泌尿道感染患儿病原菌分布及耐药性分析

目的分析泌尿道感染患儿尿培养病原菌的分布及耐药性。方法对2008年1月至2009年1月入院的300例患者的832份尿样,进行尿病原菌的培养,进行微生物鉴定和药敏系统进行鉴定和药敏试验。结果尿培养标本832份,共分离到病原菌149株,阳性率为17.91%。其中革兰阳性菌占20.81%;革兰阴性菌占75.84%;真菌5株,占3.36%。结论泌尿道感染患儿的尿培养病原菌仍以大肠埃希菌为主,并且多重耐药情况较为常见,临床应根据本地区的病原菌流行情况及耐药规律制定最佳的经验治疗方案。

血液学检验实践技能在临床应用的调查分析

通过对二级、三级医院检验科开展化验项目的调查分析,发现《血液学检验》教材中有关骨髓细胞形态学知识和技能在临床实际工作中广泛应用,而溶血性疾病和血栓与止血功能障碍性疾病的有关检验开展项目较少,同时一些新的技术如流式细胞术、骨髓活检等临床逐渐开展。因此,在教学内容和课时安排上,应及时改进和调整,加强临床应用技能的训练,以适应医学检验技术的发展。

梅毒螺旋体TpN15-47融合基因原核表达系统的构建

目的构建梅毒螺旋体TpN15-47融合基因及其原核表达系统。方法分别克隆TpN15和TpN47基因,利用T4连接酶构建TpN15-47融合基因,常规方法构建其原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白TpN15-47表达情况。结果连接的TpN15-47基因测序分析表明,插入的基因片段为TpN15-47融合基因,与GenBank报道相同。目的重组蛋白TpN15-47表达产量约为细菌总蛋白85.79%,主要以包涵体形式存在。结论所构建的原核表达系统能高效地表达TpN15-47融合蛋白,为后期梅毒螺旋体基因疫苗和临床检测试剂盒的研制奠定了基础。

膀胱肿瘤细胞mRNA致敏的树突状细胞体外抗肿瘤免疫反应

目的:研究小鼠膀胱癌BTT739细胞mRNA致敏的树突状细胞(DC)诱导特异性的抗肿瘤免疫反应。方法:使用rmGM-CSF和rmIL-4培养诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,从BTT739细胞中提取mRNA致敏DC,与小鼠淋巴细胞混合培养以诱导特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。采用MTT比色法和软琼脂法检测CTL对BTT739细胞的杀伤作用。结果:MTT比色法和软琼脂法检测结果显示:在靶细胞∶效应细胞不同浓度组中,BTT739实验组和对照组的OD值和肿瘤集落形成个数都有显著性差异(P<0 01,P<0 05),在靶细胞∶效应细胞的比例为1∶5、1∶25、1∶50和1∶100时,其杀伤率分别为25. 0%、36 .1%、45 .9% 和58 .2%;当效应细胞作用于AGS细胞时,其OD值无显著差异。结论:以膀胱肿瘤细胞mRNA致敏DC诱导CTL可有效杀伤膀胱肿瘤细胞。

宫颈癌组织中HPV16 URR基因多态性分析

目的 分析宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16型（HPV16）上游调控区（URR）基因多态性.方法 收集宫颈癌组织标本25例,提取DNA作为模板,聚合酶链反应（PCR）扩增URR目的 片段,扩增产物直接或构建克隆重组质粒后测序,以GenBank Blast软件分析序列.结果 宫颈癌组织标本中,HPV16检出率为72%（18/25）;检出10种HPV16 URR核苷酸突变模式,同源性在98.67%～99.69%之间;检出3个URR序列中的热突变位点,分别为G7520A（100.00%）、G7192T（100.00%）和T7713G（33.33%）.结论 宫颈癌组织中HPV16 URR存在多种基因突变类型和模式,可能与病毒致癌潜能及宫颈癌的发生相关.

ltB-TpN47融合基因原核表达系统的构建

目的分别从梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)临床菌株和大肠杆菌DNA中扩增ltB和TpN47基因,构建ltB-TpN47融合基因及其原核表达系统。方法采用PCR分别从上述菌株DNA中扩增TpN47基因和ltB基因片段、构建ltB-TpN47融合基因,T-A克隆后测定核苷酸序列。采用质粒pET32和宿主菌E.coliBL21DE3构建ltB-TpN47融合基因原核表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导表达。结果所构建的ltB-TpN47融合基因核苷酸序列与从GeneBank中查询并处理得出的数据基本一致。所构建的表达系统pET32-ltB-TpN47的目的重组蛋白(rltB-TpN47)表达量高达细菌总蛋白的1/3左右。结论本文成功地构建了ltB-TpN47融合基因高效原核表达系统。

孟鲁司特对哮喘大鼠骨髓CD_(34)^+细胞IL-4 mRNA和IL-4蛋白表达的影响

目的:研究IL-4mRNA和IL-4蛋白在哮喘大鼠CD34+细胞中的转录表达及孟鲁司特(montelukast,MK)对其表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为3组:哮喘组、MK组和正常对照组。用卵白蛋白制备大鼠哮喘模型。应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定血浆中IL-4和γ-干扰素(IFN-γ)浓度;用MiniMACS磁珠分选系统分离骨髓CD34+细胞;采用SYBR GREEN I荧光实时定量PCR法测定CD34+细胞中IL-4 mRNA的相对表达量。采用免疫组化技术测定CD34+细胞中IL-4蛋白的表达量。结果:哮喘组骨髓CD34+细胞中IL-4mRNA和IL-4蛋白的表达量高于其它各组(P<0.01);哮喘组除了IFN-γ水平低外,IL-4浓度和嗜酸性粒细胞(Eos)绝对值都是三组中最高的(P<0.01);除哮喘组外,其余组的各项指标相近(P>0.05)。IL-4 mRNA表达量与IL-4浓度、Eos绝对值呈正相关(P<0.01),与IFN-γ浓度呈负相关(P<0.01)。结论:哮喘大鼠骨髓CD34+细胞中IL-4mRNA的表达增强;孟鲁司特可以下调IL-4mRNA的表达,可能成为其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一。

乙型肝炎病毒DNA阳性患者血清中前S_1蛋白的检测及其临床意义

乙型肝炎病毒的外层衣壳上存在主要蛋白、中分子蛋白和大分子蛋白.这3种蛋白含有表面抗原(HBsAg)、前S1蛋白和前S2蛋白.中分子蛋白的N末端加上128个氨基酸序列构成大分子蛋白,这128个氨基酸序列就是前S1蛋白的所在部位.前S1蛋白的21-47肽段是HBV感染肝细胞的结合位点,与HBV侵入肝细胞有关.本文通过对212例乙肝患者血标本进行前S1蛋白、乙肝三系及HBV-DNA的联合检测,对它们作相关分析,并探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性患者血清中前S1蛋白的检测意义.

临床检验基础实践技能在临床应用的调查分析

对二级医院、三级医院检验科开展的化验项目进行调查，发现《临床检验基础》教材中一些实践技能项目已被逐渐淘汰或被其他方法替代，而一些原来不够重视的新项目已局部或广泛开展，尤其是检验仪器的使用越来越普遍，因此。应及时调整教学内容和课时，以适应医学检验技术的发展。

孟鲁司特和卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA表达的影响

目的研究孟鲁司特和卡介苗多糖核酸对哮喘大鼠血单个核细胞中信号转导子和转录激活子5b(STAT5b)mRNA和白细胞介素4(IL-4)mRNA的转录表达的影响。方法52只体重为140~200g清洁级Spra-gue-Dawley雄性大鼠,随机分为4组:哮喘组、孟鲁司特组、卡介苗多糖核酸组和正常对照组。用卵白蛋白制备大鼠哮喘模型。计数血中嗜酸性粒细胞(EOS);应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定血浆中IL-4和γ-干扰素(IFN-γ)浓度;采用SYBR GREENI荧光实时定量PCR法测定STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的相对表达量。结果哮喘组血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的表达量高于其他各组(P<0.01);在孟鲁司特组和卡介苗多糖核酸组中两者的表达量相近(P>0.05)。哮喘组除了IFN-γ水平低外,其余无论是STAT5b mRNA,IL-4 mRNA,EOS绝对值等都是4组中最高的(P<0.01);除哮喘组外,其余组的各项指标相近(P>0.05)。②STAT5b mRNA表达量与IL-4 mRNA表达量、IL-4浓度、EOS绝对值呈正相关(P<0.01),与IFN-γ浓度...