毛酸浆活性成分PPB诱导人肝癌HepG2细胞凋亡

目的研究毛酸浆活性成分PPB对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法用MTT法考察1,2,4,8,16和32μmol·L^-1 PPB分别作用于HepG2细胞6,12,24,36及48 h的生长抑制作用,并用MTT法考察1,2,4,8,16,32μmol·L^-1 PPB分别作用于人外周血单个核细胞24和48 h的生长抑制作用。7μmol·L^-1 PPB作用于HepG2细胞3,6,12及24 h后,采用Hoechst 33342,Mitotracker Deep Red,Rhodamine 123荧光染色结合高内涵细胞分析技术检测细胞数、线粒体质量、线粒体膜电位的变化。采用Western印迹法检测胱天蛋白酶3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白水平的变化。结果PPB对HepG2细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性,且24 h IC50为(6.78±1.96)μmol·L^-1,48 h IC50为(5.50±1.64)μmol·L^-1。PPB对人外周血单个核细胞无显著的细胞毒性,其24 h IC50为(252.34±126.24)μmol·L^-1,48 h IC50为(92.93±35.93)μmol·L^-1。高内涵细胞分析结果显示,与对照组相比,PPB处理后,细胞数显著下降(P<0.05),线粒体质量显著增加(P<0.05),线粒体膜电位显著降低(P<0.05)且呈时间依赖性。Western印迹结果显示,胱天蛋白酶3蛋白表达水平降低,PARP表达水平降低,活化形式的PARP表达水平升高。结论PPB可通过诱导人肝癌HepG2细胞凋亡而抑制其增殖,且PPB对人正常细胞无显著的细胞毒性。

毛酸浆内酯诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制研究

[目的]探讨毛酸浆活性成分毛酸浆内酯(PPB)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的机制。[方法]采用噻唑蓝法(MTT法)检测PPB对MCF-7细胞及人外周血单核细胞(hPBMC)增殖的影响;克隆形成实验考察PPB对MCF-7细胞克隆形成的影响;MTT法考察泛半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)抑制剂Z-VAD-fmk对PPB诱导MCF-7细胞死亡的作用;Western Blot法考察PPB处理后凋亡相关蛋白PARP、Caspase-7/8/9、Cytochrome c、Bax、Bcl-2、Fas及FADD的表达水平。[结果]PPB时间、剂量依赖性抑制MCF-7细胞生长,且对hPBMC无明显细胞毒性;PPB呈剂量依赖性地抑制MCF-7细胞克隆形成;PPB处理后,凋亡特征性蛋白PARP、原型Caspase-7蛋白表达量显著减少,而Cleaved PARP、Cleaved Caspase-7显著增加;同时内源性凋亡途径相关蛋白Bax、Cleaved Caspase-9、Cytochrome c表达量显著上调,而Bcl-2及Caspase-9原型形式显著下调。外源性凋亡相关蛋白Fas、Cleaved Caspase-8及FADD表达量上调,而Caspase-8原型形式显著下调;加入Z-VAD-fmk可显著逆转PPB诱导的MCF-7细胞死亡。[结论]毛酸浆活性成分PPB可以诱导MCF-7细胞发生内源性和外源性凋亡。

溶酶体相关膜蛋白LAMP1与肿瘤相关性的研究进展

溶酶体相关膜蛋白LAMP1 (lysosome-associated membrane protein 1)是主要存在于溶酶体膜上的一种高度糖基化的糖蛋白,参与细胞内多种生理和病理过程。近年有关LAMP1的研究日益增多,并且许多证据表明LAMP1与多种恶性肿瘤关系密切。LAMP1能调控肿瘤细胞的自噬,在肿瘤的转移与侵袭方面发挥作用,同时还可作为判断肿瘤进展及预后的标志。现对LAMP1与肿瘤相关的研究进行综述。

染料木素对油酸诱导HepG2细胞脂质蓄积的影响

目的:探讨染料木素改善油酸诱导的HepG2细胞脂质蓄积的作用及机制。方法:采用不同浓度的油酸处理HepG2细胞24 h诱导建立脂质蓄积模型,12. 5,25,50μmol·L-1的染料木素和油酸共同作用于细胞24 h,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率,尼罗红和DAPI双染观察细胞内脂滴蓄积情况,并采用试剂盒测定细胞内甘油三酯(TG)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定染料木素对脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL),激素敏感性脂肪酶(HSL),磷酸化HSL(p-HSL),沉默信息调节因子1(SIRT1),过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα),肉毒碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)蛋白表达的影响。结果:0. 5 mmol·L-1油酸及12. 5,25,50μmol·L-1染料木素作用细胞24 h对细胞存活率无明显影响;与正常组比较,模型组细胞中TG含量显著升高(P <0. 01),细胞内脂滴显著增多(P <0. 01),细胞中HSL的磷酸化水平明显下调(P <0. 05);与模型组比较,染料木素可明显降低细胞中TG含量(P <0. 05,P <0. 01),明显减少细胞内脂滴(P <0. 05),上调细胞中ATGL,p-HSL/HSL,SIRT1,PPARα,CPT-1蛋白表达水平(P <0. 05,P <0. 01)。结论:染料木素对HepG2细胞脂质蓄积模型有明显的改善作用,其机制可能通过上调ATGL,p-HSL/HSL,SIRT1,PPARα,CPT-1蛋白表达水平,进而促进脂质的水解和氧化代谢。

抗肿瘤药物诱导肿瘤细胞副凋亡机制研究进展

大多数化疗药主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡来发挥其抗癌作用。然而,癌细胞容易获得逃避凋亡的能力,对当前的化疗产生抵抗。在这种情况下,诱导癌细胞中非凋亡性细胞死亡方式以增强放化疗的敏感性、改善化疗耐药的现状,成为了新的研究热点。副凋亡(paraptosis)是一种新的细胞程序性死亡形式,属非凋亡性细胞死亡方式,表现为来源于内质网和线粒体肿胀的细胞质广泛的空泡化。该文综述了近年来关于副凋亡的相关背景以及抗肿瘤药物诱导副凋亡的相关分子机制,并展望了其未来的发展方向,以期为治疗癌症提供新思路和理论依据。