大鼠骨髓间充质干细胞向类肝细胞体外诱导分化

目的:观察不同条件下骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化为类肝细胞的差异.方法:Wistar大鼠24只随机均分为3组,分别为正常对照组、肝纤维化模型组、自拟中药干预组.采用CCl4乳剂皮下注射建立肝纤维化模型.造模成功后中药干预组采用丹金舒肝胶囊药液灌胃治疗.治疗结束后剖杀大鼠,留取大鼠肝脏标本,HE染色观察各组病理改变.采用密度梯度离心法和贴壁法分离各组大鼠的MSCs,经培养传代获得纯化的MSCs.各组纯化的MSCs采用HGF、FGF-4进行诱导培养.留取15、21、27d细胞培养液进行白蛋白(Alb)、甲胎蛋白(AFP)检测;于27d收集细胞爬片,进行糖原染色和CK-18免疫细胞化学染色.结果:3组15、21和27d各MSCs诱导组AFP水平均高于MSCs非诱导组(P<0.01),其中21dAFP水平最高(肝纤维化模型组:48.94±0.08vs9.90±0.09;中药干预组:49.86±0.29vs8.69±0.62;正常对照组:38.65±0.33vs9.04±0.11,均P<0.01);3组15d各MSCs诱导组与MSCs非诱导组白蛋白水平无统计学意义;21d、27d各MSCs诱导组白蛋白水平均高于MSCs非诱导组(1.11±0.08vs0.32±0.00,1.25±0.04vs0.32±0.00,1.06±0.03vs0.33±0.00;1.52±0.02vs0.33±0.00,1.79±0.01vs0.31±0.03,1.63±0.04vs0.32±0.01,均P<0.01),27d最高.27d各MSCs诱导组糖原染色阳性,免疫细胞化学染色CK-18均阳性,而MSCs非诱导组糖原染色、CK-18均阴性.从AFP、Alb水平综合比较,3组诱导效果发现自拟中药干预组优于其他2组.结论:HGF、FGF-4可在体外诱导实验性大鼠的MSCs分化为具有肝细胞样细胞表型和功能的类肝细胞;自体MSCs可以作为治疗临床重症肝病的一种细胞来源,而临床联合中药复方治疗可能会使MSCs体外诱导的效果更为理想.

蜡状芽孢杆菌毒株的致病机理及检测方法

蜡状芽孢杆菌系无荚膜的革兰氏阳性菌,是最常见的食源性病原菌之一。致病性菌株能产生呕吐毒素和肠毒素,临床上可分为致呕吐型和腹泻型。研究病原性蜡状芽孢杆菌的致病机理,有助于了解其致病途径,从而改进和完善检测方法和诊治途径。通过综述蜡状芽孢杆菌几种毒素的致病机理,整理了一套蜡状芽孢杆菌致病毒株的鉴定检测技术方法:用鉴定平板等传统的鉴定方法将蜡状芽孢杆菌检出,应用先进的PCR和免疫方法检测毒素基因及毒蛋白,通过荧光多重PCR提高灵敏度和准确性等,以期加强食品安全。

健康教育有效干预支气管哮喘患者的疗效

目的强调健康教育在支气管哮喘患者治疗护理过程中的重要性。方法204例支气管哮喘患者随机分为两组,对照组只做一般护理常规,干预组在一般护理常规的基础上予加强健康教育。结果干预组患者治疗有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论健康教育能有效地干预支气管哮喘患者的治疗效果,减少支气管哮喘的发作,提高治愈率及生活质量[1]。

不同诱导条件对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导类肝细胞的影响

目的:探讨实验性大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外培养、诱导的最优条件,为MSCs治疗临床重症肝病患者提供参考依据.方法:采用密度梯度离心法和贴壁法分离大鼠MSCs,经培养传代获得纯化的MSCs。采用析因实验,设不同诱导时间、不同浓度的FBS、不同浓度的细胞因子为3个因素,每个因素设不同水平,对纯化的MSCs进行分组诱导培养.留取15、21、27 d细胞培养液进行白蛋白(Alb)、甲胎蛋白(AFP)检测:于27 d时收集细胞爬片,采用过碘酸希夫(PAS)实验进行糖原染色和免疫细胞化学染色检测MSCs中CK-18和CK-19.结果:诱导15、21、27 d,各MSCs诱导组AFP水平均高于MSCs非诱导组(P<0.01),21 d诱导组AFP水平最高:15 d各MSCs诱导组与MSCs非诱导组白蛋白水平无统计学意义,21、27 d各MSCs诱导组白蛋白水平均高于MSCs非诱导组(P<0.01),27 d诱导组白蛋白水平最高.27 d各MSCs诱导组糖原染色阳性,免疫细胞化学染色CK-18、CK-19均阳性,而MSCs非诱导组糖原染色、CK-18、CK-19均阴性.多因素方差分析表明,MSCs体外最佳诱导条件为含200 mL/L FBS的DMEM+肝细胞生长因子(HGF)20μg/L+成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)20μg/L.结论:HGF和FGF-4可在体外诱导实验性大鼠MSCs分化为具有肝细胞样细胞表型和功能的类肝细胞:不同浓度的FBS、HGF和FGF-4影响MSCs的体外分化;MSCs可作为治疗临床重症肝病的一种细胞来源.

肝纤维化大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导为类肝细胞

目的观察正常、肝纤维化模型组大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化为类肝细胞的差异。方法Wistar大鼠随机分为对照组和肝纤维化模型组。用皮下注射CCl4乳剂建立肝纤维化模型。用密度梯度离心法和贴壁法分离大鼠的MSCs,经培养传代获得纯化的MSCs。用肝细胞生长因子(HGF)和成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)诱导培养纯化的MSCs。留取15、21和27 d细胞培养液进行白蛋白(Alb)、甲胎蛋白(AFP)检测;于27 d收集细胞爬片,进行糖原染色和免疫细胞化学染色检测MSCs中CK-18、CK-19。结果于诱导15、21和27 d,2组经诱导培养的MSCs AFP水平均高于未诱导的MSCs(P<0.01),其中21 d AFP水平最高;而白蛋白水平21和27 d 2组经诱导培养的MSCs均高于未诱导的MSCs(P<0.01),15 d无差异,27 d最高。27 d 2组经诱导培养的MSCs糖原染色和CK-18、CK-19免疫细胞化学染色均阳性,未诱导的MSCs糖原染色、CK-18、CK-19均阴性。从AFP、白蛋白水平综合比较,正常和肝纤维化模型组大鼠MSCs诱导效果无明显差别。结论HGF、FGF-4可在体外诱导肝纤维化大鼠的MSCs分化为具有肝细胞样细胞表型和功能的类肝细胞。

长期氧疗对慢性阻塞性肺病患者的疗效分析及护理

目的探讨长期氧疗对慢性阻塞性肺病(COPD)患者的疗效及护理。方法对46例COPD稳定期患者进行3年的长期氧疗,于长期氧疗前及长期氧疗后观察患者住院次数、呼吸困难改善情况、动脉血气分析及血浆白蛋白的变化情况。结果氧疗后1、2、3年与氧疗前基础值比较,患者住院次数减少,呼吸困难等临床症状显著减轻,低氧血症改善,营养状况好转。结论合理使用长期氧疗对COPD患者有良好的治疗作用,可提高患者生活质量;而重视心理护理,加强氧疗的护理及出院指导是护理的关键。

肝干细胞的基础及应用研究

肝脏具有强大的再生能力．很早就有人提出肝千细胞存在的假说。1958年Wilson和Leduc在研究小鼠营养性肝损伤的修复机制中发现，增殖的毛细血管细胞（终末胆管细胞）具有干细胞样特性，可分化为肝细胞及胆管细胞，于是首次提出原始肝细胞的概念。这一研究提示肝内可能存在具有双向或多向分化潜能的肝干细胞或肝祖细胞。从定义上讲，肝干细胞应当具有无限增殖能力及多向分化潜能。体内有多种细胞符合肝千细胞的特征，如肝脏胚胎发育过程中出现的胎肝干细胞及成肝细胞、成年肝内存在的兼件肝干细胞及其子代细胞卵圆细胞、特定情况下的成熟肝细胞和骨髓／造血干细胞等。

恩替卡韦治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化1例

根据目前资料统计，全世界有3.5亿人是HBV携带者，其中约30%的HBV感染者可逐渐发展为进展性或致死性肝脏疾病，如肝硬化和肝细胞癌。我国CHB肝硬化患者约占全国乙型肝炎患者的15%。肝硬化可分为代偿期和失代偿期，而失代偿期乙型肝炎肝硬化是由于HBV持续复制、肝炎反复活动而发展形成的，属于肝病晚期，该时期患者并发症较多，预后较差，治疗困难且费用高，5年累计生存率仅为14%左右。高病毒载量是发生CHB肝硬化的独立风险因素。当前中国及国际指南[1-3]均达成共识，失代偿期CHB肝硬化患者需长期甚至终生抗病毒治疗，从而最大限度的抑制和清除病毒，改善患者的生活质量，延长生存期。

肝炎肝硬变腹水并发原发性腹膜炎的治疗分析

目的:探讨肝炎肝硬变腹水并发原发性腹膜炎应用第3代头孢菌素类药物的治疗效果。方法:31例肝炎肝硬变腹水并发原发性腹膜炎患者应用头孢三嗪或头孢氨噻肟静脉滴注治疗。疗程10～14d。结果:治愈20例 (64.5％),死亡11例(35.5％),其中死于感染性休克3例,上消化道出血1例,肝性脑病5例,肝肾综合征2例。结论:第3代头孢菌素类药物——头孢三嗪和头孢氨噻肟是治疗肝炎肝硬变腹水并发原发性腹膜炎的理想药物。

肝炎肝硬变并发上消化道出血治疗分析

目的:讨论肝炎肝硬变并发上消化道出血多种治疗方法的疗效。方法:48例肝炎肝硬变并发上消化道出血患者均先行内科保守治疗,采用垂体后叶素加西咪替丁或洛赛克。无效者采用食道胃底曲张静脉硬化剂治疗(EIS)或套扎治疗(EVL),或经颈静脉途径肝内门体分流术(TIPS)。结果:48例中采取内科保守治疗有效27例(56.3％)。无效21例(43.7％)中,3例行TIPS,止血有效,但2例于半年内死于肝性脑病,1例发生分流道阻塞;6例行EIS或EVL,止血有效;死亡12例,其中死于失血性休克4例,死于肝性脑病6例,死于肝肾综合症2例。结论:肝炎肝硬变并发上消化道出血,采取内科保守治疗,大多可取得良好疗效。无效者可采用EIS、EVL、TIPS能快速有效地控制出血,TIPS由于其术后肝性脑病及分流道再阻塞发生率高,中远期疗效不满意。

多房性囊性肾瘤的影像学表现与病理对照

目的 提高对多房性囊性肾瘤的影像学的认识。资料与方法 报告 2例经手术病理证实 ,且临床与影像学资料完整的多房性囊性肾瘤。分析其B超、IVU、CT、MRI检查所见征象 ,并与手术、病理所见对照 ,结合文献复习 ,对多房性囊性肾瘤作深入讨论。结果 影像学表现为肾区单发、多房性囊性病灶 ;囊肿边界清楚 ,与肾盏不相通 ,肾脏被挤压变薄 ,未受累区的肾脏正常 ;囊内容均匀或不均匀 ;囊间隔的密度比正常肾实质低 ,分隔完全且厚薄不一 ,可强化 ,但强化程度不及正常的肾组织。术后病理证实为多房性囊性肾瘤。结论 CT、MRI最能反映多房性囊性肾瘤的病理基础 ,是术前诊断该病的最佳方法。术前完善的影像学检查对该病的治疗方案及预后至关重要。

钨钼合金的超声检测及其缺陷分析

对钨钼合金典型缺陷的超声检测波形特征进行分析,结合典型缺陷的解剖和SEM形貌与EDS成分分析,验证了超声检测的波形特征分析结果。结果表明,超声检测能实现钨钼合金中典型缺陷的定位和类别判定。

火花等离子烧结技术制备的WC/Co纳米硬质合金

研究了火花等离子烧结工艺与YG10、YG12两种纳米硬质合金性能的关系。然后采用火花等离子烧结技术制备了硬质合金功能梯度材料,该材料由纳米WC/10%Co、纳米WC/12%Co、微米WC/15%Co混合粉以及不锈钢圆片烧结而成。显微硬度压痕显示该材料各层间的应力较小。

健康体检成人FibroScan检测肝脏硬度值与年龄、性别的相关性

目的界定正常人群肝脏硬度值参考范围及探讨年龄、性别对肝脏硬度值的影响。方法收集2012年10月1日^(-2)014年10月31日于中国石油天然气集团公司中心医院进行体检的健康人群1794例,经Fibro Scan进行肝脏硬度值(LSM)检测。因LSM的分布不服从正态分布,采用Wilcoxon秩和检验比较不同性别组间LSM;采用Kruskal-Wallis检验比较不同年龄段间LSM,采用Spearman秩相关分析LSM与年龄的相关性;采用单侧百分位法制订性别、年龄段的正常参考值范围。结果其中1590例LSM测定成功有效,有效率为88.63%,107例因肝功能异常被剔除,经分析发现男性受试者LSM高于女性受试者,男女间比较LSM差异有统计学意义(Z=-4.980,P<0.001);不同年龄段间LSM差异亦有统计学意义(χ~2=16.983,P=0.001),并证实年龄与LSM呈正相关(r=0.087,P=0.001),参考范围(P90)估计:成人≤7.1 k Pa,女性≤7.0 k Pa,男性≤7.2 k Pa;按年龄划分20~29岁≤6.8 k Pa,30~44岁≤6.7 k Pa,45~59岁≤7.8 k Pa,60~74岁≤8.8 k Pa。结论 LSM受年龄、性别影响,在体检人群中应用时需根据年龄、性别参考相应的医学参考值范围。

反相高效液相法测定甜叶菊中莱鲍迪苷A和甜菊糖苷的含量

目的建立反相高效液相色谱法（RP．HPLC）测定甜叶菊中莱鲍迪苷A（RA）和甜菊糖苷（ST）的含量。方法采用welchMaterials XB—C18柱（250mm×4．6mm，5μm），以乙腈．10mmol·L^-1磷酸酸钠缓冲液（pH=2．67，35：65，v～）为流动相，流速0．7mL·min^-1，检测波长210nm，柱温30℃，进样量5此。结果以外标法定量，RA和sT均在O．25～2．50mg·mL^-1与峰面积线性关系良好，r〉0．9995。RA回收率为100．3％，RSD为2．3％（n=6），ST回收率为101．0％，RSD为2．5％（n=6）。结论本方法快捷、准确、可靠，易操作，可用于甜叶菊及相关产品中RA和ST含量测定。

腹式呼吸训练对慢性阻塞性肺疾病的疗效

目的观察和比较长期腹式呼吸训练对早期轻度慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺功能的疗效。方法86例早期轻度COPD患者随机分为训练组46例,对照组40例。训练组对其进行3年腹式呼吸训练方法,对照组不进行腹式呼吸训练。结果腹式呼吸训练1、2、3年的FEV1均有显著改善(P<0.05),动脉血氧分压(PaO2)均有改善(P<0.05)。结论坚持长期腹式呼吸训练能改善早期轻度COPD患者的肺功能,提高患者生活质量。

阿德福韦酯在不同时间联合聚乙二醇干扰素α-2a治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者疗效的比较

目的探索阿德福韦酯(ADV)在不同时期联合聚乙二醇干扰素α-2a治疗HBeAg阳性的高病毒载量的慢性乙型肝炎患者的疗效。方法 28例A组患者在开始治疗时给予ADV和聚乙二醇干扰素α-2a联合治疗,29例B组患者开始只给予ADV治疗,在经过平均(11.8±3.2)w治疗使血清HBV DNA≤4 lg IU/ml时,再加入聚乙二醇干扰素α-2a治疗,两组均治疗48 w。结果两组基线HBsAg定量分别为(4583.2±1749.3)IU/ml和(4620.3±1812.4)IU/ml,差异无统计学意义(P>0.05),治疗结束时分别为[(759.4±72.3)IU/ml和(467.6±56.9)IU/ml,P<0.05];A组HBsAg血清转换率和HBeAg血清转换率分别为7.1%和35.7%,显著低于B组的(20.7%和62.1%,P<0.05);两组ALT复常率和HBV DNA阴转率无显著性相差(P>0.05)。结论对于HBeAg阳性的高病毒载量的慢性乙型肝炎患者,先经ADV治疗降低HBV DNA载量后再联合聚乙二醇干扰素α-2a治疗,可能经济、有效。

聚乙二醇干扰素α-2a联合阿德福韦治疗e抗原阳性高病毒载量慢性乙型肝炎给药时机的选择

目的 探索聚乙二醇干扰素α-2a（peg-IFNα-2a）和阿德福韦（ADV）联合抗病毒治疗高病毒载量的e抗原阳性慢性乙型肝炎的最佳时机。方法 将90例乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）≥7 log10 U/ml的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者分为3组：A组30例,为peg-IFNα-2a与ADV初始联合治疗组;B组30例,初期ADV单用,当HBV-DNA（4-5）log10 U/ml时给予联合peg-IFNα-2a;C组30例,初期ADV单用,当HBV-DNA（3-4）log10 U/ml时给予联合peg-IFNα-2a。3组联合治疗时间不少于48周。对比分析在联合治疗24周、48周时3组表面抗原（HBs Ag）血清转换率、e抗原（HBeAg）血清转换率、HBV-DNA阴转率、丙氨酸转氨酶（ALT）复常率的差异,并观察不良反应发生情况。结果 治疗24周时,3组HBs Ag血清转换率、ALT复常率和HBV-DNA阴转率差异无统计学意义（P〉0.05）;HBeAg血清转换率C组显著高于A、B组（P〈0.05）,A组略高于B组,差异无统计学意义（P〉0.05）。治疗48周时,HBs Ag血清转换率C组高于A组和B组,虽未达到统计学差异（P〉0.05）,但增高趋势明显;HBeAg血清转换率C组亦显著高于A、B组（P〈0.05）,A、B两组差异无统计学意义（P〉0.05）;3组ALT复常率和HBV-DNA阴转率差异无统计学意义（P〉0.05）。B组有2例,A、C组各有1例因白细胞、中性粒细胞和血小板下降经给予粒细胞集落刺激因子后血象改善仍不理想而停药;A、B组各有1例出现明显皮疹停药。3组未发生其他严重不良反应。结论 对于高病毒载量的e抗原阳性慢性乙型肝炎患者,首先给予ADV单药抗病毒治疗,待病毒载量下降至4 log10 U/ml以下时再联合Peg-干扰素α-2a治疗,可明显提高HBeAg血清转换率,HBs Ag血清转换率也有一定提高。

黄连素治疗慢性肝病并发糖尿病33例临床分析

目的 :观察黄连素治疗肝性糖尿病的临床效果。方法 :对控制饮食无效的肝性糖尿病患者 ,给予黄连素 0 .5 g/次 ,每日 3次口服 ,共治疗 3周。并与加用黄连素前血糖对照比较。结果 :患者应用黄连素治疗后血糖浓度较治疗前明显下降 (P<0 .0 1) ,且未见明显毒副作用。结论 :黄连素近期疗效观察为治疗肝性糖尿病的有效药物。