生活方式对服装品牌风格定位的影响

服装已开始朝着品牌化方向发展。文章介绍了通过对消费者生活方式的研究来进行品牌风格定位的方法和意义。

屎肠球菌介导的铜绿假单胞菌寡肽酶B(Ef-PopB)疫苗诱导小鼠产生保护作用及体液免疫应答

目的研究屎肠球菌介导的铜绿假单胞菌寡肽酶B(Ef-PopB)疫苗免疫小鼠诱导的保护力及体液免疫应答反应。方法用5×10^(8)菌落形成单位(CFU)的重组疫苗灌胃接种BALB/c小鼠,每日1次,连续3 d,持续3周。首次免疫后4周用5×10^(7) CFU的铜绿假单胞菌PA01株滴鼻攻击小鼠。攻击后两周处死小鼠,取肺计数细菌负荷,分别于免疫后0、4和6周采静脉血,分离血清,用ELISA测定IgG及其亚类和IgE水平。结果Ef-PopB疫苗免疫组小鼠肺细菌菌落数明显低于空载体组和Ef对照组。疫苗组小鼠血清抗体IgG、IgG1、IgG2b、IgG3和IgE在初次免疫后4周均升高,在攻击后两周达较高水平。结论铜绿假单胞菌重组Ef-PopB疫苗可诱导小鼠产生良好的保护作用和体液免疫应答。

服装产品开发企划探析

运用先进的产品开发模式和科学的管理理念来提升品牌已成为我国服装行业发展的当务之急。文章通过多家服装企业的实习与调研,提出了服装产品开发企划的相关概念,及符合国内服装企业运作的产品开发企划策略,构架了实施产品开发企划的流程和模式,为企业实施品牌战略提供参考。

铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-PopB的构建、鉴定及其在大肠埃希菌中的表达效率

目的构建和鉴定铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-PopB,并研究该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法以铜绿假单胞菌PA01标准株的DNA为模板,通过PCR扩增PopB基因。经酶切后与载体pGEX-1λT连接,构建重组质粒pGEX-PopB,电穿孔将其转化至大肠埃希菌BL21(DE3)。异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导重组菌BL21(pGEX-PopB)的表达,SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和鉴定。结果PCR扩增出1200 bp的PopB基因;双酶切和PCR证实PopB基因成功插入pGEX-1λT中;SDS-PAGE发现重组菌表达相对分子质量约66×103的融合蛋白,其蛋白表达量约占菌体总量的20%;Western blot证实铜绿假单胞菌感染的鼠血清能特异性识别该重组蛋白。结论成功构建了铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-PopB,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达具有抗原特异性的融合蛋白。

《围城》英译本中的“非强制明晰化”翻译技法研究

钱钟书先生的著名作品《围城》在中国现代小说中极具代表性,其英文译本Fortress Besieged是美国学者珍妮·凯利与茅国权的合译成果,为外国读者提供了阅读这部佳作的机会,可谓中国现代小说英译的成功案例之一,学界也因此对其进行了多角度研究。然而,《围城》英译本中的“明晰化”翻译技法尚未得到充分的关注。基于让-保罗·维奈和让·达贝尔内对明晰化的定义以及金佳·克劳迪对非强制明晰化的描述,本文针对《围城》英译本中的“非强制明晰化”翻译技法进行了描述性翻译研究,分析了非强制明晰化在译文中出现的层面和形式,以及译者使用这些非强制明晰化的方法,并探讨了译者运用非强制明晰化的动机。研究发现,译者在翻译过程中针对原文的不同层面,通过多种方法使用了不同形式的“非强制明晰化”翻译技法,其原因与译者的整体翻译策略有关。

粪肠球菌介导的日本血吸虫重组Efs-Sj14-3-3疫苗构建、鉴定及表达

目的 构建粪肠球菌(Efs)为载体的日本血吸虫(Sj)重组Efs-Sj14-3-3疫苗,并研究其表达效率。方法 制备重组质粒pGEX-Sj14-3-3和粪肠球菌ATCC47077株感受态。采用电穿孔技术将重组质粒pGEX-Sj14-3-3转化粪肠球菌ATCC47077株,构建重组Efs-Sj14-3-3疫苗。抽提质粒进行PCR扩增鉴定;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹对表达产物进行分析和鉴定。结果 以从重组Efs-Sj14-3-3抽提的质粒为模板进行PCR,可扩增出约399 bp的Sj14-3-3基因片段,SDSPAGE显示表达产物为40×103 Mr的融合蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的18%;免疫印迹表明融合蛋白能被日本血吸虫感染的患者血清识别。结论 成功构建了日本血吸虫重组Efs-Sj14-3-3疫苗,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。

粪肠球菌介导的日本血吸虫重组疫苗的构建、鉴定及表达

目的:构建粪肠球菌(Efs)介导的日本血吸虫(Sj)重组疫苗(rEfs-Sj26GST疫苗),并研究Sj26GST-GST融合蛋白在重组疫苗中的表达情况。方法:将pGEX-Sj26GST重组质粒电穿孔转化Efs ATCC47077株感受态,构建rEfs-Sj26GST疫苗,提取质粒进行PCR鉴定;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)对表达产物进行分析和鉴定。结果:经PCR鉴定,扩增出大小约676 bp的片段,与Sj26GST扩增片段长度相符。经SDS-PAGE分析,得到相对分子质量约52 × 10 3的条带,与Sj26GST-GST融合蛋白条带相符。Western blot结果显示,rEfs-Sj26GST疫苗表达的Sj26GST-GST融合蛋白可被Sj感染者血清特异性识别。 结论:成功构建了rEfs-Sj26GST疫苗,Sj感染者血清可特异性识别重组疫苗表达的Sj26GST-GST融合蛋白。

粪肠球菌介导的多房棘球绦虫重组Efs-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗的构建、鉴定及表达

目的构建粪肠球菌(Efs)为载体的多房棘球绦虫(Em)重组Efs-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗,并探讨其抗原性。方法采用电穿孔法将重组质粒pGEX-EmⅡ/3-Em14-3-3转化Efs ATCC47077株,构建重组Efs-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法对表达产物进行分析和鉴定,并使用薄层扫描技术分析表达蛋白在菌体总蛋白中所占比例。结果以重组Efs菌抽提的质粒为模板,PCR可扩增出大小约2554 bp的EmⅡ/3-Em14-3-3融合基因片段。SDS-PAGE显示,表达产物为相对分子质量约119×10^(3)的重组蛋白;IPTG诱导培养5 h,目的蛋白的表达量较高,约占菌体总蛋白的9%。免疫印迹法检测结果显示,重组蛋白能被泡球蚴感染的鼠血清识别。结论成功构建了Em重组Efs-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。

乳酸乳球菌介导的细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗的构建、鉴定及表达

目的 构建乳酸乳球菌(Lactococcus lactis, LL)为载体的细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus, Eg)重组LL-Eg95(rLL-Eg95)疫苗,并研究其表达效率。方法 以pCD-Eg95为模板扩增Eg95基因,采用XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-Eg95,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,抽提质粒进行双酶切鉴定;电穿孔转化乳酸乳球菌MG1363株,构建细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗,抽提质粒进行PCR鉴定。结果 重组质粒用双酶切鉴定可切出预期大小的片段,以具有罗红霉素抗性的重组LL中抽提的质粒为模板进行PCR可扩增出471 bp的Eg95基因;SDS-PAGE显示重组LL可表达相对分子质量为16.5×10~3的Eg95蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的17%;免疫印迹表明表达蛋白可被细粒棘球蚴感染的鼠血清识别。结论 成功构建了细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗,表达的Eg95具有特异的抗原性。

乳酸乳球菌介导日本血吸虫重组LL-Sj26GST疫苗的构建、鉴定及表达

目的构建以乳酸乳球菌(LL)为载体的日本血吸虫(Sj)rLL-Sj26GST疫苗,并研究其表达效率。方法以pGEX-Sj26GST为模板PCR扩增Sj26GST基因片段,经XbaⅠ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-Sj26GST,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞。抽提质粒,经双酶切鉴定正确后电穿孔转化乳酸乳球菌MG1363株,构建日本血吸虫rLL-Sj26GST疫苗,抽提质粒进行PCR鉴定。结果pMG36e-Sj26GST经双酶切获得预期大小的目的片段,重组质粒构建正确。提取具有罗红霉素抗性的rLL质粒进行PCR,扩增出676 bp的Sj26GST基因片段;SDS-PAGE分析显示rLL可表达26 ku的Sj26GST蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的18%;Western blot检测表达蛋白可被Sj感染者血清识别。结论成功构建日本血吸虫rLL-Sj26GST疫苗,表达的Sj26GST蛋白具有反应原性。

粪肠球菌介导结核分枝杆菌重组Efs(pGEX-ESAT-6)疫苗的构建、鉴定及表达

目的 构建粪肠球菌(Efs)介导的结核分枝杆菌重组Efs(pGEX-ESAT-6)疫苗,对表达的融合蛋白进行检测分析。方法 采用电穿孔方法将重组质粒pGEX-ESAT-6转化粪肠球菌ATCC47077株,构建rEfs(pGEX-ESAT-6)疫苗,抽提质粒进行PCR鉴定;经IPTG诱导表达后用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和鉴定。结果 以从rEfs抽提的质粒为模板进行PCR,扩增出约288 bp的ESAT-6基因片段,SDS-PAGE显示表达产物为32 ku的融合蛋白,约占菌体总蛋白的20%;Western blot显示该融合蛋白能被结核病患者血清识别。结论 成功构建了结核分枝杆菌rEfs(pGEX-ESAT-6)疫苗,表达的融合蛋白具有反应原性。

粪肠球菌介导的细粒棘球绦虫重组Efs-Eg95-EgA31疫苗的构建、鉴定及表达

目的构建粪肠球菌(Efs)为载体的细粒棘球绦虫重组Efs-Eg95-EgA31疫苗,并研究其表达效率。方法采用电穿孔技术将重组质粒pGEX-Eg95-EgA31转化粪肠球菌ATCC47077株,构建rEfs-Eg95-EgA31疫苗,抽提质粒进行PCR扩增鉴定;经IPTG诱导后进行10%SDS-PAGE和Western blot等分析和鉴定表达产物。结果以从rEfs抽提的质粒为模板进行PCR可扩增出约1016 bp的Eg95-EgA31融合基因片段,SDS-PAGE显示表达产物为62.5 ku的重组蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的11%;Western blot表明重组蛋白能被细粒棘球蚴感染的鼠血清识别。结论成功构建了细粒棘球绦虫rEfs-Eg95-EgA31疫苗,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。

铜绿假单胞菌重组Ef-PopB疫苗的构建、鉴定及表达

目的构建铜绿假单胞菌重组屎肠球菌(Enterococcus faecium,Ef)-PopB疫苗并观察其表达效率。方法以铜绿假单胞菌PA01株基因组DNA为模板,PCR扩增PopB基因,然后定向克隆至载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-PopB。将该质粒电穿孔转化Ef,构建rEf-PopB疫苗,抽提质粒,经双酶切和PCR鉴定后,加入异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导其表达,采用SDS-PAGE和Western blot分别对表达产物进行分析和鉴定。结果PCR成功扩增出1200 bp的PopB基因;双酶切证实PopB基因成功插入pGEX-1λT中;PCR证实rEf-PopB疫苗构建成功。SDS-PAGE检测重组疫苗表达相对分子质量约66×10^3的融合蛋白;Western blot检测Pa感染鼠血清能特异性识别该重组疫苗表达蛋白。结论成功构建了rEf-PopB疫苗,其表达产物具有免疫反应性,为Pa疫苗的研制奠定了基础。

铜绿假单胞菌PcrV疫苗研制现状

铜绿假单胞菌是一种广泛分布于自然界的条件致病菌,它是院内感染常见的病原体之一。铜绿假单胞菌对多种抗生素有耐药性,开发具有高效保护作用的疫苗是防治其感染的有效手段之一。铜绿假单胞菌钙反应蛋白V(PcrV)属III型分泌系统,具有良好的免疫原性,是疫苗开发的靶点之一。本文拟就PcrV的特性、重组抗原疫苗、DNA疫苗及重组沙门氏菌疫苗等方面的研究现状进行综述。

铜绿假单胞菌重组Ef-PopB疫苗诱导小鼠脾细胞因子和Treg变化的研究

目的观察铜绿假单胞菌重组Ef-PopB疫苗免疫及PA01株攻击后小鼠产生的保护力、脾细胞因子和Treg的变化。方法用5×10^(8) CFU的Ef-PopB疫苗灌胃免疫BALB/c鼠,每日接种1次,持续3 d,连续3周。初次免疫后4周,取5×107 CFU的PA01株滴鼻攻击小鼠。攻击后2周杀鼠,分离肺和脾,取肺组织培养肺细菌并行菌落计数;用PaAg培养脾细胞,PCR扩增IL-2、IL-4、IFN-γ、IL-10、IL-12和Foxp3基因。结果Ef-PopB疫苗组、空载体组和Ef对照组肺组织的菌落数分别为(0.37±0.02)×10^(8) CFU、(7.58±0.20)×10^(8) CFU和(7.55±0.19)×10^(8) CFU,差异有统计学意义(P<0.01);从疫苗组中抽提的脾细胞基因组的DNA分别扩增出453 bp的IL-2基因、359 bp的IL-4基因、399 bp的IFN-γ基因、301 bp的IL-10基因、300 bp的IL-12基因和250 bp的Foxp3基因。结论重组Ef-PopB疫苗可诱导小鼠脾细胞因子表达升高,产生混合型的Th1和Th2免疫应答。