应用酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌患者胸腔积液表皮生长因子受体基因突变

目的探讨酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液表皮生长因子受体基因(EGFR)外显子19缺失和外显子21 L858R突变的临床意义。方法采用EGFR基因突变酶切富集及非酶切富集PCR法对30例NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21 L858R突变进行分析。结果30例NSCLC患者中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因外显子19缺失10例(33.3%)和外显子21 L858R突变5例(1.7%),非酶切富集PCR法则仅能分别检出6例(20.0%)和1例(3.3%);两种方法检出率差异有统计学意义(P=0.032)。在接受吉非替尼治疗的4例患者中,2例检出EGFR基因突变患者治疗后肿瘤均部分缓解。结论酶切富集PCR法可以高效、经济、准确地检测NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因突变,可能成为临床NSCLC患者选择EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的预测方法。

非小细胞肺癌患者外周血表皮生长因子受体基因突变的检测及临床意义

目的探讨外周血表皮生长因子受体(EGFR)基因突变在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼治疗适宜患者筛选中的价值。方法对2005年12月至2007年12月在广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心治疗的170例NSCLC患者,应用EGFR基因突变酶切富集PCR法分析血浆游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21L858R突变。分析血浆EGFR基因突变与性别、吸烟史、病理类型、TNM分期、吉非替尼治疗客观缓解率和疾病无进展生存期间的关系。结果 170例血浆标本共检出血浆EGFR基因突变77例,突变率为45.3%。血浆EGFR基因突变主要见于肺腺癌患者(P<0.001)及非吸烟者(P=0.001)。在33例接受吉非替尼治疗的患者中,血浆EGFR基因突变阳性患者的客观有效率和中位疾病无进展生存期均显著优于血浆EGFR基因突变阴性患者(P=0.001)。结论血浆游离核酸酶切富集PCR法能够灵敏而特异地检测NSCLC的EGFR基因突变。突变检测阳性者对吉非替尼的反应率明显高于野生型患者。

下呼吸道鲍曼不动杆菌感染的临床分布及耐药性分析

目的了解下呼吸道鲍曼不动杆菌感染的临床分布及其对常用抗生素的耐药情况。方法分析我院132例下呼吸道感染住院患者分离的鲍曼不动杆菌的药物敏感试验结果及其分布情况。结果鲍曼不动杆菌主要分布在重症监护病房、儿科、神经外科,药敏试验显示对碳青霉烯类、含酶抑制剂、氨基糖苷类药物敏感性较高,对β-内酰胺类药物普遍耐药。2009年至2011年鲍曼不动杆菌耐药率与2002年～2004年相比,呈上升趋势,尤以对氟喹诺酮类抗生素耐药率升高显著。结论鲍曼不动杆菌主要侵犯重症监护病房、儿科、神经外科患者,鲍曼不动杆菌对各抗菌药物的耐药性呈上升趋势。

葫芦素B抑制JAK2/STAT3信号拮抗非小细胞肺癌H1975细胞增殖的研究

目的:证明葫芦素B通过影响JAK2/STAT3信号活化抑制非小细胞肺癌(NSCLC)H1975细胞增殖。方法:采用不同浓度葫芦素B作用于H1975细胞不同时间,采用CCK-8法测定细胞增殖抑制情况,采用PI染色法检测细胞周期分布,采用Western blot法测定EGFR、JAK2、STAT3蛋白表达。结果:葫芦素B浓度10、100、1 000 nmol/L作用24、48 h的细胞增殖抑制率均高于葫芦素B浓度0 nmol/L,其中1 000 nmol/L>100 nmol/L>10 nmol/L(P<0.05)。葫芦素B浓度10、100、1 000 nmol/L作用48 h的细胞增殖抑制率均高于作用24 h(P<0.05)。细胞增殖抑制率随着葫芦素B浓度增加和作用时间延长逐渐增高(P<0.05)。葫芦素B浓度100、1 000 nmol/L作用24、48 h的G2/M期阻滞率均高于葫芦素B浓度0、10 nmol/L,其中1 000 nmol/L>100 nmol/L(P<0.05)。葫芦素B浓度100、1 000 nmol/L作用48 h的G2/M期阻滞率均高于作用24 h(P<0.05)。G2/M期阻滞率随着葫芦素B浓度增加和作用时间延长逐渐增高(P<0.05)。葫芦素B浓度100、1 000 nmol/L作用H1975细胞后p-STAT3与p-JAK2的表达均低于葫芦素B浓度0、10 nmol/L,其中1 000 nmol/L>100 nmol/L(P<0.05)。结论:葫芦素B能够抑制H1975细胞增殖、阻滞细胞周期,其机制与葫芦素B抑制JAK2/STAT3信号活化有关。

葫芦素B抑制STAT3/Bcl-2表达诱导非小细胞肺癌H1975细胞凋亡

目的探讨葫芦素B对非小细胞肺癌H1975细胞凋亡的影响及可能的机制。方法应用不同浓度葫芦素B作用H1975细胞不同时间,分别使用Annexin/7-AAD双染法检测细胞凋亡,Western blot法测定信号转导与转录活化因子3(STAT3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达。结果0 nM的葫芦素B处理后24、48 h的细胞增殖抑制率分别为(2.86±0.11)、(3.21±1.26)%,20 nM的分别为(3.10±0.29)、(4.09±0.65)%,40 nM的分别为(4.09±0.12)、(7.59±0.74)%,80 nM的分别为(4.61±0.14)、(32.63±0.67)%。0、20 nM葫芦素B处理后24、48 h对H1975细胞增殖抑制率无明显影响;40、80 nM葫芦素B处理后24、48 h,对H1975细胞增殖抑制率均高于0 nM与20 nM,差异均有统计学意义(P<0.05)。葫芦素B处理后24 h的细胞增殖抑制率均低于处理后48 h,呈时间-剂量依赖性增加,80 nM葫芦素B作用48 h对H1975细胞的细胞凋亡诱导作用最为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。40 nM以上浓度葫芦素B作用H1975细胞48 h后p-STAT3、STAT3、Bcl-2明显降低。结论葫芦素B通过抑制STAT3信号活化下调Bcl-2蛋白表达诱导H1975细胞凋亡的发生。

酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测中的应用

目的评价酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变临床检测中的可行性。方法应用酶切富集PCR及非酶切富集PCR法分析非小细胞肺癌患者EGFR基因突变状况。结果在50份肿瘤组织、55份血浆、15份血清标本中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因突变22例(44.0%)、29例(52.7%)、9例(60.0%),而非酶切PCR法则仅能检出EG-FR基因突变16例(32.0%)、7例(12.7%)、2例(13.3%),P=0.216、<0.001和0.008;应用酶切富集PCR法检测15例配对血浆、组织标本和15例配对血浆、血清标本EGFR基因突变,其检出率无明显差异(53.3%vs 46.7%和66.7%vs 60.0%)。结论酶切富集PCR法适用标本广泛、简便易行,便于临床非小细胞肺癌患者EGFR基因突变筛查。

吉非替尼治疗晚期肺腺癌疗效的相关因素分析

目的旨在分析吉非替尼治疗晚期肺腺癌疗效的预测因素。方法对2005年12月至2007年12月期间在广州医学院第一附属医院接受吉非替尼单药治疗且进行了EGFR基因突变检测的29例局部晚期或转移性肺腺癌患者的临床、病理特征与吉非替尼治疗疗效的相关情况进行了回顾性分析。结果 29例患者客观缓解率为51.7%,疾病控制率为82.8%,中位疾病进展时间3.2个月;EGFR基因突变阳性患者的客观缓解率、疾病控制率和疾病无进展时间均显著优于EGFR基因野生型患者;不吸烟患者的客观缓解率和疾病无进展时间均显著优于吸烟者;性别、临床分期状况与吉非替尼治疗疗效无明显相关。结论吉非替尼治疗晚期复治性肺腺癌疗效显著,不良反应轻微;EGFR基因突变阳性和不吸烟是预测吉非替尼治疗肺腺癌疗效的有益标志。

后路减压内固定术治疗胸腰椎爆裂性骨折

采用椎弓根钉系统内固定术治疗胸腰椎爆裂性骨折23例。手术前后用X线平片测量骨折椎体复位情况,椎体前、后缘高度由术前40%、60%恢复到术后的70%、90%;Cobb角由术前平均18.5°矫正到术后平均8°。

纳米材料在纳米热喷涂中的应用

简要介绍了有关纳米热喷涂的研究情况,以及纳米热喷涂的技术特点。与传统喷涂层相比,纳米结构涂层在耐磨、防腐等性能方面呈现出优异性能和良好的发展前景。

肺吸虫病合并旋毛虫病1例

患者,男, 16岁,原籍重庆,1年前来深圳居住,因眼睑水肿、胸痛1个月于2010年10月21日入院.患者于2010年9月中旬无明显诱因出现双侧眼睑水肿、左下胸痛,无咳嗽、咳痰,无畏寒、发热、肌痛,无盗汗、咯血、体重下降,无恶心、呕吐、腹泻等.体格检查：体温36.0℃, 心率65 次/min, 眼睑水肿,全身未及皮疹和皮下包块,口唇无紫绀,胸骨无压痛,左胸廓饱满,左下肺呼吸运动及语颤减弱,左下肺呼吸音消失,腹软,无压痛及反跳痛,肝、脾未见异常,双下肢无水肿,无杵状指（趾）.

手术配合中药熏洗治疗股骨颈骨折15例

笔者2000年1月～2003年1月采用手术配合中药熏洗治疗股骨颈骨折15例,取得满意疗效。现报告如下。1资料与方法1.1一般资料本组15例,男性9例,女性6例;年龄38～65岁,平均46.8岁;右侧11例,左侧4例;头下型2例,头颈型10例，经颈型3例；GardanⅢ型12例，Ⅳ型3例。均为跌伤所致。

空心加压螺丝钉固定配合中药治疗股骨颈骨折80例

目的:观察空心加压螺丝钉固定配合中药治疗股骨颈骨折的临床疗效。方法:80例行空心加压螺丝钉固定配合中药治疗。结果:78例获随访,骨折愈合69例,愈合时间3～6个月,不愈合9例(11.54%)。14例发生股骨头缺血性坏死(17.95%)。结论:空心加压螺丝钉固定配合中药治疗股骨颈骨折可提高骨折愈合率,减少股骨头坏死。

下呼吸道感染标本中产ESBLs酶的大肠埃希氏菌与肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的探讨下呼吸道产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法采用MicoScaWalkway40SI及纸片扩散法进行菌株鉴定及药敏试验并分析细菌分布和耐药性。结果我院下呼吸道产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌2010年为89.2%和42.6%,2011年为84.6%和46.2%,这两年差异无统计学意义(P>0.05);产ESBLs对大部分抗菌药物耐药,对亚胺培南、氧哌嗪青霉素/他唑巴坦、丁胺卡那霉素、头孢西丁耐药率较低。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs发生率这两年无明显变化,及时监测ESBLs菌的发生率及其耐药趋势,对于指导临床抗菌药物合理应用及医院感染的控制具有重要意义。

葫芦素B靶向抑制STAT3抗吉非替尼耐药非小细胞肺癌的研究

目的探讨葫芦素B通过抑制STAT3信号活化,从而拮抗EGFRT790M突变介导的NSCLC吉非替尼耐药的机制。方法利用不同浓度的葫芦素B作用于PC-9/GR细胞的不同时期,用CCK-8法测定细胞的增殖抑制、PI染色法检测细胞的周期、Annexin-v/7-AAD双标记法检测细胞的凋亡,检测不同浓度以及作用时间的葫芦素B对PC-9/GR细胞增殖抑制、细胞周期阻滞及细胞凋亡诱导效应。结果葫芦素B能够显著抑制PC-9/GR细胞增殖以及对细胞周期的G2/M期有明显阻滞作用,而且呈浓度依赖,随着浓度增加,其增殖抑制作用和阻滞活性也增高,同时观察到PC-9/GR细胞分别加入10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L三种浓度的葫芦素B作用后,抑制了p-Jak2、p-STAT3的表达,且这种抑制呈浓度依赖性,但不影响p-EGFR的激活以及总EGFR、Jak2、STAT3的表达。结论葫芦素B能够抑制吉非替尼耐药NSCLC中异常激活的STAT3信号途径,这种抑制具有选择性,从而诱导吉非替尼耐药NSCLC的凋亡。