脑室内注射高张盐水抑制近曲小管对水和钠的重吸收

实验在麻醉大鼠上进行。用锂清除率为指标观察脑室内注射高张盐水对近曲小管重吸收水和钠的影响。在切断单侧肾神经的动物中,脑室内注射高张盐水后的锂清除率与肾小球滤过率比值在去神经侧肾脏从0.37±0.04增加至0.51±0.05(P<0.01);神经完好侧肾脏则从0.26±0.03增加至0.31±0.04(P<0.05);双侧肾脏的肾小球滤过率、尿量、尿钠和尿钾量均增加,且去肾神经肾脏的增加幅度高于肾神经完好肾脏。在肾小管微穿刺实验中,脑室内注射高张盐水后,近曲小管末段小管液流量从24.42±1.84nl/min增加至31.86±3.09nl/min(P<0.01),小管液的渗透压无显著变化。以上实验结果表明,脑室内注射高张盐水引起的利尿、尿钠增多反应与肾小球滤过率增加和近曲小管对水、钠重吸收减少有关,体液因素在该反应中可能起主要作用。

用微量蒽酮法测定肾小管液中的微量菊糖

建立微量菊糖测定方法,是应用肾小管微穿刺技术从肾单位水平进行肾脏生理研究的一个技术基础。本实验对Dirks等人采用的微量蒽酮法作了改进。在752-C型分光光度计的光路上安置一个微量比色管,对10μl容积的蒽酮菊糖反应液进行比色。当菊糖含量在2ng至32ng范围内,菊糖含量与吸光度直线性关系(r>0.999)。菊糖平均回收率为101.2±3.5％,表明整个测定系统是准确的。在蒽酮菊糖反应液中加入一定量的肾小管液对菊糖的测定无明显干扰,因此在实际测定时,可将含菊糖的肾小管液直接与蒽酮试剂反应。在21只大鼠的近曲小管末端作微穿刺,用上述微量蒽酮法测得单个肾单位肾小球滤过率为34.9±1.8nl/min,与文献报道的范围符合,说明本方法适用于肾脏生理的研究。

管球反馈对肾小球血流动力学的影响及其机制

管球反馈的作用在于稳定进入远端肾小管的水和溶质的量。小管液溶质浓度或Nacl浓度变化可刺激致密斑部位的感受细胞,使入球小动脉的阻力发生变化,从而改变肾小球滤过率。管球反馈的敏感性也受某些生理或病理因素的影响。

刺激脑内渗透压感受器对大鼠浅表肾单位功能的影响

我们先前已在麻醉大鼠中用锂清除率方法从全肾水平证实,脑室内注射高张盐水(icv.HS)引起的利尿和利尿钠反应是由于肾小球滤过率增加和近球小管重吸收能力降低。本实验用肾小管微穿刺方法从肾单位水平进一步观察icv.HS对浅表肾单位的单个肾单位肾小球滤过率以及近曲小管和髓袢的重吸收的影响。实验在麻醉大鼠中进行。icv.HS后,单个肾单位肾小球滤过率从39.6±1.9nl/min增加至48.8±2.0nl/min(P<0.001);近曲小管末段小管液流量从20.5±1.4nl/min增加至28.4±2.0nl/min(P<0.001);小管液菊糖浓度与血浆菊糖浓度的比值从1.98±0.98降低至1.69±0.05(P<0.01)。根据上述数据计算得到的近曲小管重吸收分数从49.2±2.2％下降至41.7±1.8％(P<0.001),而近曲小管的绝对重吸收无明显改变。这些结果与用锂清除率方法获得的结果相符合。icv.HS后,髓袢的绝对重吸收升高,而重吸收分数下降。上述结果表明刺激脑内渗透压感受器可增加浅表肾单位的肾小球滤过率,并降低近曲小管的重吸收能力,从而增加髓袢的负荷,使髓袢的绝对重吸收增加。本实验结果不能排除icv.HS对髓袢的重吸收过程具有直接影响的可能性。

刺激脑内渗透压感受器对大鼠肾小管重吸收钠、氯、钾的影响

实验在麻醉大鼠上进行。用肾小管微穿刺技术观察到,脑室内注射高张盐水(icv.HS)后:(1)近曲小管末段钠残留分数从53.0±2.1％升高至66.0±2.9％(P<0.01);氯残留分数从65.4±3.4％升高至78.2±3.9％(P<0.05);钾残留分数和小管液渗透克分子浓度无显著变化。(2)远曲小管起始段钠残留分数从8.2±0.9％升高至13.6±1.8％(P<0.05);氯残留分数从5.4±0.8％升高至9.5±1.4％(P<0.05);小管液渗透克分子浓度从139.8±6.9mOsm/kg H_2O升高至181.3±15.6mOsm/kgH_2O(P<0.05);钾残留分数无显著变化。静脉注射速尿能消除icv.HS引起的尿钾增多反应,但不能消除icv.HS引起的利尿和尿钠增多反应。上述结果表明,刺激脑内渗透压感受器能抑制近曲小管中钠和氯的重吸收,并促进远曲小管及其以后部位的钠钾交换,导致尿钠排出增多和尿钾排出增多。

垂体在刺激脑内渗透压感受器引起的肾脏反应中的作用

实验在α氯醛糖和氨基甲酸乙酯混合麻醉的大鼠中进行。脑室内注射高张盐水(icv.HS)后,肾血浆流量、肾小球滤过率、尿量、尿钠排出量、尿钾排出量和渗透物质清除率均增加,游离水清除率下降。去除垂体后,icv.HS不再能引起上述肾脏反应。另外给大鼠静脉注射血管升压素(VP)拮抗剂(V_1和V_2受体拮抗剂),并不能削弱上述icv.HS引起的肾脏反应。脑室内注射高张盐水后,尿中多巴胺(DA)排出量无显著增多;给予多巴脱羧酶抑制剂苄丝肼也不能削弱icv.HS引起的肾脏反应。上述实验结果表明,在本实验条件下刺激脑内渗透压感受器引起的肾脏反应依赖于垂体的完整性,但看来并不依赖于外周的VP和DA,故垂体通过何种机制介导icv.HS引起上述肾脏反应,有待于进一步的研究。

刺激脑内渗透压感受器能降低大鼠管球反馈的敏感性

在麻醉大鼠肾脏近曲小管和远曲小管分别进行微穿刺,采集小管液。测定单个肾单位肾小球滤过率(SNGFR)。由于微穿刺部位对管球反馈造成的影响,在同一肾单位,采集近曲小管末段小管液测出的SNGFR值(SNGFR_p)比在远曲小管起始段测出的SNGFR值(SNG-FR_d)高,故可将在这两个部位测得的SNGFR值的差(SNGFR_(p-d))用作衡量管球反馈(TGF)敏感性的间接指标。脑室内注射高张盐水(icv.HS)后,SNGFR_(p-d)减小,表明脑内渗透压感受器受刺激可使TGF的敏感性降低。静脉注射速尿后,icv.HS不再引起肾血浆流量和肾小球滤过率的增加,但仍能引起尿钠排出增多。上述结果表明,刺激脑内渗透压感受器可通过减弱TGF导致肾脏血流动力学的改变,而其增加尿钠排出的效应则是通过抑制肾小管的重吸收实现的。