近年来,野生动物的保护研究已成为一大热点,其采样方法主要以非损伤性取样(粪便)为主。为筛选一种操作简单、经济成本较适宜的动物粪便基因组DNA高效提取试剂盒,笔者选用QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit(德国:粪便DNA纯化试剂盒)、生工...近年来,野生动物的保护研究已成为一大热点,其采样方法主要以非损伤性取样(粪便)为主。为筛选一种操作简单、经济成本较适宜的动物粪便基因组DNA高效提取试剂盒,笔者选用QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit(德国:粪便DNA纯化试剂盒)、生工磁珠法基因组DNA抽提试剂盒、Stool Genomic DNA Kit(康为世纪:粪便基因组提取试剂盒)、生工Ezup柱式土壤DNA抽提试剂盒这4种来自不同厂家,其使用频率较高及市售商业化的试剂盒,各自提取4份新鲜藏酋猴(Macaca thibetana)粪便样本的基因组DNA。通过比较各试剂盒所提取基因组DNA的浓度、纯度,并对其16S rRNA进行PCR扩增及singer测序,从而获得不同试剂盒基因组DNA的提取效果。比较发现,Stool Genomic DNA Kit(康为世纪)的效果较好且经济,并将其应用于兽类(野猪),灵长类(黔金丝猴),鸟类(黑颈鹤、灰鹤、斑头雁和红腹角雉)等物种进行验证,发现均获得理想的基因组DNA提取效果,说明Stool Genomic DNA Kit(康为世纪)可作为鸟兽等野生动物粪便基因组DNA提取的有效试剂盒。这一研究结果为其他类似研究提供了参考依据。展开更多
文摘近年来,野生动物的保护研究已成为一大热点,其采样方法主要以非损伤性取样(粪便)为主。为筛选一种操作简单、经济成本较适宜的动物粪便基因组DNA高效提取试剂盒,笔者选用QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit(德国:粪便DNA纯化试剂盒)、生工磁珠法基因组DNA抽提试剂盒、Stool Genomic DNA Kit(康为世纪:粪便基因组提取试剂盒)、生工Ezup柱式土壤DNA抽提试剂盒这4种来自不同厂家,其使用频率较高及市售商业化的试剂盒,各自提取4份新鲜藏酋猴(Macaca thibetana)粪便样本的基因组DNA。通过比较各试剂盒所提取基因组DNA的浓度、纯度,并对其16S rRNA进行PCR扩增及singer测序,从而获得不同试剂盒基因组DNA的提取效果。比较发现,Stool Genomic DNA Kit(康为世纪)的效果较好且经济,并将其应用于兽类(野猪),灵长类(黔金丝猴),鸟类(黑颈鹤、灰鹤、斑头雁和红腹角雉)等物种进行验证,发现均获得理想的基因组DNA提取效果,说明Stool Genomic DNA Kit(康为世纪)可作为鸟兽等野生动物粪便基因组DNA提取的有效试剂盒。这一研究结果为其他类似研究提供了参考依据。