川贝母组培苗快速繁殖研究

建立川贝母组培苗快繁体系,为实现川贝母工业化育苗、保护野生植物资源和发展人工育种技术提供新的途径.研究植物激素对川贝母鳞片叶形成愈伤组织、分化小鳞茎和诱导鳞茎抽苗以及无根苗生根的影响,筛选出最佳培养基配方.结果表明,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,诱导率为84.33%;诱导产生小鳞茎的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率为82.77%;鳞茎抽苗的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L,抽苗率为85.39%;无根苗生根最佳培养基为MS+NAA 0.3 mg/L,生根率为83.20%.

川贝母悬浮培养细胞活力测定条件的优化

为了利用四氮唑脱氢酶还原法测定川贝母悬浮培养细胞的活力,并对影响其活力测定的各种因素进行了研究.选取四氮唑脱氢酶还原法测定了经三次继代培养的川贝母悬浮培养细胞的活力,并研究了不同四氮唑溶液浓度、缓冲液种类和pH值以及脱氢酶还原反应时间对川贝母悬浮培养细胞活力测定的影响.通过实验得出用四氮唑脱氢酶还原法测定川贝母悬浮细胞活力的最佳条件为：四氮唑溶液最适浓度0.6％,脱氢酶还原反应在Tris-HCl缓冲液中的效果优于磷酸缓冲液和磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液,最适pH为7.0 ～7.5;脱氢酶最适还原反应的时间为18 h.

不同激素配比对卷叶贝母鳞茎诱导效应的影响

目的:研究不同激素配比对卷叶贝母组培苗幼叶诱导产生鳞茎的影响,为扩大川贝母药源提供有效途径。方法:以卷叶贝母组培苗幼叶为外植体,通过正交试验法研究了由6-BA、NAA、2,4-D和KT四种植物激素组成的培养基直接诱导鳞茎产生和增殖的影响;实验以鳞茎的诱导率和平均产生鳞茎数为考核指标,并测定了产生鳞茎的生物碱含量。结果:诱导卷叶贝母组培苗幼叶产生鳞茎的最佳培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0mg/L+KT 1.0 mg/L,其中鳞茎诱导率为83.37%,平均产生的鳞茎数为17.27个;并经测定诱导产生的鳞茎中的生物碱含量为0.389%,是野生川贝母的1.64倍。结论:提供了生产组培川贝母药材的简便快捷方法,为合理开发利用卷叶贝母植物资源和提高药材品质奠定基础。

狭叶红景天再生植株的快速繁育研究

目的:以狭叶红景天的叶柄作为外植体,建立一套狭叶红景天植株的快速繁殖技术。方法:通过选取NAA、6-BA和KT组成的3种植物生长调节剂,设计了L16(43)正交试验,研究了狭叶红景天叶柄产生不定芽的快速诱导方法,并进一步选用6-BA,NAA和IBA的3种植物生长调节剂组成的培养基进行生根培养研究,最终获得了狭叶红景天再生植株。实验结果表明,狭叶红景天不定芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L,经过45d培养后,其不定芽的诱导率为95%;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+IBA 0.5mg/L,经过50d培养后,生根率可达87%。

羌活种子浸提液对3种作物种子萌发及幼苗生长的化感作用

[目的]探讨提高羌活种子快速萌发的最佳方法。[方法]通过室内生物测定法,研究在不同温度下提取羌活种子浸提液,并配制成不同浓度处理小白菜、黑麦和芹菜3种作物种子,以观察其对3种作物种子的萌发和幼苗生长的化感作用。[结果]实验结果表明,在35℃条件下提取的羌活种子浸提液对3种作物种子萌发及幼苗生长各指标的抑制作用最强,其次为25℃,而15℃最弱;对3种作物的萌发率、发芽势、根长、地下鲜重的测定结果均显示,随着浸提液浓度的增加其抑制作用显著增强;对苗高和地上鲜重2个指标的研究发现,小白菜和芹菜幼苗的生长随浸提液浓度升高,呈现出"低促高抑"的现象。另外,3种作物幼苗根系的SOD酶及小白菜和黑麦的POD酶活性都随浸提液浓度的增加表现为持续增高,而芹菜根系POD酶活性却呈"先升后降"趋势。[结论]:适宜温度下浸泡羌活种子有助于减少羌活种子的化感物质,提高萌发率,低浓度有促进小白菜和芹菜幼苗生长的作用,而较高浓度对3种作物幼苗具有一定的损伤作用。

金钱松细胞悬浮培养关键技术研究

目的:建立金钱松细胞的悬浮培养体系,并筛选出金钱松细胞的最佳培养基配方和其培养条件。方法:利用金钱松叶原基诱导产生的翠绿色、较分散的愈伤组织为悬浮培养材料,通过研究其不同激素配比、接种量、蔗糖浓度以及pH值对金钱松细胞悬浮培养的影响。结果:在金钱松细胞的悬浮培养过程中,最佳的培养基配方为MS+2,4-D 0.3mg/L+6-BA 1.0mg/L,并且选择的最佳蔗糖浓度为40g/L、pH值为6.0以及接种量为2.0g/L。

羌活植物离体培养及植株再生研究

目的:建立羌活植物的离体培养方法及植株再生体系,为保护羌活野生植物资源和发展人工育种技术提供新的途径。方法:通过组织培养方法,对羌活根茎、幼叶、幼芽及芽鞘进行研究,并研究不同植物激素对最佳外植体形成愈伤组织、分化不定芽和诱导不定芽生根形成完整植株的影响,筛选出最佳培养基配方。结果:羌活芽鞘是诱导愈伤组织的最适外植体,芽鞘愈伤组织诱导最佳培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+NAA 0.4mg/L,30 d后诱导率为73.33%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,30 d后诱导率为65.54%;诱导无根苗生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.3 mg/L,30 d后生根率为81.11%;选取根系生长良好的组培苗,先在沙砾基质中栽培1周,再移栽到有机质土壤中,30 d后成活率100%。结论:在筛选出最佳外植体的基础上,通过诱导出愈伤组织,并进一步完成对不定芽的诱导及无根苗生根培养,筛选出培育羌活组培苗的最佳条件。