PPARγ配体对1型糖尿病大鼠的治疗作用探讨

目的探讨PPARγ配体罗格列酮对STZ诱导的1型糖尿病大鼠胰腺β细胞的保护作用及其机制。方法实验用STZ诱导1型糖尿病大鼠动物模型,以罗格列酮5mg.kg-1.d-1连续给药30d。记录体质量和禁食血糖的变化。治疗第31天(停药后第1天)及治疗第61天取材观察胰腺形态学变化,应用免疫组织化学染色显示胰岛β细胞和nNOS的表达情况。结果与未治疗糖尿病动物相比,罗格列酮治疗组大鼠的糖尿病体征显著减轻,胰腺未见明显的病理改变,胰岛内胰岛素阳性细胞数量增多、接近正常水平,与此同时,胰腺内一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性降低,而nNOS表达增强。结论罗格列酮对STZ诱导的1型糖尿病大鼠胰岛有一定的保护作用,其机制可能是通过抑制巨噬细胞内iNOS的活性,减轻胰岛的炎症反应,避免β细胞损害,促进胰岛功能的恢复。

血小板衍化生长因子α受体的研究进展

血小板衍化生长因子（platelet derived growth factors，PDGF）能促进成纤维细胞、平滑肌细胞等多种组织细胞的分裂、增殖、迁移、合成并分泌细胞外基质、增加细胞黏附力，在人胚胎发育和正常生理活动中起着极其重要的作用。生成的PEGF以自分泌和／或旁分泌的方式激活血小板衍化生长因子受体（platelet derived growth factors receptor, PDGFR）而发挥作用。

成体干细胞治疗糖尿病的实验研究

糖尿病是严重危害人类身心健康的常见病、多发病，其治疗的关键是胰岛细胞的再生，以阻止糖尿病的发展和并发症的发生。近来胰腺或胰岛细胞移植技术在糖尿病治疗上已经取得了一些进展，但供体细胞来源不足和免疫排斥反应等困难却极大地限制了这种方法的应用。而患者自身干细胞极强的自我更新能力及多向分化潜能无疑为解决以上问题带来了希望。

成体干细胞的可塑性研究

近年越来越多的研究表明不同组织中存在的成体干细胞不仅具有自我更新和不断增值的能力,还具有跨胚层分化的能力,这为临床移植医学提供了新的思路。未来医学中,应用成体干细胞及其衍生的组织或器官替代受损的组织细胞治疗急慢性疾病将成为可能。

胚胎小肠Cajal细胞的发育研究

目的 研究人胚胎小肠Cajal细胞的发育变化规律。方法 采用全层铺片结合切片的免疫细胞化学技术。结果 Cajal细胞呈酪氨酸激酶受体 (Kit)和波形蛋白 (vimentin)免疫反应阳性。在胚胎发育早期 ,Cajal细胞较少 ,为单层 ,稀疏分布于肌间神经丛周围 ,细胞为梭形 ,可见两个短而小的突起 ,未见分支 ;随着胎龄的增加 ,Cajal细胞数量增多 ,胞体增大 ,突起伸长 ,并出现分支。此时 ,肌间神经丛周围的Cajal细胞出现两层 ,其长轴彼此垂直 ,分别平行于环行肌和纵行肌。与此同时环行肌层内亦可见少许Cajal细胞 ;出生前 ,肌间神经丛部位的Cajal细胞接近成熟 ,两层细胞的突起进一步增多、伸长 ,彼此间形成与成人相似的完整的细胞网络。此时深肌丛附近亦可见少量Cajal细胞。结论 人的小肠Cajal细胞发育有一定的时间顺序 ,即肌间神经丛周围最先出现 ,肌内次之 ,深肌丛较晚 ,出生前肌间神经丛周围的Cajal细胞已经接近成熟。这种发育演变若发生异常 ,可能导致某些胃肠动力障碍性疾病。

幼鼠癫痫持续状态成年后脑内髓鞘变化的研究

目的探讨致癫痫持续状态幼鼠(status epilepticus,SE)成年后发展为自发反复性癫痫发作(spontaneous recurrent epileptic seizure,SRS)的大鼠脑内髓鞘的变化。方法采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射出生后20～28d体质量(70±5)g雄性SD幼鼠SE模型,应用多道生理信号采集处理系统检测大鼠脑电图(electroencephalogram,EEG)异常活动波,采用Nissl染色方法观察脑内神经元的变化,证实SRS模型大鼠诱导成功;应用卢卡斯快蓝(luxol fast blue,LFB)染色及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学染色等技术观察脑内髓鞘的变化。结果 SRS模型组脑电图与正常对照组相比,可见频发尖波、棘-慢、尖-慢综合波;Nissl染色显示神经元数目在海马CA1(242.1±33.6)、CA3(354.8±26.8)和齿状回门区(61.8±8.3)减少(P<0.01),部分细胞变性和坏死。LFB染色可见SRS模型组在胼胝体(callosumcorpus,cc;0.162±0.017)、扣带回(cingulated gyrus,cg;0.139±0.013)与海马白质(0.080±0.007)区域内的着色范围明显缩小,着色浅淡,与正常对照组相比有显著差异(P<0.01);MBP免疫阳性沉淀在cc(0.183±0.013)、cg(0.192±0.016)、第一躯体感觉皮质区(S1BF;0.076±0.012)和第一听皮质区(Au1;0.085±0.014)内的平均光密度值(OD)显著低于正常对照组(P<0.01)。结论致痫幼鼠成年后伴有慢性癫痫发作可造成中枢神经系统髓鞘脱失。

慢传输型便秘患者结肠壁内Cajal细胞的形态学研究

目的 慢传输型便秘 (STC)患者乙状结肠壁内Cajal细胞 (ICC)的形态学研究。方法 全层铺片、冰冻切片的免疫细胞化学染色及透射电镜观察。结果 正常成人乙状结肠壁内ICC主要分布在环肌内侧面与粘膜下层之间 (ICC SM)、环肌层内 (ICC CM)、纵肌层内 (ICC LM)及肌间神经丛周围 (ICC MP)。STC乙状结肠壁内ICC的数量均较正常对照组减少 ,其中 ,ICC SM和ICC CM减少尤为显著 ,约减少 6 0 %。铺片显示ICC -MP不仅数量减少 ,且突起的分支亦减少 ,彼此间不能形成完整的细胞网络。电镜观察可见上述部位的Cajal细胞内溶酶体聚集、脂质沉积 ,ICC SM突起间的缝隙连接较小、数量减少。结论 本研究结果提示ICC的这些病理改变可能与STC的发生、发展有关 ,但是 。

C-KIT蛋白在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨CKIT蛋白在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测46例原发结直肠癌组织和30例癌旁正常组织的CKIT蛋白和CEA的表达。结果46例结直肠癌组织中,C-KIT蛋白表达率为15.2%(7/46),其中9例低分化结直肠癌组织中CKIT蛋白阳性表达率高达77.8%(7/9),而12例高分化、25例中分化结直肠癌组织及30例癌旁正常组织未见C-KIT蛋白表达;统计分析表明C-KIT蛋白的表达在不同肿瘤大小和临床分期的结直肠癌间无显著差异(P>0.05),而在不同癌细胞分化程度间差异显著(P<0.05)。结论表达C-KIT蛋白的结直肠癌细胞呈低分化趋向,提示以CKIT为靶点治疗低分化结直肠癌患者具有一定的可能性。

氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠成年后少突胶质细胞转录因子Olig2在脑白质区的表达

目的探讨氯化锂-匹罗卡品(lithium-pilocarpine,LI-PILO)点燃幼鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE),成年后发展为自发反复性癫痫发作(spontaneous recurrent epileptic seizure,SRS)的大鼠脑内转录因子Olig2的表达。方法采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射诱导幼鼠SE模型,应用多道生理信号采集处理系统检测大鼠脑电图(electroencephalogram,EEG)痫样活动波和Nissl染色方法观察神经元鉴定,证实SRS模型大鼠诱导成功;应用免疫组织化学染色技术观察少突胶质细胞(oligodendrocyte,OL)转录因子Olig2变化。结果 SRS模型组脑电图与正常对照组相比,可见频发尖波、棘-慢、尖-慢综合波;海马CA1、CA3和齿状回区Nissl染色显示神经元数目减少,部分细胞变性和坏死。SRS模型组在胼胝体与扣带回区域内Olig2的免疫组织化学染色细胞数量明显减少,与正常对照组相比有显著差异。结论氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠,成年后仍伴有慢性自发反复性癫痫发作的脑内少突胶质细胞转录因子Olig2的表达明显降低。

小肠缺血再灌注损伤导致Cajal间质细胞凋亡的实验研究

目的探讨小肠缺血再灌注损伤对Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)的影响。方法采用缺血60 min再灌注6 h(I60/R6h)、12 h(I60/R12h)和14 d(I60/R14d)的豚鼠小肠,通过免疫细胞化学和TUNEL法检测ICC的凋亡。结果I60/R6h豚鼠小肠可见少量TUNEL阳性ICC。I60/R12h可见较多的凋亡ICC,同时ICC细胞数量明显减少,细胞网络不完整。I60/R14d的ICC恢复正常数量和分布。不同时间点之间Kit/TUNEL双标阳性细胞数量存在显著差别(P<0.05)。结论小肠缺血再灌注损伤导致ICC凋亡,一段时间后ICC能够恢复正常。

坐骨神经损伤修复过程中髓鞘变化的形态学研究

目的 探讨坐骨神经损伤修复过程中髓鞘的形态学变化 ,并对髓鞘显示方法的应用价值进行评估。方法 制备大鼠坐骨神经损伤实验模型 ,采用锇酸染色、改良苏木精染色和镀银染色等三种髓鞘显示方法对伤后 30天、90天髓鞘的形态学变化进行比较研究。结果 应用三种方法均观察到伤后两组伤侧坐骨神经髓鞘形态结构同对照侧有明显差别。伤后 30天神经髓鞘溃变程度很高 ;伤后 90天 ,神经髓鞘形态结构接近正常。结论 三种髓鞘显示方法均能反映坐骨神经损伤修复过程中髓鞘的形态学变化。改良苏木精染色方法是显示髓鞘的形态结构及其与轴突关系的简捷有效的方法。锇酸染色方法不仅适用于显示髓鞘的形态结构 ,还可进行形态计量分析。

神经元尼氏染色法在坐骨神经损伤研究中的应用

目的 探讨神经元尼氏染色法在外周神经损伤研究中的应用。方法 建立坐骨神经切断损伤模型，脊髓Ｌ４－６腰膨大连续石蜡切片，焦油紫尼氏染色的方法。结果 坐骨神经切断损伤后，脊髓Ｌ４－６腰膨大前角外侧大、中型神经元较正常对照组数量减少，存活率下降，细胞轮廓不清，尼氏体模糊。结论 焦油紫染色显示尼氏体的方法适用于坐骨神经损伤时脊髓腰膨大前角神经元的形态学研究。

胎儿小肠Cajal细胞的细胞学特征研究

胃肠运动与心脏相似具有自主节律性，有类似的起搏细胞和兴奋传导系统担负调控作用。近年研究表明，胃肠道Cajal细胞能产生自发性电慢波(slow wave)，可能为胃肠运动的起搏细胞，参与调节胃肠运动。大量研究表明许多胃肠功能性疾病例如贲门失弛缓症、糖尿病性胃轻瘫、假性肠梗阻、先天性巨结肠、慢性便秘等均属于胃肠动力障碍所致。

Cajal细胞再生的形态学研究

近年来的研究表明，胃肠壁内Cajal细胞(Interstitial cells of Cajal，ICC)作为胃肠运动自主节律性的起搏细胞和兴奋传导细胞，具有产生电慢波，参与兴奋传递的作用。已证实Cajal细胞减少和损伤与胃肠道运动功能障碍性疾病有关，但Cajal细胞损伤后的增殖和修复过程及其影响因素尚不清楚。本研究选择4～8周龄的雌性豚鼠，