感染模型,记录小鼠死亡时间,绘制生存曲线;分别取感染后48 h、96 h各组小鼠外周血及肝、脾组织,HE染色观察组织病理变化;微量样本多指标流式蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)及ELISA检测血浆炎症因子(IL-12P70、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、IL-6及IL-4)水平;qPCR检测小鼠脾细胞中弓形虫速殖子表面抗原-1(SAG-1)的mRNA水平;流式细胞术分析脾脏CD8^(+)T细胞穿孔素、颗粒酶和IFN-γ水平。结果与WT感染组小鼠比较,96 h时IL-33^(-/-)感染组小鼠脾脏SAG-1 mRNA表达降低(F=13.96,P<0.05),肝、脾组织的炎症改变较轻,生存时间延长(χ^(2)=6.87,P<0.01);与WT感染组小鼠比较,感染96 h时IL-33^(-/-)感染组血浆IL-4浓度升高较高(F=328.32,P<0.01),而TNF-α、IFN-γ、MCP-1均明显较低(F TNF-α=32.66、F IFN-γ=59.32、F MCP-1=43.78,均P<0.01);感染96 h,IL-33^(-/-)感染组小鼠脾脏CD8^(+)T细胞穿孔素(F=574.20,P<0.01)、颗粒酶(F=14.68,P<0.05)和IFN-γ(F=15.22,P<0.05)表达均高于WT感染组。结论在小鼠急性弓形虫感染中,IL-33抑制脾脏CD8^(+)T细胞应答,促进全身炎症反应。

生物发酵法改善菜粕品质的研究

通过生物发酵的措施来改善菜粕的营养价值。采用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母、黑曲霉、芬氏纤维微菌以及从土壤中筛选的三株菌（命名为T-1、T-2、T-3）分别对菜粕进行单菌固态发酵，以降低硫苷、单宁、粗纤维和提高酸溶蛋白、蛋白质溶解度为目标筛选出高效菌株，将这些高效菌株以不同比例进行混合，获得最优组合并优化其发酵条件，将发酵菜粕替代基础饲粮中25％、50％、75％、100％的未发酵莱粕，通过肉鸡饲养试验验证发酵菜粕的使用效果。结果表明：1）单菌发酵以地衣芽孢杆菌、T-1、芬氏纤维微菌的效果最优，其中地衣芽孢杆菌能显著降低硫苷、单宁的含量（P〈0．05），T-1能显著提高酸溶蛋白和蛋白质溶解度（19〈0．05），芬氏纤维微菌能显著降低粗纤维的含量（P〈0．05）；2）混菌发酵以地衣芽孢杆菌、芬氏纤维微菌、T-1按1：2：2的比例混合时效果最优，在混合菌液总有效菌数为10^9CFU／mL、接种量为10％、料水比为1：0．6、发酵温度为37℃的条件下，发酵48h时，硫苷降解率达89．4％（P〈0．05），单宁降解率为28．6％（P〈0．05），粗纤维含量由10．0％降至8．6％（P〈0．05），酸溶蛋白提高了254．0％（P〈0．05），蛋白质溶解度提高了31．6％（P〈0．05）；3）使用发酵菜粕替代未发酵菜粕后，显著提高了肉鸡1～21日龄的平均日增重（P〈0．05），显著降低了肉鸡1～21日龄的料重比（P〈0．05）。通过生物发酵能有效降低菜粕中的抗营养因子，提高其营养价值，发酵菜粕能改善肉鸡生长性能。

数智化转型背景下应用型财会人才培养的探索

随着数智化转型的快速发展,财会行业正面临着新的挑战和机遇。在这一背景下,培养具备应用型财会能力的人才成了高校教育的重要任务。应用型财会人才既要具备扎实的财会理论知识,也需要具备财会技术应用、数据分析、信息安全等相关技能。为适应数智化转型的需求,高校需要探索更有效的培养路径,使学生能够在实践中灵活运用财会理论知识。基于此,本文旨在为高校应用型财会人才培养提供有效的探索和实践路径,为财会行业的数智化转型提供更为坚实的人才支持。