铁皮石斛组培苗生长影响因子研究

以铁皮石斛组培苗为材料,研究了铁皮石斛组培苗生长的影响因子,以便优化铁皮石斛组培快繁体系。试验结果表明:低盐培养基1/2 MS更适石斛组培苗生长;添加0.2 mg/L NAA对铁皮石斛组培苗的生长效果显著高于其他生长素;蔗糖质量浓度为25 g/L、无机盐浓度为1/2 MS时培养基渗透压环境更适合铁皮石斛组培苗生长;有机添加物LH(水解乳蛋白)和CH(水解酪蛋白)均对铁皮石斛组培苗生长有促进作用,其中添加0.1 g/L水解乳蛋白最适合铁皮石斛组培苗的生长,0.8 cm组培苗,培养60 d后植株平均株高2.26 cm、茎粗2.73 mm、生根量2.45条、分蘖量3.51株,植株生长旺盛,叶片大深绿色。本研究为建立高效铁皮石斛组培快繁奠定了基础。

锦带花组培快繁体系的建立

以锦带花带腋芽茎段为外植体,探究最佳外植体消毒方法、最适初代培养基、最适增殖培养基,建立锦带花组培快繁体系。结果表明:外植体最佳消毒方法为2%次氯酸钠溶液消毒10 min后,接种至添加125 mg/L羧苄青霉素的MS培养基,外植体污染率仅1.67%,萌发率98.3%;初代培养最适基本培养基为WPM,组培苗平均株高可达5.58 cm、茎粗1.7 cm;最适增殖培养基为WPM+1.0mg/LBA+0.5 mg/LIAA,增殖系数8.0,增殖芽高度1.7 cm,生长势强且未出现玻璃化现象。本研究可为锦带花工厂化生产和繁育提供有效的技术支撑。

铁皮石斛组培快繁技术

以铁皮石斛茎段为外植体,探究最佳的外植体消毒方法和最适的诱导、增殖、生根培养基,进而优化铁皮石斛组培快繁体系。结果表明,最佳外植体消毒方法为30%次氯酸钠消毒10 min,外植体污染率6%,死亡率0;最适诱导培养基为基础培养基(MS)+2 mg·L^(-1)细胞分裂素(BA)+0.5 mg·L^(-1)萘乙酸(NAA),在此培养基中再生芽生长快速且健壮,诱导率为5.6;最适增殖培养基为MS+0.5 mg·L^(-1) NAA+1.0 mg·L^(-1) BA,在此培养基中丛生芽芽势健壮,生长快,增殖率为3.8;最适生根培养基为MS+0.5 mg·L^(-1) NAA,在此培养条件下组培苗的平均根数达7.3条,平均根长5.8 cm,根系正常且生长快速。本研究优化了铁皮石斛组培快繁体系,可为组培快繁工厂化生产流程的进一步优化提供依据。

铁皮石斛一步成苗影响因子试验研究

为优化铁皮石斛一步成苗培养条件,文章通过正交试验研究培养容器、培养基用量、接种材料株高以及接种密度4个因素对铁皮石斛组培苗生长的影响,筛选出最适宜铁皮石斛组培苗一步成苗的培养组合;研究铁皮石斛组培苗一步成苗过程中添加激素和活性炭对植株生长的影响,筛选确定铁皮石斛组培苗一步成苗的最优培养组合。试验结果表明,培养容器是影响铁皮石斛组培苗一步成苗生长的主要影响因素,培养基用量、接种材料株高以及接种密度3个因素分别对铁皮石斛组培苗的不同生长指标产生影响;基本培养基中添加激素对铁皮石斛组培苗一步成苗的效果较好,优于对照(CK)基本培养基;一步成苗培养基中添加活性炭的效果低于对照(CK)一步成苗培养基。试验确定铁皮石斛组培苗一步成苗的最优培养组合为:培养容器240 mL、培养基用量40 mL、接种材料株高1.2 cm、接种密度4芽·瓶^(-1),培养120 d后铁皮石斛组培苗的分蘖量为6.55个,符合出苗标准的合格率为93.67%。

番茄愈伤组织筛选及抗逆突变体的获得

以番茄叶柄为外植体,建立番茄愈伤组织再生体系,并以PEG-8000筛选番茄愈伤组织突变细胞,同时诱导愈伤组织细胞再生,从中筛选生长势强的具有抗逆性的再生植株。结果显示,在MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L 2,4-D培养基上可诱导出质地较硬、结构松散的胚性愈伤组织;将愈伤组织转接到MS+1.0 mg/L BA培养基上,不定芽分化率达100%;将愈伤组织接种到含有PEG-8000的最佳分化培养基上可筛选获得生长健壮、抗逆性强的突变体,在PEG-8000浓度为5%时筛选效果最理想。本试验通过对愈伤组织突变细胞进行定向筛选获取抗逆性再生植株,可为植物抗性育种提供参考。

金银木松散型胚性愈伤组织的诱导

为建立金银木松散型胚性愈伤组织培养体系,该文研究金银木不同外植体、不同植物激素配比对金银木松散型胚性愈伤组织诱导与继代保持的影响。结果表明,金银木叶片为诱导愈伤组织最适外植体;叶片在MS(Murashige&Skoog Basal Medium,MS基础培养基)+0.5 mg/L BA(Benzylaminopurine,苄氨基腺嘌呤)+1.0 mg/L 2,4-D(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-二氯苯氧乙酸,)培养基上可诱导出松散型愈伤组织,愈伤组织诱导率达100%;将松散型愈伤组织转接到MS+0.5 mg/L BA+0.25 mg/L 2,4-D培养基上,每20 d继代培养一次,继代培养2~3次后可获得金银木松散型胚性愈伤组织。

玫瑰石斛组培快繁体系的建立

以玫瑰石斛蒴果为外植体,通过种子无菌萌发诱导原球茎、原球茎增殖与丛生芽分化、生根壮苗试验,建立玫瑰石斛组培快繁体系,为玫瑰石斛繁育和优质种苗生产提供了参考依据。结果显示:玫瑰石斛蒴果经外植体消毒后,将蒴果内种子撒播于1/2MS培养基上,种子可快速萌发形成原球茎;玫瑰石斛原球茎增殖与分化最佳培养基为1/2MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)NAA,原球茎的增殖系数达6.04,丛生芽生长速度快;玫瑰石斛最适的生根壮苗培养基为1/2MS+0.2 mg·L^(-1)NAA+50 g·L^(-1)土豆泥,生根率达100%,平均根数为5.14条,平均株高达5.54 cm。

绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织的诱导

以绒毛白蜡组培苗茎段为外植体,建立绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织诱导体系,为绒毛白蜡遗传转化与离体诱变等研究奠定基础。试验结果显示:幼嫩茎段在WPM+0.5 mg·L^(-1)2,4-D+5 mg·L^(-1)GA_(3)+30 g·L^(-1)蔗糖的培养基上可诱导出理想的松散型愈伤组织;将松散型愈伤组织在MS+0.5 mg·L^(-1)2,4-D+1.0 mg·L^(-1)KT+30 g·L^(-1)蔗糖的培养基上继代培养,每15 d继代1次,继代时选择结构松散质地较硬的愈伤组织,3次继代培养后,可获得绒毛白蜡松散型胚性愈伤组织。

晶帽石斛组培快繁体系优化

以晶帽石斛为试材,采用正交实验方法,研究了基本培养基、生长素种类对晶帽石斛组培苗生长的影响,分析了NAA、水解乳蛋白、MS培养基有机成分、活性炭4个因素、3个水平条件下晶帽石斛组培苗壮苗培养的生长表现,从而确定最佳培养基组合,以期优化晶帽石斛组培快繁体系。结果表明:Anderson培养基和生长素NAA更适合组培苗生长,植株生长旺盛,叶片大而绿;正交实验结果表明,MS培养基有机成分是影响晶帽石斛组培苗生长的主要因素;其次生长素NAA主要影响植株的株高、茎粗、叶片数、叶长,但对生根量无影响;水解乳蛋白主要影响组培苗生根量,对株高、茎粗、叶片数以及叶长无影响;活性炭在晶帽石斛组培苗生长过程中对组培苗生长影响效果最小。试验最终确定晶帽石斛组培苗生长的最适培养基为以Anderson为基本培养基附加0.10 g·L^(-1)活性炭、1.00 mg·L^(-1)NAA、0.05 g·L^(-1)水解乳蛋白、1倍MS培养基有机成分,并附加30 g·L^(-1)蔗糖。