食品能力验证样品中沙门氏菌的分离与多相分类鉴定

为沙门氏菌的快速检测与鉴定提供参考,从传统标准检测方法、特异性PCR、分子系统发育3个层面,其中传统标准检测方法基于食品安全国家标准GB 4789.4-2016《食品微生物学检验沙门氏菌检验》、特异性PCR基于invA基因、分子系统发育基于16S rDNA,对能力验证(CFAPA-805)样品进行沙门氏菌的分离鉴定。结果表明:3种检测方法结果一致,样品341中检出沙门氏菌,其中生化鉴定、血清学鉴定与分子系统发育鉴定结果显示,此次阳性样品中的沙门氏菌为沙门氏菌生化群(Ⅰ),肠炎沙门氏菌肠炎亚种,血清分型为O:9,12:H:g,m。本次实验室的能力验证结果为“满意”,肯定实验室沙门氏菌检测能力。通过比较,特异性PCR鉴定可以确定沙门氏菌是否检出,生化鉴定、血清学鉴定和分子系统发育鉴定可以确认沙门氏菌的生化群、血清分型与分子分型。

连作年限对辣椒根际土壤真菌群落结构的影响

为了解不同连作年限下辣椒根际土壤真菌群落的结构特征,选取不同连作年限(1、3、5、10 a)下的辣椒根际土壤,采用Illumina Miseq高通量测序技术分析土壤真菌群落的结构和多样性,并探究其与土壤理化因子的相关性.结果表明:相较于连作1 a处理,延长连作年限导致真菌香农指数和辛普森指数显著下降(P<0.05);同时,连作年限变化对真菌群落结构有显著影响.在物种组成中,属于真菌优势菌门的有子囊菌门、担子菌门、被孢霉门和梳霉门,其中,子囊菌门是4个连作处理土壤的绝对优势菌群.在不同连作年限处理的土壤中,镰刀菌属、毛壳菌属和Ovatospora是共有的优势真菌属,其中,镰刀菌属的相对丰度在连作5 a时达到最高,10 a后显著下降(P<0.05);同时,枝顶孢霉属、青霉菌属和曲霉菌属等生防菌的相对丰度在长期连作后显著增大,而毛壳菌属、木霉菌属和被孢霉属等有益微生物的相对丰度随着连作年限的延长逐渐下降.冗余分析显示,土壤pH及有效磷、速效钾、有机质含量是影响真菌群落结构变化的主要驱动因子.本研究中,土壤真菌群落多样性下降、有益微生物减少和病原菌积累可能是造成辣椒连作障碍的原因.

福建特色茶叶中细菌群落结构及多样性研究

【目的】探明福建特色茶叶中的细菌群落结构特征,以及细菌群落结构在不同种类茶叶间的分布情况。【方法】采集福建特色茶叶大红袍、铁观音、花茶共15组样品,通过16S rRNA高通量测序,对不同种类茶叶中细菌的群落结构进行解析。【结果】经过高通量测序以及统计分析,最终共获得11 472个OTU,包括37个门,95个纲,150个目,207个科,277个属。比较3种茶叶,发现大红袍在物种丰度上要高于铁观音与花茶,花茶的物种多样性要高于大红袍与铁观音,且同为乌龙茶的大红袍与铁观音在细菌群落结构上更为相似。在属水平上,10组大红袍样本中共有的优势属为乳球菌属、双歧杆菌属及拟杆菌属,2组花茶样本中共有的优势属为拟杆菌属,3组铁观音中共有的优势菌属为乳球菌属与双歧杆菌属。其中,丰度前10的优势属中有5个为乳酸菌。通过共现网络分析,表明乳酸菌与其显著相关的大部分物种呈互利生长的关系。【结论】大红袍与铁观音的优势菌纲为芽孢杆菌纲和放线菌纲,花茶的优势菌纲为梭状芽胞杆菌纲与拟杆菌纲。比较3种茶叶的细菌群落结构,发现茶叶种类可能是影响细菌群落结构变化的重要因素之一,且乳酸菌在3种茶叶中均为主要优势细菌。

福建省有机肥中养分和重金属含量特征

【目的】分析福建省有机肥中养分和重金属含量,了解福建省有机肥的总体质量状况。【方法】于2019年7—9月期间,在福建南平、漳州、龙岩、三明和福州等5个地区收集有机肥样品50份,分析有机肥中养分和重金属含量特征,比较不同原料来源有机肥中养分和重金属含量差异。【结果】依据现行的NY 525—2012有机肥料标准,在采集的福建有机肥中,pH、有机质、氮磷钾总量和水分含量不符合率分别为8%、10%、28%和32%;重金属Pb、Cd、Cr、Hg、As均有检出,但不存在超标现象。不同原料来源的有机肥,生物有机肥中的全钾及氮磷钾总量显著高于其他原料配方形成的有机肥;除Hg外,其他重金属含量均以畜禽粪便为原料形成的有机肥较高,生物有机肥中的重金属含量最低;不同畜禽粪便为原料形成的有机肥,猪粪肥中的全氮、全磷及氮磷钾总量均显著高于鸡粪肥和羊粪肥;对重金属而言,Cr含量以猪粪肥最高,其次是鸡粪肥、羊粪肥;Pb、Cd、Hg、As含量以鸡粪肥最高,且鸡粪肥中的As含量显著高于以羊粪和猪粪为原料形成的有机肥。【结论】本研究所收集的福建省有机肥样品没有重金属超标现象,但养分含量不达标,水分含量超标比例较高,氮磷钾总量不足问题较突出,生产上需要特别注意氮磷钾养分的需求平衡。

长期沼液灌溉对槟榔芋根区土壤理化性质及重金属含量的影响

目的探究施用沼液对槟榔芋根区土壤理化性质及重金属含量的影响。方法采集连续施用沼液6年和未施用沼液的槟榔芋种植地块土壤,测定土壤中Cu、Zn、Pb、Cd、Cr、Hg、As共7种重金属的含量并进行污染风险评价,同时测定土壤的基本理化指标,分析土壤中重金属含量与土壤理化性质间的相关性。结果长期沼液灌溉会显著增加槟榔芋根区土壤中有机质、碱解氮和速效钾含量,但也会导致土壤中Cu、Zn、Pb、Cd、Cr显著累积,尤其Cu和Zn含量均超出了GB 15618—2018中规定的风险筛选值。连续施用沼液增加了土壤重金属的综合污染水平和潜在生态风险,总体呈现轻度污染等级,具有中等水平的潜在生态风险,其中Cu对综合污染水平的贡献率最大,Cd和Hg对综合潜在生态风险的贡献率最大。土壤中Cu、Zn、Pb、Cd、Cr之间可能存在污染同源性,其含量基本与土壤有机质、碱解氮和速效钾呈极显著正相关,与速效磷呈显著负相关。结论沼液还田虽然会提高槟榔芋根区土壤整体养分状况,但长期沼液灌溉也增加了土壤重金属的污染风险,尤其是Cu、Cd、Hg可能引起的污染问题要引起重视。

长期施用沼液对土壤中四环素类及磺胺类抗性基因分布的影响

【目的】探讨长期施用猪粪沼液对土壤环境中抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)分布的影响及其季节变化。【方法】分别在春、夏、秋、冬4个季节采集养猪场周边长期用沼液作为肥料的土壤,同时采集当地未施用过沼液的土壤作为对照,采用荧光定量PCR方法,对土壤中四环素类和磺胺类ARGs进行检测和定量分析。【结果】在施用沼液的土壤中能检测到11~13种ARGs,沼液的长期施用提高了土壤中ARGs的多样性,显著增加了土壤中tetG、sul1和sul2等基因的相对丰度,使四环素类和磺胺类ARGs在土壤中的存在水平升高。上述2类ARGs在土壤中的分布具有明显的季节性,均在春季具有更高的相对丰度。在长期施用沼液的土壤中存在大量的tetG、tetZ、tetM、tetO、tetW、sul1和sul2基因,这些基因在不同季节里都是优势ARGs。【结论】沼液农用会增加土壤中ARGs的存在水平,因此需要加强优化畜禽废弃物发酵工艺,以减少ARGs在沼液肥中的残留。

番茄交链孢病原菌鉴定及产毒分析

目的分析番茄病果中交链孢病原菌的分离鉴定及产毒情况。方法采集福建省5个县市番茄病果,通过切片和组织分离法从番茄病害部位分离纯化病原菌,结合形态学特征和分子生物学对病原菌进行鉴定。利用超高效液相色谱-串联质谱法对分离得到的交链孢菌产毒能力进行检测分析。结果在发病番茄病害部位分离得到的3株互隔交链孢菌株均具产毒能力,但毒素种类和产毒能力各有不同。其中,NH06菌株产毒量最高,可产生细交链格孢酮酸(tenuazonic acid,TeA)、交链孢酚(alternariol,AOH)、交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether,AME)、交链孢烯(altenuene,ALT)、腾毒素(tentoxin,TEN)5种毒素,而NP002和NH07仅检出产生4种毒素。结论番茄病果中存在多种交链孢菌,其产毒能力存在差异。检测发现番茄病果含链格孢霉毒素时,应及时处理以防成为交链孢菌的污染源,同时应加强产毒病果产地的环境消毒和对同批果品的保护性灭菌。

大黄鱼内脏白点病的病原分离鉴定及致病性

为探究引起福建省福州市连江县某养殖场内大黄鱼内脏白点病的致病原,本研究从患白点病大黄鱼肝脏中分离纯化出一株优势菌DGZ5.形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rRNA基因序列分析、18种毒力基因检测、人工回归感染试验以及对36种抗菌药物敏感性检测的结果显示,DGZ5菌株为杀香鱼假单胞菌.DGZ5菌株携带ompA、sigX、flgM、secY和编号为EPB94769.1的5种毒力基因,对体长为10~15 cm的大黄鱼的半致死浓度(LD_(50))为8.07×10^(6)cfu·mL^(-1).其对头孢他啶、庆大霉素、丁胺卡那和新霉素等12种抗生素药物敏感.组织病理切片结果显示:患病大黄鱼的肝脏和肾脏发生了明显的组织病理变化.本研究结果为由该菌引起的大黄鱼内脏白点病的有效防治提供了科学依据.

长期施用沼液对槟榔芋根际土壤真菌群落多样性的影响

【目的】探究施用沼液对槟榔芋根际土壤真菌群落多样性的影响,为沼液更好的还田利用提供理论依据。【方法】采集连续施用沼液6年和未施用沼液的槟榔芋种植地块土壤,通过Illumina Miseq高通量测序平台,分析土壤真菌群落多样性、组成及其与土壤理化性质间的关系,揭示影响真菌群落的主要土壤因子。【结果】与未施用沼液土壤比较,连续施用沼液6年的土壤有机质、碱解氮和速效钾含量都有明显提高。连续施用沼液后土壤真菌物种OTUs数量、群落丰富度指数和多样性指数也明显增加。真菌门水平鉴定出子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)、被孢霉门(Mortierellomycota)、球囊菌门(Glomeromycota)等类群,其中子囊菌门为土壤中丰富度最高的真菌类群。连续施用沼液明显增加了被孢霉门中被孢霉纲的相对丰度,而球囊菌门中球囊菌纲则大幅减少;连续施用沼液后土壤真菌属水平优势类群也发生明显改变。冗余分析结果表明,引起土壤真菌群落多样性变化最主要的环境因子为碱解氮、速效钾和有机质。【结论】长期施用沼液改变了槟榔芋根际土壤真菌所处的微环境,进而导致其群落组成和多样性发生变化。

金鱼源维氏气单胞菌的分离鉴定与耐药特性研究

为探究引起福州某养殖场内金鱼腐皮病的病原,本研究从发病鱼皮肤溃疡处分离纯化出一株革兰氏阴性优势菌JY01。形态学特征分析显示该菌株为杆状、携带极生鞭毛,16S rRNA基因序列分析和构建系统发育树结果显示其与维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)相似度最高且聚为一个分支,结合API全自动细菌鉴定仪鉴定结果确定菌株JY01为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。人工回归试验结果表明该菌株对金鱼具有致病性,临床症状与自然发病症状相似,且从其病灶组织中再次纯化到相同的菌株,对金鱼的半数致死浓度(LD_(50))为5.1×10^(6)cfu/mL。采用30种抗菌药物进行敏感性试验,结果显示菌株JY01对四环素、米诺环素、多西环素和多粘菌素B等14种药物敏感。全基因组序列分析结果显示该菌株含有240个毒力基因和175个耐药基因。本研究首次对分离自金鱼的维氏气单胞菌进行了生理生化特征,致病性和耐药性等系统分析,为由该菌引起金鱼溃疡疾病的有效防治提供参考依据,并为其病害的防治研究累积资料。

澳洲墨瑞鳕源鱼假单胞菌的致病性及药敏特性研究

为进一步研究本实验室前期分离的一株鱼假单胞菌(Pseudomonas piscis)MC042基因的进化和生物学特性,本研究对菌株MC042的16S rRNA及看家基因gyrB,rpoD和rpoB基因序列进行分析,结果显示菌株MC042与模式菌株Pseudomonas protegens CHA0T和Pseudomonas saponiphila DSM 9751T聚集到一个进化分支。经回归感染试验和致病性检测,结果显示该菌株对澳洲墨瑞鳕具有一定的致病性,感染该菌的澳洲墨瑞鳕多个组织出现肿大充血等症状,且从其溃疡组织中再次分离到相同的菌株,其对澳洲墨瑞鳕源鱼的半数致死浓度(7 d)为4.82×106cfu/mL。该分离株的药物敏感性试验结果显示,菌株MC042对头孢他啶、环丙沙星、卡那霉素等11种药物敏感;对多西环素和头孢曲松2种药物中度敏感;对四环素、头孢拉定、呋喃唑酮等17种药物耐药。本实验为由鱼假单胞菌引起的澳洲墨瑞鳕溃疡疾病的有效防治提供了参考依据。

澳洲墨瑞鳕源寄鱼不动杆菌的致病性及药敏特性研究

为进一步探明本实验室前期从澳洲墨瑞鳕溃疡组织中首次分离的寄鱼不动杆菌(Acinetobacter piscicola)LW15的致病性和药敏特性,本实验再次明确了该菌株的系统进化地位,同时进行人工回归感染试验检测其致病性。结果显示菌株LW15的16SrDNA与Acinetobacter guillouiae CIP63.46T同源性最高,为97.7%,与本实验室前期分离的系同一菌株,为寄鱼不动杆菌;动物回归实验结果显示该菌为澳洲墨瑞鳕致病菌,半数致死浓度为4.26×106 cfu/mL。基于生物信息学方法对该分离菌进行毒力基因分析,结果显示其携带224个毒力基因,其中invasion、adherence和toxin等3类毒力基因中分别包含2、43和3个基因。对LW15病原菌进行药物敏感性检测,结果显示该菌株对氧氟沙星、环丙沙星、卡那霉素、庆大霉素、头孢曲松、丁胺卡那、哌拉西林等21种药物敏感,对羧苄西林和呋喃唑酮2种药物中度敏感,对四环素、克林霉素、头孢拉定、头孢氨苄、苯唑西林等7种药物不敏感。本研究为由寄鱼不动杆菌引起的澳洲墨瑞鳕溃疡疾病有效防治提供参考依据和实验数据。

水产饲料中细菌总数测量不确定度的评定

为提高水产饲料细菌总数检测结果的精确度,从送检样品中获得20个样品细菌总数的检测结果,采用合并样本标准偏差的方法评定20个样品细菌总数的扩展不确定度为0.12。当检测结果以2次测定对数值的平均值表示时,其取值于lgA±0.12之间。

不同来源生物炭浸提液对辣椒种子萌发与幼苗生长的毒理效应

为明确生物炭对辣椒生长的毒性效应,以生物炭浸提液培养方法研究不同来源(水稻秸秆、杂木、牛粪和污泥)生物炭浸提液对辣椒种子的萌发及幼苗生长的影响。结果表明,木质生物炭(MZBC)浸提液促进了辣椒种子的萌发,而污泥生物炭和牛粪生物炭浸提液明显抑制了辣椒种子的萌发,且进入幼苗阶段,抑制影响仍在持续。此外,污泥生物炭(WNBC)和牛粪生物炭(NFBC)浸提液处理下幼苗根系超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性显著增加,且牛粪生物炭浸提液处理的幼苗根系丙二醛(MDA)含量明显升高,表明牛粪生物炭处理下幼苗根系细胞膜完整性被破坏,发生脂质过氧化,表现出明显的毒性效应;同时,4个生物炭浸提液处理下的叶片MDA含量均未高于CK处理。以上结果表明,相较于叶片,根系对外界环境更敏感,更容易受到伤害。

亚肉座菌天然产物的分离鉴定及抗肿瘤活性

亚肉座菌能侵染粉虱和介壳虫,具有悠久的生物防治历史,但关于其天然产物的种类及抗肿瘤活性研究尚不深入。本研究借助硅胶柱、HPLC等色谱技术从亚肉座菌发酵液中分离纯化到6个化合物。基于核磁共振和质谱数据解析,化合物1–6依次鉴定为:5α,8α-表二氧-24(R)-甲基胆甾-6,22-二烯-3β-醇5α,8α-epidioxy-24(R)-methylcholesta-6,22-diene-3β-ol(1),杜斯塔宁dustanin(2),3β-乙酸基-15α,22-二羟基何伯烷3β-acetoxy-15α,22-dihydroxyhopane(3),麦角固醇ergosterol(4),7β,15α,22-三羟基何伯烷7β,15α,22-trihydroxyhopane(5)和5-(羟甲基)呋喃-3-羧酸flufuran(6),化合物1和6为首次从虫生真菌中获得。对化合物进行抗肿瘤活性测试发现,化合物1和5对人肝癌细胞(BEL-7404)展示显著的抗肿瘤活性,IC50值分别为28μmol/L和12.4μmol/L,而它们对人正常肝脏细胞(HL-7702)和肾脏上皮细胞(HEK-293T)均未呈现出明显活性。该研究对阐明亚肉座菌代谢产物及其活性提供了重要数据,为开发抗肿瘤新药提供了理论参考。

辣椒连作对土壤细菌群落的影响

【目的】土壤微生物对农业生态系统的长期可持续性至关重要。为探讨不同连作年限对辣椒土壤细菌群落结构和潜在功能的影响。【方法】采用16S rRNA基因高通量测序PICRUSt功能预测相结合的研究方法,对不同连作年限下(1Y、3Y、5Y和10Y)的辣椒土壤细菌微生物群落结构和功能进行分析。【结果】微生物多样性指数和共生网络复杂度随连作年限的延长而降低,同时,连作年限变化对细菌群落组成有显著影响。不同的土壤细菌种群对连作措施的响应程度不一,长期连作增加了变形菌门和拟杆菌门的相对丰度,但降低了绿弯菌门、酸杆菌门、厚壁菌门和髌骨细菌门的相对丰度。PICRUSt功能预测结果表明,延长连作年限改变了土壤细菌整体的氮、磷代谢能力,导致细菌群预测功能基因发生了变化,能量代谢、氨基酸代谢和碳水化合物代谢等重要代谢功能基因减少,而折叠、分类和降解、复制和修复、膜转运、细胞生长与死亡等功能基因丰度明显增加。冗余分析表明,土壤有机质和有效磷是影响细菌群落迁移和功能变化的关键土壤理化因子。【结论】延长辣椒连作年限后,细菌群落结构改变和多样性下降导致土壤微生物群落功能失调可能是造成辣椒连作障碍的原因之一。

新时代高职院校学生自由观培养与心理干预策略研究

本文分析了高职生心理危机成因，从提升学生自身责任意识担当、促使学生严格遵守校规校纪、注重养成严格自律法律意识、发挥学校思想政治教育作用、形成心理危机干预社会合力等方面，提出了新时代加强高职生自由观培养与心理干预的策略，希望对相关工作有所裨益。

百色老区迸发石油新活力

广西百色，一方洒满烈士鲜血的热土，一座英雄辈出的红色之城。1929年12月11日，百色右江河畔的隆隆炮响，震撼了千里南疆。这一天，邓小平、张云逸等革命先辈领导了百色起义，在中国革命史上写下了辉煌的一页。邓小平还在此建立了中国红军第七军和右江革命根据地，百色市因此名震天下。