人iPSC源性肝细胞抗体药物肝毒性评价研究

目的 用人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)源性肝细胞评估抗体药物的肝细胞毒性。方法 qPCR、Western blot、细胞免疫荧光检测肝细胞特征性表型分子白蛋白、尿素氮及药物代谢酶的表达;MTT法检测肝细胞生长情况;ELISA检测肝细胞白蛋白、尿素氮分泌水平;过碘酸-雪夫染色、油红O染色检测肝细胞储存糖原、脂滴的能力。结果 HcHAb18、Hab18、5A12单抗处理后人iPSC源性肝细胞生长和分泌功能并未发生明显改变;然而,肝细胞特征性表型分子表达降低,糖原和脂滴储存能力抑制,药物代谢酶表达相应改变。结论 3株单抗虽不影响人iPSC源性肝细胞的生存,但改变其表型和代谢;人iPSC源性肝细胞可用于抗体药物的肝细胞毒性评估。

盐霉素通过靶向调控ALDH影响三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡

目的探讨盐霉素(salinomycin,Sal)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用流式细胞术筛选ALDH高表达乳腺癌细胞系;采用MTT法检测不同浓度Sal(1~32μmol/L)对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测Sal对细胞凋亡以及肿瘤干细胞表面标志物ALDH表达的影响;采用qRT-PCR、Western blot检测凋亡相关分子Caspase-3、Bax、Bcl-2、PARP mRNA和蛋白表达;TCGA(the Cancer Genome Atlas)数据库下载乳腺癌患者数据集(n=1 218),采用Pearson法分析ALDH与凋亡相关分子表达的相关性。结果 Sal在24 h、48 h、72 h均可以剂量依赖的方式抑制MDA-MB-231细胞增殖(均P<0.001);Sal作用MDA-MB-231细胞48 h后,与对照组比较,2μmol/L组、4μmol/L组、8μmol/L组的细胞凋亡率均升高(均P<0.05);Bcl-2、PARP、Caspase-3 mRNA表达下降(均P<0.05),Bax mRNA表达升高(均P<0.05);Bcl-2、Caspase-3蛋白表达下降(均P<0.05),PARP、Bax蛋白表达升高(均P<0.05);MDA-MB-231乳腺癌干细胞表面标志物ALDH表达下降(均P<0.05)。TCGA数据库分析显示,ALDH与抗凋亡分子Bcl-2、Caspase-3的表达呈正相关(r=0.209,P=0.007;r=0.235,P=0.002),与Bax、PARP的表达呈负相关(r=-0.326,P<0.001;r=-0.453,P<0.001)。结论 Sal可抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长,可能通过下调肿瘤干细胞表面标志物ALDH表达实现。

子宫内膜癌肉瘤4例临床病理学分析

目的子宫内膜癌肉瘤为侵袭性和双相性肿瘤,本文探讨子宫内膜癌肉瘤的临床病理学特征及患者预后情况,为临床诊疗提供依据。方法复习4例子宫内膜癌肉瘤的临床及病理学资料,行常规石蜡包埋切片和免疫组化染色协助诊断。结果显微镜下见肿瘤组织由恶性上皮和间叶2种组织成分构成,相互之间有或穿插移行或分界清楚,上皮成分为子宫内膜样癌,肉瘤成分为横纹肌肉瘤。所有上皮成分AE1/AE3(+)、ER(+),所有肉瘤成分vimentin(+)、MyoD1(+)。结论子宫内膜癌肉瘤是侵袭性肿瘤,预后差。组织形态学结合免疫组化染色对诊断及鉴别诊断有重要的意义。

乳腺癌干细胞标志物CD44/CD24与ALDH1的相关性分析

目的分析CD44/CD24与乙醛脱氢酶1(ALDH1)两种乳腺癌干细胞标记物表达的阳性细胞比率及其相关性。方法收集培养4例乳腺癌转移胸腔积液和8株乳腺癌细胞系,进行CD44/CD24与ALDH1的标记染色,应用流式细胞术检测CD44^+CD24-与ALDH1^+细胞亚群的比例,并分析两种标记物之间的相关性。结果 8株乳腺癌细胞系CD44^+CD24-细胞亚群比例仅2株高达85%以上,其余均在5%以下; ALDH1^+细胞亚群比例总体较低,在0. 98%-25. 2%之间。4例胸腔积液中,CD44^+CD24^-细胞亚群比例较高,ALDH1^+细胞亚群则比例波动较大。乳腺癌细胞系CD44^+CD24-与ALDH1^+细胞亚群比例的相关性分析显示,两种标记物无相关性(r=-0. 168 3,P=0. 383)。对ALDH1^+、ALDH1^-与未标记细胞中CD44^+CD24^-细胞亚群比例分别进行比较分析,未见差异。结论 CD44/CD24与ALDH1两种乳腺癌标记物在乳腺癌细胞中的表达是独立的,二者没有相关性。