糖皮质激素对小胶质细胞内钙的影响

目的观察糖皮质激素对小胶质细胞内钙的影响并初步探讨其机制。方法体外培养神经小胶质细胞株BV-2,使用Fluo3-AM作为钙荧光染料,激光共聚焦显微镜实时扫描观察氢化可的松处理后BV-2细胞内钙浓度的动态变化情况。结果氢化可的松和阳性对照药尼古丁均能显著升高BV-2细胞内钙水平(P<0.05);实时扫描显示氢化可的松即刻引起细胞内钙升高,15 s左右达到峰值,持续约10 s后开始下降,200 s左右恢复至基态,并且这一作用显示出与尼古丁升高细胞内钙效应的一致性。糖皮质激素受体拮抗剂RU486不能取消氢化可的松升高BV-2细胞内钙的效应(P>0.05);而α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)阻断剂甲基牛扁亭碱(MLA)可以拮抗氢化可的松升高BV-2细胞内钙的效应(P<0.05)。结论氢化可的松通过影响α7nAChR升高小胶质细胞内钙水平,这一作用不但证实了糖皮质激素的非基因组效应,同时提示糖皮质激素可能作为α7nAChR的内源性配体。

姜黄素对人骨肉瘤MG63细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素诱导人骨肉瘤细胞株MG63凋亡的机制。方法不同浓度（0、25、50和75μM）姜黄素作用MG63细胞24 h后,CCK8法检测细胞体外增殖,TUNEL染色法检测细胞凋亡,Western blotting检测AKT/Bax-Bcl-2/Caspase 3等内源性凋亡途径相关蛋白表达水平。结果 CCK8实验结果显示在0~75μM范围内,50μM以上浓度的姜黄素能显著抑制MG63增殖,诱导细胞凋亡、p-AKT蛋白水平明显降低,而Bax蛋白及剪切的Caspase 3蛋白水平则显著增高。结论姜黄素通过影响AKT/BaxBcl-2/Caspase 3途径诱导MG63细胞凋亡。

α7烟碱受体在糖皮质激素调节小胶质细胞炎症反应中的作用

背景小胶质细胞持续激活可引起脑内慢性炎症反应,并导致神经元损伤.糖皮质激素（GCs）介导的体液抗炎通路在脑内炎症反应调节中发挥重要作用.一种新的炎症调节机制一胆碱能神经抗炎通路也参与脑内炎症反应的调节,该通路的关键分子α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChR）在其中发挥核心作用.作为机体内两个重要的内源性抗炎系统,GCs与胆碱能抗炎通路的关系如何,尚未有报道.小胶质细胞同时表达糖皮质激素受体GRs和α7nAChR,是体液和胆碱能抗炎通路的共同靶标.因此,本研究利用小胶质细胞探讨GCs介导的体液抗炎通路与α7nAChR介导的胆碱能抗炎通路之间的关系.目的探讨GCs对胆碱能抗炎通路的调节,并初步阐明其调节机制.方法建立LPS刺激的小胶质细胞BV-2炎症模型,观察α7nAChR拮抗剂甲基牛扁亭碱（MLA）对生理浓度氢化可的松（Hydr）抗炎作用的影响.ELISA法测定细胞培养上清中炎症因子TNF-α和IL-1β的含量.RT-PCR和Westernblot检测Hydr对α7nAChRmRNA和蛋白表达的影响.结果生理浓度Hydr抑制LPS诱发的小胶质细胞炎症反应：500、250nM（生理浓度范围）Hydr可抑制LPS诱发的TNF-α和IL-1β生成（P〈0.01,P〈0.05）.α7nAChR参与了生理浓度Hydr的抗炎作用：MLA可以拮抗300nM（生理浓度）Hydr抑制TNF-α和IL-1β生成的作用（P〈0.01,P〈0.05）.Hydr对BV-2细胞α7nAChR的调控：300nMHydr可增加α7nAChR的mRNA和蛋白表达.结论α7nAChR参与了生理浓度糖皮质激素介导的抗炎作用,这一作用可能与糖皮质激素上调α7nAChR表达有关.