亚硝基胍诱变丙酸杆菌选育高产抑菌物质菌株

[目的]提高丙酸杆菌代谢物的抑菌活性,为薛氏丙酸杆菌代谢物的工业化生产奠定基础。[方法]以实验室保藏的薛氏丙酸杆菌H1310为出发菌株,采用亚硝基胍(NTG)进行诱变处理,待突变菌株长出后采用双层平板筛选法进行筛选,而后通过深层液体发酵对筛选到的菌株进行复筛。[结果]当最优的NTG诱变浓度为0.3 mg/m L时,致死率为90.69%。采用双层平板法,从3 564株菌落中挑选出87株突变株,进一步进行复筛,获得一株突变菌株,其代谢物抑菌活性达(28.30±2.47)AU/m L,比出发菌株提高43.87%。[结论]确定了丙酸杆菌NTG诱变选育的试验方法,获得一株抑菌活性高的遗传性能稳定的菌株。

大孔吸附树脂对发酵液中2-苯乙醇的吸附研究

从5种树脂中筛选出一种吸附量大的树脂HZ816。研究了HZ816树脂影响吸附及解吸的因素,得出结论如下:HZ816树脂对2-苯乙醇平衡吸附量为151.3 mg/g,最佳吸附pH值为5.1,吸附为快速平衡过程,1.5 h内即达到吸附平衡。通过静态平衡实验及等温线方程,得出HZ816树脂符合Freundlich方程。在不同温度下,HZ816树脂随温度的升高对2-苯乙醇的吸附量下降,表明它对2-苯乙醇的吸附是一个放热过程。最佳洗脱剂为无水乙醇,3倍树脂床体积的洗脱液可基本上将2-苯乙醇从树脂上洗脱下来,而且洗脱峰集中,无明显拖尾现象。

丙酸杆菌素的发酵及其分离纯化的初步探究

本文以薛氏丙酸杆菌(Propionibacterium shermanii)发酵液为原料,以抑菌活性为指标,利用分离纯化技术提取发酵液中小分子丙酸杆菌素。丙酸杆菌素初步分离纯化确定的最佳脱盐条件为:上样量5 m L,流速0.5 m L/min,收集方式为手动收集,电导率达到1.5 ms/cm时停止收集;Superdex peptide最佳凝胶过滤条件为:上样量500μL,流速0.5 m L/min,深孔板固定体积收集,每孔收集体积200μL。最终得到一种分子量为698.9556 u的丙酸杆菌素,其单位抑菌活性为初始的6.8倍,抑菌活性得率为10.9%。酶解实验表明纯化后的丙酸杆菌素仍保留抑菌活性,且对胃蛋白酶敏感。

怎样制作“月相仿真演示器”

关于教科版科学实践活动探索月球的奥秘＂观察月球运行情况＂的教学,教材上要求学生观测月相一段时间。然而,由于种种原因,大部分学生没有坚持按这一要求去做,影响了教学效果。为了让学生在短时间内观察到月相的变化情况,笔者经过研究,制作了＂月相仿真演示器＂,从而引导学生观察月球的运行情况,达到了良好的教学效果。

浅论教育创新

随着知识经济时代的到来,传统教育愈益显露弊端。本文试就教育创新的意义、教育创新的内涵两个方面作了探讨,并对创造与创新、教育观念创新、教育内容和方法创新、教育制度创新提出了看法。

慢病毒在大鼠胶质瘤细胞基因转导中的应用

目的应用慢病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因转导大鼠9L胶质瘤细胞。方法构建慢病毒表达质粒pLenti6/V5-TK并以PCR、酶切及测序等方法鉴定。利用ViraPowerTM慢病毒表达系统,将重组质粒与包装混合物(Packaging Mix)共同转染293T细胞生产假病毒颗粒,转染48 h后收集培养上清,用其感染大鼠9L胶质瘤细胞,以抗稻瘟菌素(BSD)筛选出9L-TK细胞。RT-PCR、Western blot方法检测TK基因在9L-TK细胞中的表达。用MTT方法测试更昔洛韦(GCV)对体外培养的9L-TK细胞杀伤效果。结果构建的重组质粒pLenti6/V5-TK经PCR、酶切及测序鉴定正确;该质粒与包装质粒共转染293T细胞获取的慢病毒滴度达2.7×105转导单位(TU)/ml。经BDS筛选获得的9L-TK细胞RT-PCR及Western blot结果显示TK基因表达阳性,且GCV对该细胞作用敏感。结论成功利用慢病毒实现了TK基因转导大鼠9L胶质瘤细胞。

基因芯片技术快速检测SARS病毒

以SARS冠状病毒TOR2株序列为设计标准 ,研制出用于检测SARS病毒的全基因芯片 ,芯片探针长度为 70nt,相邻探针序列重复 2 5nt,共 6 6 0条病毒探针 ,覆盖了SARS冠状病毒的全部序列 ,另外设计了内对照探针和阴性对照探针。应用该基因芯片对病人、出入境食品、动植物及其产品进行检测 ,结果表明基因芯片技术检测SARS冠状病毒灵敏度高、特异性强、准确性好 ,稳定快速 ,在检验检疫中应用是可行的。

基因芯片技术快速检测SARS病毒

本研究以SARS冠状病毒TOR2株序列为设计标准,研制出用于检测SARS病毒的全基因芯片,芯片探针长度为70nt,相邻探针序列重复25nt,共660条病毒探针,覆盖了SARS冠状病毒的全部序列,另外设计了内对照探针和阴性对照探针。应用该基因芯片对病人、出入境食品、动植物及其产品进行检测,结果表明基因芯片技术检测SARS冠状病毒灵敏度高、特异性强、准确性好,稳定快速,在检验检疫中应用是可行的。

高中生物角色轮组实验实践研究

在学校经常会看到两种极端的学生,一种学生热衷于动手,不停地在做,另一种学生却坐在座位上一动不动,看着人家做,也懒得发表自己的观点,这都与实验的分组有关。对此,可在高中一年级选取实验班与对照班,进行角色定岗轮组实验。通过实验发现,实施轮组实验,有利于提高高中生的生物思维能力。

全基因组扩增策略在基因芯片分析SARS冠状病毒实验中的应用

针对SARS冠状病毒的分子生物学检测是控制SARS流行的关键环节。为评价全基因组扩增对SARS微量样本检测的影响 ,采用 6 mer随机引物反转录 ,用加接头的随机引物合成第二链 ,再以接头序列为引物扩增并掺入荧光标记 ,最后与带有 70 mer探针的基因芯片杂交。此非特异方法基本覆盖了样本中的全部DNA ,结果发现SARS冠状病毒全基因组的扩增效果对基因芯片杂交结果的均匀性有较大影响 ,PCR循环次数增多会导致扩增均匀性的降低。分析了不同的引物对全基因组扩增均匀性的影响 ,探讨了全基因组扩增策略的缺陷。

自制加酶洗衣液的实验探究

墨汁染在衣服上很难洗净,可以引导学生自制加酶洗衣液去掉墨汁。利用红糖等自制生物酶,将生物酶与不同洗涤剂组合成7种不同配方的加酶洗衣液,通过比较效果测试结果发现,用自制生物酶溶液、肥皂、淀粉按1:1:1配制成的配方去墨汁效果最好。