猪链球菌2型毒力相关因子及保护性抗原研究进展

猪链球菌是在世界范围内传播的一个重要的人兽共患病原体,可引起猪的脑脊膜炎、肺炎、心内膜炎、败血病、关节炎等症状。在已分离的猪链球菌35个血清型中,猪链球菌2型（SS2）流行范围最广。1998年和2005年在中国江苏省与四川省暴发了人感染SS2的疫情,分别引起14人和38人死亡。

布鲁氏菌S2株菌壳的制备研究

目的利用温控表达调节系统在布鲁氏菌中诱导表达裂解基因E,制备布鲁氏菌S2株菌壳,监测其裂解效率,并观察菌壳形态。方法从pBV220∶∶E中PCR扩增温控裂解盒和裂解基因E融合片段,克隆至pBBR1MCS-2载体上,构建重组裂解质粒pBBR1MCS-E,并将其电转化至布鲁氏菌S2株,构建重组菌S2(pBBR1MCS-E)。通过28℃至42℃升温诱导培养制备布鲁氏菌菌壳,绘制生长曲线和裂解曲线,计算裂解率,并电镜观察菌壳形态。结果成功构建了重组裂解质粒pB-BR1MCS-E并制备了布鲁氏菌菌壳。绘制出了布鲁氏菌裂解曲线,布鲁氏菌菌壳的裂解率达99.99%,经高渗溶液冻融后可完全消除其中残存的活菌。电镜观察表明布鲁氏菌菌壳保持有细胞的基本形态,但由于细胞内容物外流而使细胞发生变形和皱缩。结论本研究成功制备出了布鲁氏菌菌壳,为进一步研究布鲁氏菌菌壳的特性奠定了基础。

PRRSV对仔猪免疫力的影响

为了研究PRRSV对仔猪免疫力的影响,试验将13头46日龄的健康仔猪随机分A、B、C 3组,48日龄时A组猪进行滴鼻接种PRRSV LC毒株(TCID50为1×10-5.25/0.1 mL)3 mL头/,B组猪滴鼻接种未接毒正常细胞培养物3 mL头/;50日龄时A组、B组猪免疫猪瘟疫苗4头份,C组猪肌肉注射生理盐水4 mL;免疫后1,7,14,21,28,35天利用ELISA和MTT等方法检测试验组猪猪瘟抗体水平和外周血T淋巴细胞转化率。结果表明,A组猪瘟抗体水平和T淋巴细胞转化率显著低于B组(P<0.05)有极显著的,说明PRRSV对仔猪免疫力有一定的抑制作用。

CD4^+T细胞表位预测及其应用

目前,运用生物软件预测CD4+T细胞表位的技术越来越成熟,为表位疫苗的研究提供了有利的条件。对T细胞表位预测技术及其应用进行了综述。

非粮型单细胞蛋白饲料对育肥猪的饲喂效果研究

[目的]开发或利用大宗非粮型单细胞蛋白饲料资源。[方法]利用鸡粪发酵物、发酵配合饲料,按不同比例分别与常规配合饲料和自配无抗配合饲料混合,同时利用10%酿酒酵母培养物和90%常规配合饲料混合,进行育肥猪饲喂试验。通过比较各试验组与对照组的饲喂效果,探讨鸡粪发酵物和发酵自配无抗配合饲料的最佳添加比例,分析酿酒酵母培养物的饲喂效果。[结果]添加自配无抗配合饲料的试验料肉比均低于对照组;鸡粪发酵物添加试验组中,用15%鸡粪发酵物替代常规配合饲料的试验组A3料肉比最低;发酵配合饲料添加试验组中,添加20%发酵自配无抗配合饲料+80%自配无抗配合饲料的试验组B2的料肉比最低;使用10%酿酒酵母培养物替代常规配合饲料试验组C1的料肉比低于对照组。经济效益分析表明,添加鸡粪发酵物的试验组中A2组毛利润最高,添加发酵配合饲料的试验组中B2组毛利润最高。[结论]研究可为新饲料原料的开发、原料发酵处理等提供理论参考,并为实现农牧废弃资源的高效和增值利用奠定基础。

新型生物细胞营养素的大姜防腐保鲜应用研究

以新鲜大姜为试验材料,研究新型生物细胞营养素在大姜防腐保鲜上的应用。根据试验管理标准,配置3种浓度梯度的活化液分别为新型生物细胞营养素:葡萄糖:水=1∶2∶20、1∶10∶100、1∶10∶200,并设置清水组和空白对照组,分析新型生物细胞营养素对大姜失重率、粗纤维含量、生姜黄酮含量和感官评分的影响。结果表明:3种浓度的新型生物细胞营养素都可降低大姜的失重率,以1∶2∶20的效果最为显著,比空白对照组低13.15%;降低粗纤维的含量,最高可达1.486 2%,保持大姜鲜嫩无明显纤维素状态;维持生姜黄酮的含量,高浓度的新型生物细胞营养素活化液可将降低量控制在3.466 1 mg,低浓度的也能保持3.746 2 mg的折损;抑制感官评分的降低,保持大姜的新鲜度。综上,新型生物细胞营养素可以保持大姜的新鲜度,维持各项营养指标,其中新型生物细胞营养素:葡萄糖:水=1∶2∶20的激活素对大姜的防腐保鲜效果最好。

猪链球菌2型新毒力相关基因lin0523的克隆表达及生物信息学分析

lin0523是新鉴定出的猪链球菌2型(Streptococcus suisserotype 2,SS2)毒力相关基因。利用PCR方法扩增SS2野生强毒菌株ZY458的lin0523基因,并克隆到pMD18-T载体上。经限制性内切酶EcoRⅠ、PstⅠ双酶切后,将目的基因与大肠杆菌表达载体pMAL-p2x连接,构建重组表达载体pMAL-p2x::lin0523,并将其转化至宿主菌TB1中。经IPTG诱导后,表达出约为90 000的重组蛋白MBP-lin0523,目的蛋白主要以包涵体形式存在。应用同源性比对、信号肽预测、跨膜区预测及蛋白亚细胞定位等生物信息学方法对目的蛋白进行分析表明,lin0523蛋白与SS2 05ZYH33的限制性核酸内切酶S亚基100%同源,可能含有信号肽并存在于细胞外;这些结果表明lin0523蛋白可能是一种分泌性蛋白。

猪链球菌2型新毒力相关基因的研究进展

猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)是一种重要的人兽共患病原菌,其毒力因子在S.suis 2致病中的作用机制仍不明确,越来越多的学者开始寻找其他相关的毒力基因。本文对近几年来S.suis 2S.suis新毒力基因的研究进展作一综述。