发酵床养殖模式对牦牛寄生虫病防治及生产性能的影响

为探讨发酵床牦牛养殖模式对寄生虫病的防治效果,将120头体重均匀、体况良好的牦牛随机分为3个组(A、B、C),其中A组对垫料进行堆积发酵处理,并在试验期内进行2次驱虫,B组只对垫料进行堆积发酵处理,C组为对照组,不做任何处理。对3个组分别在发酵处理前15 d(-15 d)、处理当天(0 d),及进牦牛后45、90、120 d,采集发酵床表层垫料及新鲜牦牛粪样,采用饱和盐水漂浮法、虫卵沉淀法、麦克马斯特氏法进行寄生虫虫卵定性和定量检测,同时测定各组牦牛的体长和体高;从垫料发酵开始,每天测量3组试验牦牛发酵床垫料表层下20cm处的温度,连续测量15d。结果显示:A组、B组垫料最高温度分别达到(60.1±0.2)℃和(60.1±0.3)℃,其中A组显著高于C组(P <0.05),B组极显著高于C组(P <0.01),且发酵过程中A组和B组垫料的温度均维持在50℃以上;3组的垫料中都发现有蛔虫卵、吸虫卵、绦虫卵和球虫卵,但A组在牦牛进入后45 d时蛔虫卵和绦虫卵转阴,B组在试验期间始终能检测到虫卵,但有下降趋势,而C组在整个试验期间一直有虫卵存在,且数量呈持续上升趋势;A组牦牛的体高与体长在进入发酵床后显著高于B组(P <0.05),极显著高于C组(P <0.01)。结果表明,发酵床养殖模式结合定期驱虫,能有效降低牦牛场寄生虫感染率,提高牦牛生长性能。

志贺菌ipaH基因PCR检测方法的建立及应用

为了掌握青海省4种食源性动物体内志贺菌的分布情况,针对志贺菌属侵袭性质粒抗原H基因(invasive plasmid,ipaH)设计1对特异性引物,建立志贺菌的PCR检测方法,优化反应体系,检测该方法的敏感性和特异性,并将该方法应用于临床样本检测。结果表明,建立的PCR方法能特异性扩增志贺菌ipaH基因,而沙门氏菌、大肠杆菌、葡萄球菌、枯草杆菌、变形杆菌等均未扩增出条带;最低检测限值为1.8 pg/μL。在临床样本检测中,100株疑似菌株的阳性率为62.00%,其中牦牛源75.00%(3/4),鸡源35.29%(12/34),羊源44.44%(8/18),猪源88.64%(39/44);新鲜鸡粪和羊粪的阳性率分别为91.67%(11/12)和90.91%(10/11)。这说明试验所建立的PCR方法具有良好的敏感性和特异性,可应用于志贺菌的实验室诊断;4种动物体内均不同程度带菌,在临床诊断和治疗时不可忽视该菌的致病作用。

青海地区蜱及蜱媒病原体文献信息分析

青海省是我国畜牧大省,蜱虫灾害给当地的畜牧业和公共卫生安全造成了很大的损害。为掌握当地蜱及蜱媒病原体的研究进展,对青海地区蜱类及蜱媒病原体近年来所报道的资料进行归纳梳理总结,资料显示,青海地区的蜱种分类现已有2个科8个属共34种蜱,其中优势蜱种为青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensis);主要蜱媒病原体为立克次体、无形体、梨形虫和伯氏疏螺旋体。随着科技进步,青海省地区对蜱及蜱媒病原体的研究结果更加精准化和系统化,这为当地预防蜱虫灾害和蜱传疫病奠定了良好的基础。

亚非部分地区蜱及蜱传疾病的分布概述

蜱可以传播多种病原体,对人类和动物有着严重的危害。为给亚非地区候鸟迁徙沿线的蒙古国、中国[仅收集候鸟迁徙沿线的新疆维吾尔自治区(新疆)和青海省2个代表性省份信息]、巴基斯坦及埃及的蜱及蜱传疾病防治奠定理论基础,该文对上述国家近5年的蜱及蜱媒病原体的相关文献资料进行整理。经整理发现,巴基斯坦境内的蜱种类最为丰富,有51种;中国新疆、中国青海、埃及和蒙古国依次排在其后,其中蒙古国最少,仅有11种。上述国家报道的蜱类大部分属于硬蜱科;报道的蜱媒病原体大部分是人兽共患病原体,如无形体、立克次体和柯克斯体等。鸟类是蜱类的宿主之一和蜱媒病原体的潜在携带者,上述国家位于候鸟东非-西亚迁徙线上,候鸟的迁徙可能在一定程度上推动了该区域蜱和蜱媒病原体的扩散。

青海血蜱Haemalin基因的克隆、生物信息学及转录水平分析

为构建青海血蜱Haemalin基因的cDNA全长序列,并分析该基因的生物信息学特征及其在青海血蜱不同发育阶段和雌蜱不同组织中的转录水平,本研究基于青海血蜱唾液腺转录组文库中检索到的一个功能注释为Haemalin的基因片段,采用cDNA末端快速扩增技术(RACE)引物设计软件设计Haemalin基因3'RACE和5'RACE特异性引物,分别经RACE扩增青海血蜱Haemalin基因的3'端和5'端序列,测序后与其中间序列拼接获得该基因的cDNA全长序列。利用生物信息学软件分析该基因编码蛋白的信号肽、理化性质、跨膜结构域、结构域、蛋白质三级结构、B细胞抗原表位以及氨基酸序列比对,采用NCBI中的BLAST及MEGA 7.0软件分别分析Haemalin基因编码氨基酸序列的相似性及构建其系统进化树,采用qPCR检测Haemalin基因在不同发育阶段青海血蜱和雌蜱不同组织中的转录水平。结果显示,青海血蜱Haemalin基因cDNA全长583 bp,开放阅读框(ORF)423 bp,该基因编码蛋白的信号肽为N端的15个氨基酸,理论等电点4.71,属于亲水性蛋白,无跨膜结构域。该基因编码蛋白的三级结构分析结果显示,其存在两个典型的Kunitz/牛胰蛋白酶抑制剂(Kunitz/BPTI)结构域,两个结构域之间由单链连接,共包括3个α螺旋,2对反向平行的β折叠;在aa35~aa45、aa54~aa60、aa75~aa80、aa91~aa93、aa125~aa131等处可能存在潜在的B细胞抗原表位。相似性与进化树结果显示,青海血蜱Haemalin氨基酸序列与褐黄血蜱凝血酶抑制剂Haemalin氨基酸序列的相似最高达92%,并在进化树中二者处于同一进化分支。表明,青海血蜱Haemalin可能也为一种凝血酶抑制剂。qPCR结果显示,Haemalin基因在不同发育阶段青海血蜱中的转录水平为:卵>半饱血蜱>若蜱>饱血蜱>幼蜱>吸血96 h的雌成蜱>游离雌成蜱,且其在青海血蜱雌蜱中肠中的转录水平极显著高于其他组织(P<0.0001)。表明,Haemalin基因在青海血蜱成蜱吸血阶段及其在该蜱的血液消化中均发挥重要作用。本研究为进一步研究Haemalin基因的生物学功能及其在青海血蜱防控中的作用奠定基础。