淫羊藿苷对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用机制

背景:淫羊藿苷具有抗炎、抗氧化、免疫调节等功能,可能成为预防和治疗急性肝损伤的潜在药物。目的:分析淫羊藿苷对四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制。方法:取32只昆明小鼠,采用随机数字表法分为正常组、模型组、淫羊藿苷低剂量组及淫羊藿苷高剂量组,每组8只。正常组、模型组灌胃给予10 mL/kg的生理盐水,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组分别灌胃给予100,200 mg/kg的淫羊藿苷混悬液,1次/d,连续7 d。末次给药后,模型组、淫羊藿苷低剂量组及淫羊藿苷高剂量组通过腹腔注射四氯化碳建立急性肝损伤模型,造模24 h后,检测小鼠肝指数与血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肿瘤坏死因子α及白细胞介素6水平,肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及丙二醛浓度,肝组织病理形态及肝细胞凋亡情况,以及肝组织中混葡萄糖调节蛋白78、内质网应激相关蛋白、混合谱系激酶域样蛋白及Caspase-3的蛋白表达。结果与结论:①与正常组比较,模型组小鼠肝指数与血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、肿瘤坏死因子α及白细胞介素6水平均升高(P均<0.05);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组小鼠上述指标均降低(P均<0.05);②与正常组比较,模型组小鼠肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性降低(P均<0.05),丙二醛水平升高(P<0.05);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组小鼠超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性升高(P均<0.05),丙二醛水平降低(P<0.05);③苏木精-伊红与TUNEL染色显示,模型组小鼠肝组织结构破坏严重,肝细胞大面积坏死,肝细胞凋亡率较高;淫羊藿苷低剂量组及淫羊藿苷高剂量组小鼠肝组织结构破坏程度及肝细胞坏死面积明显轻于模型组,肝细胞凋亡率低于模型组(P<0.05);④Western blot检测显示,与正常组比较,模型组小鼠肝组织内葡萄糖调节蛋白78、内质网应激相关蛋白、混合谱系激酶域样蛋白Caspase-3的蛋白表达升高(P均<0.05);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组小鼠肝组织内上述指标蛋白表达降低(P均<0.05);⑤结果表明,淫羊藿苷对四氯化碳诱导的急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抗炎、抗氧化、调节内质网应激及减轻程序性坏死有关。

慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病的研究进展

近年来,随着人们生活质量的提高,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病率逐年上升,成为发病率仅次于病毒性肝炎的常见肝病。因此,慢性乙型肝炎合并NAFLD的患者越来越多。综述了HBV感染对NAFLD发生发展的影响,以及NAFLD对慢性乙型肝炎患者病程和抗病毒疗效的影响。

感染科规培医师带教中微信应用的探讨

住院医师规范化培训是医学生毕业后医学教育的重要组成部分,培训科室如何做好规培医师的临床培训工作,临床带教教师如何做好规培医师的带教工作在整个培训过程中起着举足轻重的作用。随着社会互联网的快速发展,微信已成为人们日常沟通、交流及获取信息的重要方式,实行住院医师规范化培训制度是遵循人才成长规律,培养高素质临床医学人才的必然要求,是深化医改的重大举措,将微信运用到规培医师带教中,势必对提高教学质量及效果带来巨大的帮助。因此,该文就微信在感染科规培医师带教中的应用进行了探讨。

氧化应激在急性肝损伤中的作用

急性肝损伤常由病毒感染、酒精、药物、毒物、代谢异常等原因引起。氧化应激是急性肝损伤及其他肝病发生发展的共同病理生理机制。急性肝损伤发生后,肝细胞功能受损,引起氧化应激;而持续或高强度的氧化应激将增加肝细胞死亡的风险,导致一系列肝脏疾病。氧化应激主要与Nrf2、NF-κB等信号通路相关。因此,了解氧化应激参与肝损伤的发生发展机制及相关通路至关重要。本文介绍了氧化系统及抗氧化系统、氧化应激与损伤因素、氧化应激与肝损伤相关通路,以期为急性肝损伤的治疗靶点选择及相关临床研究提供参考。

内毒素血症影响慢性肝病的研究进展

慢性肝脏疾病是全球重要的健康负担,每年死于慢性肝脏疾病的人数占全球所有死亡人数的3.5%。血清内毒素水平与肝病密切相关,它可通过直接或间接作用引起或加重肝损伤,但内毒素血症在肝损伤中的具体作用目前仍不明确,结合最新肠⁃肝轴相关研究发现,内毒素在肝损伤进展中的作用还可能被严重低估,本文重点综述内毒素血症在慢性肝脏疾病的发生、发展过程中的作用及机制,为临床指导慢性肝脏疾病的治疗提供理论基础。

SLCO1B1基因多态性与2型糖尿病患者血脂关系的研究进展

SLCO1B1基因在肝脏中表达,具有种族特异性及遗传多态性,介导多种内源性及外源性物质在肝脏内的转运。SLCO1B1基因多态性已被证实在不同种族人群中同血脂异常水平有关,表现为不同种族的不同基因型血脂异常水平的不同。同时SLCO1B1基因多态性影响2型糖尿病患者使用降糖药物后的血糖水平。由于2型糖尿病患者容易发生血脂水平的异常,近年来研究发现,SLCO1B1基因多态性同2型糖尿病人群血脂异常水平有关,但具体机制尚待进一步研究。本文就SLCO1B1基因多态性与2型糖尿病患者血脂异常的关系做一综述。

医学生科研创新项目带教的实践情况与积极反思

文章首先阐述了医学生科研创新项目带教的实践情况,然后论述了医学生科研创新项目带教的积极反思,包括带领医学生检索和查阅文献,提高其学习能力;增强医学生团队协作能力,锻炼医学生人际交往能力;定期举行科研交流活动,提高医学生沟通和表达能力;全面指导医学生进行科研报告及论文撰写。

内质网应激-程序性坏死在肝病中的研究进展

内质网存在于红细胞以外的真核细胞中,主要参与蛋白的合成、翻译后修饰、折叠以及转运。在肝细胞中含有丰富的内质网,多种生理性或病理性因素的作用下可诱发其产生内质网应激。内质网应激主要表现为未折叠蛋白反应、内质网超负荷反应、胆固醇级联调节反应三种反应形式。近来发现细胞程序性坏死与内质网应激息息相关,并且参与许多肝病的发病过程。本文将对内质网应激、细胞程序性坏死与肝病之间的联系做一综述。

内毒素血症通过下调HNF4α表达加剧肝损伤

目的探讨内毒素血症下调肝细胞核因子4α(HNF4α)表达介导肝损伤进展的机制。方法144只BALB/c小鼠采用随机数字表法分组进行以下实验:(1)四氯化碳(CCl_(4))诱导小鼠急性肝损伤。对照组和0.5 mL/kg、1.0 mL/kg、2.0 mL/kg CCl_(4)组。(2)筛选脂多糖(LPS)干预小鼠的剂量。对照组和0.1 mg/kg、0.5 mg/kg、2.5 mg/kg LPS组。(3)LPS干预CCl_(4)(1.0 mL/kg)诱导急性肝损伤模型小鼠。对照组、CCl_(4)组、0.1 mg/kg LPS+CCl_(4)组、0.5 mg/kg LPS+CCl_(4)组。每组12只。诱导24 h后处死小鼠,采用酶速率法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT),重氮法检测总胆红素(TBil)水平;Western blot法检测肝组织HNF4α、胱天蛋白酶3剪切体(Cleaved caspase-3)蛋白表达;原位末端标记法检测肝细胞凋亡情况。结果0.5、1.0、2.0 mL/kg CCl_(4)组的血清ALT、TBil及肝组织HNF4α、Cleaved caspase-3蛋白表达水平高于对照组,且呈剂量依赖性增高。2.5 mg/kg LPS组血清ALT、TBil及肝组织Cleaved caspase-3蛋白表达水平高于对照组和0.1、0.5 mg/kg LPS组,肝组织HNF4α蛋白表达水平低于对照组和0.1、0.5 mg/kg LPS组(P<0.05)。CCl_(4)组和0.1、0.5 mg/kg LPS+CCl_(4)组的血清ALT、TBil,肝组织HNF4α、Cleaved caspase-3蛋白表达水平及肝细胞凋亡指数均高于对照组(P<0.05);0.1、0.5 mg/kg LPS+CCl_(4)组的血清ALT、TBil,肝组织Cleaved caspase-3蛋白表达水平及肝细胞凋亡指数高于CCl_(4)组,HNF4α蛋白表达水平低于CCl_(4)组(P<0.05)。结论内毒素血症通过下调HNF4α表达增加肝细胞凋亡,可能是其介导肝损伤进展的机制之一。

抑制内质网应激关键信号通路蛋白eIF2α去磷酸化与肝细胞增殖及c-Met表达的关系

目的探讨抑制内质网应激(ERS)关键信号通路蛋白真核细胞起始因子2α(eIF2α)去磷酸化与肝细胞增殖及促肝细胞生长因子受体(c-Met)表达的关系。方法将人肝细胞株L02分为对照组和胡萝卜素(TG)组,TG组加入含内质网钙平衡抑制剂毒胡萝卜素(TG)的RPMI1640培养基,诱导构建细胞ERS模型;对照组仅加入RPMI1640培养基,培养48 h。采用CCK-8检测细胞活力,Western blotting法检测细胞ESR相关蛋白p-eIF2α、ERAD通路相关蛋白HRD1、XBP1以及c-Met蛋白表达。另取L02细胞,分为TG组和Salubrinal+TG组,Salubrinal+TG组给予eIF2α去磷酸化抑制剂Salubrinal预处理2 h,然后加入1μmol/L TG培养48 h;TG组加入1μmol/L TG培养48 h。采用CCK-8检测细胞活力,Western blotting法检测细胞eIF2α、p-eIF2α、HRD1、XBP1、c-Met蛋白表达。结果与对照组相比,TG组p-eIF2α、HRD1表达水平升高,TG组ERS相关蛋白p-eIF2α表达上调,ERAD通路激活,表明ERS细胞模型构建成功。TG组细胞增殖活力和c-Met蛋白表达水平均低于对照组(P均<0.05)。与TG组相比,Salubrinal+TG组细胞XBP1、HRD1蛋白表达降低,细胞增殖活力和c-Met蛋白表达升高(P均<0.05)。结论在肝细胞ERS中,抑制eIF2α去磷酸化能够部分恢复肝细胞细胞增殖活力及c-Met表达,促进细胞存活。

内质网应激在肝病性别差异形成中的影响及机制

目的探讨内质网应激在肝病性别差异形成中的影响及机制。方法首先回顾性分析遵义医科大学附属医院2018年肝病门诊23043例肝病患者及肝病科1110例肝病患者的性别分布情况;然后通过腹腔注射CCl4诱导急性肝损伤小鼠模型,验证肝损伤的性别差异,并进一步探讨内质网应激在肝损伤性别差异形成过程中的作用机制。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。计数资料多组间比较采用χ2检验。结果肝病门诊及肝病病房男性患者发病率明显高于女性患者,肝病门诊男女之比为1.56∶1,肝病病房男女患者之比为1.86∶1,差异有统计学意义(χ^2=7.517,P=0.003);在动物模型研究中,CCl4诱导小鼠急性肝损伤,雄性模型小鼠死亡率明显高于雌性模型小鼠(50%vs 30%,P<0.05),雄性模型小鼠血清ALT、TBil水平均明显高于雌性模型小鼠[(5767.8±518.8)U/L vs(4749.5±378.0)U/L,(6.20±0.88)mmol/L vs(4.83±0.57)mmol/L,P值均<0.05],雄性模型小鼠肝坏死面积亦高于雌性模型小鼠[(47.50±4.65)%vs(38.80±5.00)%,P=0.043],雄性模型小鼠肝细胞凋亡标志裂解型胱天蛋白酶-3蛋白相对表达量明显高于雌性模型小鼠[(26.00±2.11)vs(18.40±1.54),P=0.042]。模型小鼠肝脏磷酸化蛋白激酶R样激酶(p-PERK)、剪接型X盒结合蛋白1(XBP1s)、P58IPK及C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白水平相比对照组均明显升高(P值均<0.05)。雄性模型小鼠肝脏XBP1s、P58IPK及CHOP蛋白相对表达量均较雌性模型小鼠升高[(25.92±2.11)vs(15.54±1.21),P=0.033;(28.60±2.43)vs(13.56±1.13),P=0.026;(27.15±2.61)vs(18.18±1.81),P=0.038],p-PERK蛋白水平相对降低[(16.82±0.11)vs(22.84±0.03),P=0.043];免疫组化检测CHOP蛋白表达,雄性小鼠明显高于雌性小鼠[(1.00±0.11)vs(0.62±0.03),P=0.032]。结论内质网应激信号通路的不协调激活可能参与肝病性别差异的形成过程。

糖蛋白130在急性肝损伤中负性调控内质网应激作用及机制

目的探讨肝内糖蛋白130(glycoprotein 130,gp130)在急性肝损伤中表达的变化及其对肝细胞凋亡的影响及机制。方法首先通过四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导小鼠急性肝损伤,检测肝内gp130表达、内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS;以Caspase-12标记)、细胞凋亡(以Cleaved caspase-3表达及TUNEL综合评估)的变化;其次通过4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,PBA;ERS抑制剂)干预小鼠,探讨ERS对肝内gp130表达的影响;最后敲减模型小鼠肝内gp130表达,探讨gp130对肝损伤、肝细胞凋亡的影响及作用机制。结果模型小鼠肝内gp130表达上调,ERS及细胞凋亡信号显著激活(P<0.05);PBA减低肝内gp130表达,减轻肝细胞凋亡反应(P<0.05);肝内gp130的下调加重了CCl4诱导的小鼠肝损伤、ERS和肝细胞凋亡反应(P<0.05)。结论在急性肝损伤中ERS促进肝内gp130表达上调;gp130的上调有利于减轻肝损伤,机制可能与负性调控ERS介导的肝细胞凋亡有关。

慢性乙型肝炎病毒感染病毒复制与肝细胞内质网应激反应相关性的初步研究

目的:研究体内、体外乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制水平与肝细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ER stress)反应基因表达的相关性。方法:选择7例慢性HBV感染者作体内研究,用液氮冷冻保存肝脏穿刺活检组织,检测肝功能并提取m RNA;体外研究分三组,转染组(HepG2.2.15)为HBV基因转染人肝癌细胞株,对照组(HepG2)为人肝癌细胞株,干预组(3TC)为50μg/m L拉米夫定作用于HBV基因转染人肝癌细胞。分别培养2天、4天、6天后收集细胞提取m RNA。HBV DNA载量的测定用实时定量聚合酶链反应(PCR);活化转录因子4 (ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)、活化转录因子6(ATF6)、X盒结合蛋白1(XBP1)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的m RNA表达,用SYBR Green荧光定量逆转录聚合酶链反应(SYBR Green RT-PCR)检测,以β-actin为内参照;GRP78的表达用蛋白免疫印迹法(WB)检测。结果:体内研究结果表明:XBP1、GRP78、CHOP及ATF6基因表达水平与病毒载量、炎症程度及肝组织纤维化程度无显著相关性(P>0.05);ATF6与GRP78基因表达水平和HBV DNA水平呈显著正相关(P<0.05)。体外研究结果表明:干预组细胞培养2天至6天HBV DNA水平下降,CHOP、GRP78、ATF6及XBP1基因表达水平在三组之间差异无统计学意义(P>0.05);WB结果表明,转染组细胞GRP78的表达培养4天与6天相比差异无统计学意义(P>0.05),干预组培养6天后与转染组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:研究结果提示体内HBV复制水平与肝细胞ER stress反应显著相关,而肝脏炎症程度及肝脏纤维化程度等与ER stress反应无明显相关性;体外三组细胞之间ER stress基因的表达无显著差异(P>0.05)。

农村公共卫生服务质量评价指标体系的研究

目的拟构建农村公共卫生服务质量评价指标体系。方法通过文献归纳及专家咨询,结合公共卫生服务的特点,基于SERVPERF模型对问卷问项进行农村公共卫生服务质量评价指标体系设计。采用问卷调查的方式,进行探索性因子分析筛除指标。结果初步建立了7个维度、28个评价指标的农村公共卫生服务质量评价指标体系。向50名居民及20名公共管理专业的学生进行问卷验证(Cronbach′sα系数是0.958),且农村公共卫生服务质量评价指标体系优化为5个维度和18个评价指标(排除因子载荷值小于0.4或2个因子载荷值同时大于0.4者)。结论本研究初步建立了农村公共卫生服务质量评价指标体系。

STAT3信号通路-程序性坏死在肝病中的研究进展

信号传导与转录激活因子-3(STAT3)是肝细胞间信号传导的重要转录因子,介导适应性反应、炎性反应、肝细胞增殖等,参与了多种肝病的发病过程。近年来,研究发现在多数肝病的发生、发展过程中细胞程序性坏死均充当着重要角色,STAT3介导的信号通路与该细胞死亡方式密切相关。该文将STAT3信号通路、细胞程序性坏死与肝病之间的研究作一综述。