低氧环境对子痫前期大鼠肾脏病理及内皮PAS结构域蛋白1表达的影响

目的:探讨低氧对子痫前期(PE)孕鼠肾脏病理和EPAS1蛋白表达的影响,进一步研究EPAS1可能参与PE发病机制。方法:低氧1周、2周、3周组SD孕鼠分别于妊娠第14天、7天、1天进行低氧处理,孕鼠腹腔内注射L-NAME建立PE动物模型作为PE组,腹腔内注射0.9%氯化钠溶液作为正常妊娠组;研究分组分为正常妊娠组和PE组2组,根据不同低氧处理,正常妊娠组分为常氧正常妊娠组、低氧1周正常妊娠组、低氧2周正常妊娠组、低氧3周正常妊娠组4组;PE组分为常氧PE组、低氧1周PE组、低氧2周PE组、低氧3周PE组4组。每组5只孕鼠。免疫组化法检测EPAS1蛋白表达情况,HE染色法和PAS染色法染色后观察肾脏病理改变。结果:各低氧PE组孕鼠肾脏组织中EPAS1蛋白高表达率高于常氧组,肾小球增大程度、肾小球囊腔缩小程度、肾小球系膜基质增生程度重于常氧组,差异均有统计学意义(P<0.05);各低氧PE组孕鼠肾脏组织中EPAS1蛋白高表达率、肾小球增大程度、肾小球囊腔缩小程度、肾小球系膜基质增生程度两两对比,差异无统计学意义(P>0.05);同条件下PE组孕鼠肾脏组织中EPAS1蛋白高表达率高于正常妊娠组,肾小球增大程度、肾小球囊腔缩小程度、肾小球系膜基质增生程度重于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:低氧可引起PE孕鼠肾脏组织EPAS1蛋白表达升高和病理损伤加重,可能是高原地区PE发病率升高的原因之一。PE孕鼠肾脏EPAS1蛋白表达和肾小球增大、囊腔减小、系膜基质增生程度随着低氧时间延长不发生变化可能与低氧习服有关。PE组孕鼠中存在EPAS1蛋白过表达,可能通过影响肾脏病理参与PE发病机制。

关于建立子痫前期大鼠小鼠模型的研究进展

子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期独有的一种疾病,是导致孕产妇和围产儿发病和死亡的主要原因之一。其病因不明,终止妊娠是目前已知的有效治疗方法。随着社会的进步,人类对妊娠安全的要求逐渐增高,理想PE动物模型的建立无疑能为研究其病因、发病机制从而更好地预防或延缓疾病进展,降低母胎死亡率提高妊娠安全提供良好的基础和平台。大、小鼠因其经济、易获取、生存力强、妊娠周期短,所以被广泛应用于临床各大疾病动物实验中。参考国内外文献将PE大、小鼠模型归纳为子宫血流量减少、炎症免疫过度激活、血管内皮细胞损伤、血液高凝、基因修饰等模型,并就这类模型的构建方法及表型做一简要综述。

低氧环境下HLA-G及EPAS1参与大鼠子痫前期发病机制研究

目的探讨低氧对孕鼠胎盘组织人类白细胞抗原-G(HLA-G)及内皮PAS结构域包含蛋白1(EPAS1)的影响及参与子痫前期发病机制研究。方法将SD孕鼠随机分为常氧组,急性低氧组:48 h、72 h、1周组,慢性低氧组:2周、3周组,共6组;通过腹腔注射亚硝基左精氨酸甲酯(L-NAME)溶液建立子痫前期模型。运用无创血压仪测量孕鼠鼠尾动脉血压,全自动生化分析仪检测孕鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)值及尿蛋白值,免疫组化检测孕鼠胎盘HLA-G蛋白及EPAS1蛋白表达情况。结果①各子痫前期组孕鼠平均收缩压、平均舒张压及妊娠21 d尿蛋白均高于同条件正常妊娠孕鼠,差异有统计学意义(P<0.05),而低氧对孕鼠血压及尿蛋白无影响。②低氧环境下,孕鼠ALT、BUN值均发生改变,其中正常妊娠、子痫前期组孕鼠ALT、BUN值均在低氧72 h后开始上升,低氧1周升高达最大值,低氧3周下降,但仍比常氧组稍高(P<0.05)。③各子痫前期组与同条件正常妊娠组孕鼠比较,HLA-G蛋白表达阳性率均下降,差异有统计学意义(P<0.05);低氧亦影响孕鼠HLA-G蛋白表达阳性率,HLA-G蛋白阳性率整体呈先下降后上升的动态变化。④各子痫前期组与同条件正常妊娠组孕鼠比较,EPAS1蛋白表达阳性率均上升,差异有统计学意义(P<0.05);低氧亦影响孕鼠EPAS1蛋白表达阳性率,EPAS1蛋白阳性率整体呈先上升后下降的动态变化。结论低氧环境下孕鼠胎盘HLA-G蛋白整体表达呈先下降后上升的动态变化,急性低氧可能加重母体对胎盘产生免疫攻击性,但在机体适应低氧后,母体和胎盘免疫关系又恢复正常;EPAS1蛋白整体表达呈先上升后下降的动态变化,EPAS1对缺氧的高选择性压力的反应,可能引起对于高原缺氧的习服适应。

低氧对JEG-3细胞HLA-G表达及滋养细胞生物学行为的影响

目的:通过常氧及低氧条件下培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,检测低氧环境对滋养细胞人类白细胞抗原-G(HLA-G)的表达及增殖、侵袭行为的影响,探讨HLA-G参与低氧条件下子痫前期发生的分子机制。方法:根据氧浓度和处理时间进行分组,分为常氧组(20%O_2+5%CO_2+75%N_2)和低氧组(1%O_2+5%CO_2+96%N_2)的12小时、24小时、48小时和72小时,利用实时荧光定量PCR(qPCR)及蛋白质印迹法(Western Blot)检测两组JEG-3细胞中HLA-G mRNA及蛋白水平的表达,噻唑蓝法(MTT)及小室侵袭法(Transwell)检测各组细胞增殖活性和侵袭能力。结果:低氧组在48小时及72小时,JEG-3细胞中HLA-G mRNA及HLA-G蛋白水平较常氧组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与常氧组相比,低氧组在48小时及72小时的细胞增殖活性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);低氧组在72小时细胞侵袭能力较常氧组减弱明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:低氧环境影响JEG-3细胞HLA-G mRNA及蛋白水平的表达。JEG-3细胞经低氧处理后增殖活性及侵袭能力下降可能与细胞中HLA-G表达下降有关。低氧环境下HLA-G表达下降可能通过影响滋养细胞增殖活性及侵袭能力参与子痫前期的发生。

重组腺病毒介导的HIF-2α过表达对孕鼠的影响

目的通过重组腺病毒介导使低氧诱导因子-2α(HIF-2α)过表达,探讨其过表达对SD孕鼠的影响。方法将SD孕鼠随机分为重组腺病毒组、盐水组、空白腺病毒组,每组12只,于妊娠第9 d经鼠尾静脉分别注射100μL载有HIF-2α的重组腺病毒(1×10^(10)Pfu/只)、盐水、空白腺病毒(1×10^(10)Pfu/只),观测孕鼠血压、尿蛋白、肝肾功能情况及仔鼠均重变化,应用免疫组化法分析胎盘组织HIF-2α表达情况。结果妊娠第19 d,与空白腺病毒组、盐水组相比,重组腺病毒组血压、尿蛋白显著升高,仔鼠均重明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。空白腺病毒组与盐水组相比,孕鼠血压、尿蛋白、仔鼠均重无明显差异(P>0.05)。三组孕鼠ALT、ALB、BUN、Cr无明显差异(P>0.05),免疫组化结果提示重组腺病毒组HIF-2α表达高于盐水组、空白腺病毒组(P<0.05)。结论 HIF-2α过表达可使SD孕鼠产生子痫前期症状、胎儿宫内生长受限(IUGR),HIF-2α可能参与子痫前期发病机制。

子痫前期合并主动脉假性动脉瘤一例

一、病例摘要患者32岁,孕4产1,因停经34+3周,浮肿20 d伴血压升高10 d,于2017年2月4日12时收入青海大学附属医院产科。未定期产检。患者20 d前无明显诱因出现双下肢略水肿,并偶伴头晕,分别于10、1 d前测血压为160/110mmHg、170/110 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),测尿蛋白均为3+,患者拒绝处理。