类鼻疽杆菌毒素分子BLF1的重组表达及生物学活性

目的重组、表达类鼻疽杆菌毒素BLF1并研究其生物学活性。方法运用DNA重组技术,以p GEX为表达系统在大肠杆菌中表达BLF1蛋白;以纯化重组蛋白r BLF1免疫新西兰大白兔,获得抗r BLF1血清,Western blot及ELISA鉴定抗血清;不同浓度r BLF1蛋白腹腔注射BALB/c小鼠,观察小鼠生存率;A549细胞模型中,通过CCK-8实验研究目的蛋白的细胞毒性效应及抗体阻断作用。结果从类鼻疽杆菌基因组DNA中PCR得到了BLF1目的基因,连接到p GEX-6p-2质粒,经双酶切及测序表明重组质粒构建成功。GST-BLF1蛋白经诱导表达、酶切纯化得到了相对分子质量为23×103的高纯度r BLF1,免疫家兔抗血清ELISA效价达1∶1 280 000,Western blot鉴定在目的蛋白位置处出现特异印记条带。重组r BLF1蛋白腹腔注射BALB/c小鼠,小鼠死亡率与蛋白剂量呈正相关。r BLF1蛋白能明显杀伤A549细胞,抗体可有效阻断其杀伤作用。结论成功重组表达了具有生物活性的r BLF1,该蛋白具有明显杀伤A549肿瘤细胞的作用,同时能够导致小鼠死亡但表现出一定耐受性。

完善农村社会保障制度对扩大内需的影响探析——一个基于河南省的实证研究

"增加消费,扩大内需"是我国宏观调控的一项重要内容,完善社会保障制度则是扩大内需的重要途径。相比较城市来说,农村消费市场潜力巨大;因此完善农村社会保障制度对于扩大内需起着至关重要的作用。本文研究以河南省为样本,通过对五地市调研以及历年统计数据的分析,运用基于预防性储蓄理论和重复博弈模型,对完善农村社会保障制度对扩大内需的影响加以探析,并希望能找到一些对策建议。

城市居民代际之间的职业变化规律研究——以武汉市居民为例

改革开放以来,武汉市居民近四代的职业状况及其影响因素发生了巨大的变化。为此,针对在武汉市居住超过十年且下一代已经参加工作的中年人进行问卷调查。并对武汉市家庭内部四代人之间的职业变化规律进行了分析,结果表明:父代对子代职业选择的影响逐代减弱,不同代际之间的职业变化率均高于职业继承率;总的代际职业变化中,职业结构自身的变迁作用不断减弱,而社会开放程度的影响则逐步增强;职业的社会地位向上流动性逐代减弱,而向下流动性逐代增强;四代人整体的职业社会地位在不断提高。研究结论对解决金融危机局势下的我国大学生就业问题具有重要参考价值。

城镇居民代际之间的职业变化规律研究——以武汉市为例

改革开放以来,武汉市居民近四代的职业状况及其影响因素发生了巨大的变化。特此,针对在武汉市居住超过十年且下一代已经参加工作的中年人进行问卷调查。基于调查所得数据,对武汉市家庭内部四代人之间的职业变化规律进行了分析,结果表明:①父代对子代职业选择的影响逐代减弱,不同代际之间的职业变化率均高于职业继承率。②总的代际职业变化中,职业结构自身的变迁作用不断减弱,而社会开放程度的影响则逐步增强。③职业的社会地位向上流动性逐代减弱,而向下流动性逐代增强。④四代人整体的职业社会地位在不断提高。

AI翻译背景下翻译教学策略的研究

随着人类科学技术的不断发展,近十年互联网技术成指数爆炸式的发展,"互联网+"时代已经全面到来。本文对目前我国英语翻译教学现状进行分析,提出AI翻译背景下英语翻译教学可采取的新教学策略,从而促进我国英语专业翻译教学的综合发展。

粪便具核梭杆菌的免疫磁珠捕获联合实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价

目的建立定量检测粪便中具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum)的免疫磁珠捕获联合实时荧光定量PCR(IMBs-qPCR)技术方法。方法5×108CFUF.nucleatum(0.4%甲醛灭活)免疫新西兰兔制备多克隆抗体,饱和硫酸铵沉淀法和HiTrap Protein G HP亲和层析法纯化抗体;优化MS300免疫磁珠偶联多克隆抗体和捕获F.nucleatum的反应条件。根据F.nucleatum特异性基因NusG设计引物和构建含目的基因的载体质粒,建立qPCR反应体系并绘制qPCR标准曲线。最后,在不同浓度(50CFU/200mg^10^5CFU/200mg)F.nucleatum的人粪便标本中,评价该方法的检测效能。结果成功制备F.nucleatum多克隆抗体,抗体ELISA效价>320000,盐析和亲和层析纯化抗体纯度分别为60%和85%;多克隆抗体偶联免疫磁珠时偶联缓冲液最佳pH值为5.0,最佳温度为25℃,最佳偶联时间为2.5h,加入抗体最适量为10μg/mg,免疫磁珠最佳捕获温度为37℃,时间为40min;成功建立qPCR反应体系;IMBs-qPCR和粪便全基因组DNA提取法直接检测模拟粪便标本最低检测限分别为100CFU/200mg和400CFU/200mg,ROC曲线中AUC分别为0.948和0.878。结论成功建立了IMBs-qPCR检测粪便中F.nucleatum的方法,该方法具有简便快速、灵敏度高、特异性好等特点。

新历史主义视角下的《五号屠场》

基于亲身经历写成的《五号屠场》,不仅使作者库尔特·冯内古特成为美国后现代文学领域的领军人物之一,甚至在美国掀起了一股反战浪潮。新历史主义为打破文学作品与历史的传统关系提供途径,证明文学作品与历史间的影响是相互的。本文在新历史主义的理论基础上,从"文本的历史性"和"历史的文本性"两个角度对《五号屠场》进行分析,为人们理解历史提供了新的启示,论证了历史与文学的相互关系。