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人工设计的Ribozymes体外切割HPV16 E6和E7 mRNA的研究 被引量:1
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作者 何玉凯 祁国荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第5期371-372,共2页
人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一类感染人体的皮肤粘膜并引起乳头状瘤病变的病毒。目前发现的HPV已有63型,不同型的HPV引起人体不同部位的病变。HPV 16主要与生殖系统的肿瘤尤其是子宫颈癌有密切关系。
关键词 RIBOZYME MRNA 乳头瘤病毒 切割
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人乳头状瘤病毒16型E2基因的克隆表达
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作者 何玉凯 徐钤 《第一军医大学学报》 CSCD 1989年第2期125-131,共7页
采用分子克隆技术在大肠杆菌中表达HPV16 E2 ORF。用Cfol和BamHI将含有E2基因的3.2kb片段从HPV16基因组中切出来,用S1核酸酶修平末端;同时,表达性载体pBD2 DNA用HindⅢ切开后也用S1核酸酶修平末端.两者连接后转化E coli BMH71—18.用原... 采用分子克隆技术在大肠杆菌中表达HPV16 E2 ORF。用Cfol和BamHI将含有E2基因的3.2kb片段从HPV16基因组中切出来,用S1核酸酶修平末端;同时,表达性载体pBD2 DNA用HindⅢ切开后也用S1核酸酶修平末端.两者连接后转化E coli BMH71—18.用原位杂交技术筛选出阳性重组子,进行DNA酶切分析和蛋白质SDS-PAGB分析及免疫学鉴定.我们认为表达的蛋白质为β-gal与E2的融合多肽。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 克隆表达 细胞转化
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DNA诊断学
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作者 何玉凯 徐钤 《自然杂志》 1991年第5期362-365,共4页
人们发现许多疾病与生物体内遗传物质DNA的变化有密切关系。通过检测DNA的变化来诊断与这些变化相应的疾病,便是DNA诊断学的研究目的。
关键词 DNA 核昔酸 杂交技术 基因片段 点突变 聚合酶链式反应 RNA 抗生物素 产前诊断 蛋白吸附
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第二套遗传密码
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作者 何玉凯 徐钤 《自然杂志》 1990年第8期500-502,共3页
1953年沃森(Warson)和克里克(Crick)提出了DNA分子的双螺旋模型,从而揭开了分子遗传学的序幕,人们开始从分子水平去认识生命遗传特征的机理。
关键词 反密码子 tRNA CRICK 碱基配对原则 遗传密码 反密码环 碱基对 双螺旋模型 克里克 沃森
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Subcloning and Expression of Human Papillomavirus Type 16 E2 Gene in E.Coli
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作者 何玉凯 徐钤 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1989年第2期163-168,共6页
By using molccular doning technique,the E2 gene of human papillomavirus type 16 wasexpressed in E.coli.The 3.2 kb fragment containing the E2 gene was cut out from HPV16 genomeand blunted with nuelease S1.The plasmid p... By using molccular doning technique,the E2 gene of human papillomavirus type 16 wasexpressed in E.coli.The 3.2 kb fragment containing the E2 gene was cut out from HPV16 genomeand blunted with nuelease S1.The plasmid pBD2 DNA was linearized with Hind Ⅲ and bluntedwith nuclasc S1 too.Afler ligation,thc ligsted DNA was used to transform E.coli BMH 71-18.The positive colonies were screened by in situ hybridization technique,and proceedcd to DNA analy-sis and proton analysis.The purified expressed protein was used to run immunoclctrophoreesis withantiserum against pBD2.We concktudcd that thc expressed protcin was a fusion protein ofbeta-galae-sidasc-E2 protein. 展开更多
关键词 human PAPILLOMAVIRUS TRANSACTIVATION CELL TRANSFORMATION CLONING and expression rocombinant DNA
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聚合酶链式反应(PCR)及其应用
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作者 何玉凯 徐钤 张基增 《国外医学(遗传学分册)》 1989年第1期1-4,共4页
聚合酶链式反应(简称PCR),又称体外基因放大技术,是用DNA聚合酶在体外系统中诱发一对引物间的DNA双链的合成过程。经过20~30次循环后,可使目的基因片段成百万倍地扩增,使得对该基因片段的分析研究更为便利。PCR技术自1985年创立以来,... 聚合酶链式反应(简称PCR),又称体外基因放大技术,是用DNA聚合酶在体外系统中诱发一对引物间的DNA双链的合成过程。经过20~30次循环后,可使目的基因片段成百万倍地扩增,使得对该基因片段的分析研究更为便利。PCR技术自1985年创立以来,经过不断改进,目前已成为分子生物学研究的重要手段。PCR技术已经应用于遗传病的基因诊断和产前诊断,病原体的鉴定,癌基因的分析研究等。最突出的是经PCR放大后的DNA片段可以直接进行顺序分析。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 PCR 基因诊断
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用聚合酶链式反应法检测人乳头状瘤病毒DNA
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作者 何玉凯 张基增 +1 位作者 高基民 徐钤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1989年第4期296-297,共2页
实验研究表明,宫颈癌的发生和发展与人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的感染有着密切关系。约有80%的宫颈癌组织中含有人乳头状瘤病毒第16型(HPV 16)及18型(HPV 18)的DNA,因此,检测宫颈癌组织中的HPV DNA对研究宫颈癌的发生... 实验研究表明,宫颈癌的发生和发展与人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)的感染有着密切关系。约有80%的宫颈癌组织中含有人乳头状瘤病毒第16型(HPV 16)及18型(HPV 18)的DNA,因此,检测宫颈癌组织中的HPV DNA对研究宫颈癌的发生和发展机制以及宫颈癌的防治都有重要意义。目前检测HPV DNA的手段都采用DNA探针杂交技术,该方法要有高比活的同位素,而且费时。聚合酶链式反应(Polymerase Chain Rea- 展开更多
关键词 聚合酶 链式反应法 乳头状瘤病毒
全文增补中
异香豆素类衍生物的卤化烷氧基化反应
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作者 孙慧敏 何玉凯 曹阳 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第4期859-864,共6页
以N-溴代丁二酰亚胺(NBS)、N-氯代丁二酰亚胺(NCS)分别为溴代、氯代试剂,醇类化合物作为反应原料及溶剂,实现了异香豆素类衍生物3,4-位的卤化烷氧基化反应。室温(25℃)下即可在3,4-位之间发生加成反应,合成具有潜在药理活性的异色满-1-... 以N-溴代丁二酰亚胺(NBS)、N-氯代丁二酰亚胺(NCS)分别为溴代、氯代试剂,醇类化合物作为反应原料及溶剂,实现了异香豆素类衍生物3,4-位的卤化烷氧基化反应。室温(25℃)下即可在3,4-位之间发生加成反应,合成具有潜在药理活性的异色满-1-酮类衍生物。对4-溴-3-甲氧基-3-苯基异色满-1-酮(Ⅳa)的合成反应条件进行了优化。结果表明,当n(NBS)∶n[3-苯基-4H-异色满-1-酮(Ⅲa)]=2.0∶1、Ⅲa 0.09 mmol、甲醇为2 mL时,在25℃下反应7 h,产物Ⅳa的收率为90%。在上述最佳反应条件下,也可高收率(80%~90%)得到异色满-1-酮类衍生物。产物结构经^(1)HNMR、^(13)CNMR和HRMS确定。 展开更多
关键词 异香豆素类衍生物 卤化烷氧基化 异色满-1-酮类衍生物 加成反应 精细化工中间体
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转运tRNA:第二套遗传密码
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作者 de Duve C 何玉凯 《国外医学(遗传学分册)》 1989年第3期134-136,共3页
第二套遗传密码,目前大部分还没有被破译,存在于氨基酰tRNA合成酶的结构中,该酶是催化氨基酸与相应的tRNA分子结合。这套密码可能是非简并性的,比经典的遗传密码更古老,更具有决定性。在本期第140页(指Nature 1988;333:140,译者注)上,Ho... 第二套遗传密码,目前大部分还没有被破译,存在于氨基酰tRNA合成酶的结构中,该酶是催化氨基酸与相应的tRNA分子结合。这套密码可能是非简并性的,比经典的遗传密码更古老,更具有决定性。在本期第140页(指Nature 1988;333:140,译者注)上,Hou和Schimmel阐明了这套密码系统起作用的一种机制。作者揭示了一对碱基可以决定一个tRNA分子的氨基酸特异性。遗传信息翻译的准确性依赖于两个连续的、独立的配对精确性:第一,氨基酸与tRNA分子的结合;第二,负载有氨基酸的tRNA分子与连接在核糖体的mRNA结合。 展开更多
关键词 遗传密码 TRNA
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