规模化种猪场猪流行性腹泻监测及防控

猪流行性腹泻(PED)是一种以呕吐、脱水以及初生仔猪高死亡率为特征的急性肠道传染病,严重损害猪场的经济效益。广西某规模化种猪场在2021年底暴发猪流行性腹泻后,通过完善生物安全体系、使用自家组织灭活苗和对后备母猪反饲驯化,疫情得到了初步控制。为掌握PED的流行规律以及疫病防控方法,对该猪场2021—2022年产房仔猪死亡率进行了统计,并对PED病原和抗体进行了持续监测。产房仔猪死亡率结果显示,暴发PED期间全场产房仔猪死亡率达20.79%,部分栋舍仔猪死亡率高达71.63%。病原抗体监测结果显示,2021年第四季度场内PEDV阳性样品的Ct值均值最低,且此季度猪群的抗体水平最低。本研究为猪场防控PED提供依据,具有一定的参考意义。

猪流行性腹泻病毒特异性SIgA间接ELISA检测方法的建立及初步应用

以乳汁中SIgA特有的成分SC蛋白为研究对象,运用基因克隆、原核表达等方法,制备兔抗猪SC多克隆抗体,使用猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S截短蛋白进行包被后,初步建立了一种可以检测母猪初乳中PEDV特异性SIgA抗体的ELISA方法。结果显示,PEDV特异性SIgA检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点。结果表明,该方法适用于检测临床中SIgA。该方法的成功建立为生产中评估仔猪从乳汁中获得SIgA的效率及制定更为完善的母猪免疫程序提供了有效的技术支持。

猪流行性腹泻病毒S蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

为深入研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的结构和功能及建立PEDV的血清学检测方法,运用基因克隆技术将目的基因克隆至表达载体pET-30a(+)中,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物纯化后免疫新西兰大白兔获得抗S蛋白的多克隆抗体。SDS-PAGE试验结果显示,成功表达大小为14.2 ku和47.5 ku的目的重组蛋白,Western-blot试验显示目的条带与预期相符且条带单一。对获得的多克隆抗体进行Western-blot和间接免疫荧光验证的结果显示,PVDF膜上的条带与预期条带一致且感染PEDV的Vero细胞内出现特异性绿色荧光信号。结论,本研究通过表达纯化PEDV S蛋白,成功制备具有良好免疫原性的家兔多克隆抗体,为深入研究PEDV的结构和功能奠定了基础,为PEDV的血清学检测方法的建立提供了生物学材料。