一株解淀粉芽孢杆菌胞外多糖的分离纯化及其抗氧化性研究

从豆瓣酱中分离筛选得到一株高产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的菌株,通过16S rDNA,gyrA和tuf基因序列分析,鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌,命名为Bacillus amyloliquefaciens SQ-2。通过单因素优化,确定最优产糖发酵培养基为蛋白胨10 g/L,酵母粉5 g/L,氯化钠10 g/L,蔗糖20 g/L,最佳工艺条件为pH 8.5,培养时间为42 h,接种量为4%。所产胞外多糖经三氯乙酸除蛋白、离心、乙醇沉淀、透析及冷冻干燥后得到多糖粗品,经二乙氨基乙基(diethylaminoethyl,DEAE)-纤维素离子交换层析柱和Sephadex G100凝胶过滤层析柱纯化后得到多糖纯品。体外抗氧化性试验结果显示:所产EPS具有较好的抗氧化性,当胞外多糖质量浓度为10 mg/mL时,其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率达到81%,对羟基自由基(·OH)清除率达到31%,对H_(2)O_(2)清除率达到72%,说明该EPS可作为一种较好的天然抗氧化剂。